EXTRAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO QUÍMICA, ESTUDOS FARMACOLÓGICOS E AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE AGUDA DO ÓLEO ESSENCIAL DE LIPPIA ORIGANOIDES H.B.K.

Abstract

RESUMO: Lippia origanoides H.B.K. (Verbenaceae) é um arbusto aromático utilizada popularmente para o tratamento de doenças respiratórias e gastrointestinais. Não há evidencia científica de eficácia e segurança em relação ao uso do óleo essencial de Lippia origanoides. O objetivo do presente estudo foi isolar, caracterizar e investigar a toxicidade e propriedades farmacológicas inerentes ao óleo em estudo visando futuramente contribuir com o desenvolvimento de fitomedicamentos. Para tanto, uma prospecção científica e tecnológica foi realizada em bases de dados, avaliação qualitativa da atividade inibidora da acetilcolinesterase pelo teste de Ellman, avaliação do potencial antioxidante in vitro pelos métodos 2,2difenil-1-picrilhidrazil, hidroxila e oxido nítrico. Além disto, foi verificada sua capacidade em inibir a peroxidação lipídica por meio da determinação das substâncias reativas com o ácido tiobarbitúrico, bem como o seu potencial redutor nas concentrações 100, 300 e 900 μM. O ensaio de toxicidade aguda foi seguido se utilizando do método de classe tóxica aguda do Guia 423 da OECD (Organization for Economic Cooperation and Development) nas doses de 300 e 2000 mg/kg via oral. Durante 14 dias após o tratamento foram observados a toxicidade geral, taxa de letalidade, evolução do peso corporal, consumo de água e alimentos, e ainda produção de excretas. Após este período, os animais foram anestesiados com cetamina (0,1ml/10g; i.p.) para coleta de sangue para análises hematológicas e bioquímicas, bem como análise dos principais órgãos (fígado, coração, rins, pulmão, baço e cérebro) para estudo macroscópico e morfológico. Também foi avaliada a atividade locomotora e coordenação motora dos animais tratados com óleo essencial de L. origanoides nos testes do campo aberto e da barra giratória, respectivamente. O óleo essencial de L. origanoides apresentou 25 constituintes, tendo como majoritários os compostos timol com 23,89%, seguido do com carvacrol 21,78% e p-cimeno com 18,87%. Os resultados dos estudos de inibição da acetilcolinesterase permitem concluir que o óleo se demonstrou promissor quanto à inibição da acetilcolinesterase. Na avaliação antioxidante in vitro, em todos os testes, o óleo apresentou significativa capacidade antioxidante. No ensaio de toxicidade aguda, não foram identificados sinais de toxicidade e a DL50 para o extrato categorizou-se como indeterminada. Com relação aos parâmetros fisiológicos, bioquímicos e hematológicos não foram observadas alterações e nem efeitos sobre a atividade locomotora e coordenação motora entre animais após tratamento com óleo essencial de Lippia origanoides nos diferentes protocolos. Além disto, não foi visto mudanças quanto aos aspectos macroscópicos e morfológicos dos principais órgãos. Os resultados sugerem que óleo essencial de Lippia origanoides pode ser seguro em ensaios pré-clínicos, e que o mesmo demonstra potencial farmacológico que precisa ser melhor explorado para esclarecer uma possível ação no sistema nervoso central. Estes resultados ampliam as perspectivas para a realização de outros testes que possam corroborar com a segurança e eficácia da utilização do óleo essencial de Lippia origanoides como produto de importância biotecnológica. ABSTRACT: Lippia origanoides H.B.K. (Verbenaceae) is an aromatic bush commonly used for the treatment of gastrointestinal and respiratory diseases. There is no evidence of scientific efficacy and safety regarding the use of essential oil of Lippia origanoides. The aim of this study was to isolate, characterize and investigate the toxicity and pharmacological properties inherent to the oil under consideration for future contribute to the development of phytomedicines. For this, a scientific and technological prospecting was conducted in databases, qualitative evaluation of the inhibitory activity of acetylcholinesterase by Ellman's test, potential antioxidante avaliation in vitro by 2,2difenil-1-picrylhydrazyl, hydroxyl and nitric oxide. Moreover, it was verified its capacity to inhibit lipid peroxidation by determining substances reactive with thiobarbituric acid, and its potential in reducing concentrations of 100, 300 and 900 uM. The acute toxicity test was followed using the acute toxic class method OECD 423 guide the doses of 300 and 2000 mg / kg orally. For 14 days after treatment were observed general toxicity, lethality rate of evolution of the body weight, food and water consumption, and yet production excreta. After this period, the animals were anesthetized with ketamine (0.1 ml / 10g; ip) for blood collection to hematological and biochemical analysis as well as analysis of major organs (liver, heart, kidney, lung, spleen and brain) to study macroscopic and morphological. It also evaluated the locomotor activity and coordination of animals treated with essential oil Lippia origanoides in the open field test and the swivel bar, respectively. The Lippia origanoides essential oil presented 25 constituents having as the major thymol compounds of 23.89%, followed by carvacrol and p-cymene to 21.78% with 18.87%. Results of acetylcholinesterase inhibition studies support the conclusion that the oil has shown promise for the inhibition of acetylcholinesterase. In vitro antioxidant evaluation in all tests, the oil showed significant antioxidant capacity. For tests on acute toxicity, they were not identified signs of toxicity and LD50 for up-categorized extract as undetermined. Regarding the physiological, biochemical and hematological parameters were observed and changes or effects on locomotor activity and coordination between animals after treatment with essential oil of Lippia origanoides in different protocols. In addition, it was not seen as changes about macroscopic and morphological aspects of the principal organs. The results suggest that essential oil of Lippia origanoides can be safe in preclinical testing, and demonstrate pharmacological potential that needs to be better exploited to clarify a possible action in the central nervous system as shown in this study. The results of this study broaden perspectives to perform other tests that might corroborate the safe and effective use of essential oil of Lippia origanoides, as a product of biotechnological importance.