ANÁLISE DA ATIVIDADE ANSIOLÍTICA E ANTIDEPRESSIVA DA FRAÇÃO ALCALOÍDICA II PROVENIENTE DA CASCA DA RAIZ DA Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir EM CAMUNDONGOS C57BL/6

Abstract

RESUMO: Estima-se que 4,05% da população mundial (301 milhões) possua um transtorno de ansiedade. A ansiedade torna-se patológica quando os comportamentos de evitação e o medo sustentam- se e são perturbadores. A depressão, por sua vez, atinge aproximadamente 3,8% da população. Devido aos efeitos adversos dos ansiolíticos e antidepressivos convencionais, necessita-se de alternativas mais eficazes e com menos efeitos adversos na farmacoterapia desses transtornos. Uma alternativa estaria no uso de produtos naturais, como os alcalóides indólicos, conhecidos como psicodélicos clássicos. A Mimosa tenuiflora (Wild) Poir. (Jurema Preta), planta típica de áreas semiáridas do Brasil, possui alcalóides psicodélicos, como N, N-dimetiltriptamina (DMT), com atividades farmacológicas provavelmente mediadas por receptores serotoninérgicos. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito ansiolítico e antidepressivo da fração alcaloídica II (FA II) proveniente do extrato da casca da raiz da M. tenuiflora em estudos in sílico e in vivo com camundongos C57BL/6. Nos estudos in sílico, foi utilizada a plataforma PreADMET. A Bufotenina e o DMT atravessam livremente a BHE, e a Yuremamina atravessa de forma moderada. Os três compostos da FA II apresentaram média permeabilidade nas células Caco-2. Em relação à absorção intestinal, todas demonstraram níveis elevados. Os valores de ligação às proteínas plasmáticas indicaram que a Bufotenina e o DMT possuem baixa ligação, e a Yuremamina apresenta ligação elevada. Nenhuma das substâncias foi capaz de inibir a P-gp. A Bufotenina e o DMT são substratos fracos da CYP3A4 e não inibem essa enzima, no entanto, a Yuremamina, demonstrou capacidade de inibição. Em relação ao potencial carcinogênico, os três compostos apresentaram resultados negativos em camundongos. Na inibição do gene hERG, a Bufotenina e o DMT demonstraram risco médio, e a Yuremamina apresentou risco alto. Todas os compostos apresentaram resultados negativos para mutagenicidade nas cepas TA1535 +S9, TA100 +S9 e TA100 -S9, exceto a Yuremamina, que apresentou resultado positivo para TA 1535 -S9. Foi realizado o docking molecular para prever a interação entre os constituintes da FA II e seus alvos biológicos, demonstrando que os compostos da FA II foram capazes de interagir com os sítios ativos dos alvos serotoninérgicos. Nos testes comportamentais, foram realizados o Teste do Labirinto em Cruz Elevado (TLCE), Teste da Caixa Claro-Escuro (TCCE), Teste do Campo Aberto (TCA), Teste de suspensão pela cauda (TSC) e RotaRod, com as doses 3, 6 e 9 mg/kg da FA II. Os resultados foram apresentados como média ± erro padrão da média (E.P.M.) e analisados por ANOVA, seguido pelo teste post hoc de Dunnett, utilizando o software GraphPad (versão 8.0). Considerou-se significância estatística para valores de p < 0,05. No TCLE, a FA II na dose de 9 mg/kg apresentou aumento no número de entradas nos braços abertos, e as doses de 3, 6 e 9 mg/kg aumentaram o tempo de permanência dos camundongos nos braços abertos. No TCCE, a FA II reduziu o tempo de latência, indicando efeito ansiolítico. No TCA, a melhor resposta foi observada nas três doses testadas, que reduziram o grooming. No TSC, a FA II reduziu o tempo de imobilidade dos animais em todas as doses. No RotaRod, a dose de 3 mg/kg aumentou o número de quedas dos animais, e as demais doses não alteraram significativamente o tempo de permanência no aparelho. Os testes in sílico demonstraram resultados promissores nos parâmetros estudados. Os testes comportamentais demonstraram que a FA II possui um efeito ansiolítico e antidepressivo. ABSTRACT: It is estimated that 4.05% of the world's population (301 million) has an anxiety disorder. Anxiety becomes pathological when avoidance behaviors and fear are sustained and disruptive. Depression, in turn, affects approximately 3.8% of the population. Due to the adverse effects of conventional anxiolytics and antidepressants, more effective alternatives with fewer adverse effects are needed in the pharmacotherapy of these disorders. One alternative would be the use of natural products, such as indole alkaloids, known as classic psychedelics. Mimosa tenuiflora (Wild) Poir. (Jurema Preta), a plant typical of semiarid areas of Brazil, has psychedelic alkaloids, such as N,N-dimethyltryptamine (DMT), with pharmacological activities probably mediated by serotonergic receptors. This study aimed to evaluate the anxiolytic and antidepressant effects of the alkaloid fraction II (FA II) from the root bark extract of M. tenuiflora in in silico and in vivo studies with C57BL/6 mice. In the in silico studies, the PreADMET platform was used. Bufotenine and DMT freely cross the BBB, and Yuremamine crosses moderately. The three FA II compounds showed medium permeability in Caco-2 cells. Regarding intestinal absorption, all showed high levels. Plasma protein binding values indicated that Bufotenine and DMT have low binding, and Yuremamine has high binding. None of the substances was able to inhibit P-gp. Bufotenine and DMT are weak substrates of CYP3A4 and do not inhibit this enzyme; however, Yuremamine demonstrated inhibition capacity. Regarding carcinogenic potential, the three compounds showed negative results in mice. In the inhibition of the hERG gene, Bufotenine and DMT demonstrated medium risk, and Yuremamine presented high risk. All compounds presented negative results for mutagenicity in the strains TA1535 +S9, TA100 +S9 and TA100 -S9, except Yuremamine, which presented positive results for TA 1535 -S9. Molecular docking was performed to predict the interaction between the constituents of FA II and their biological targets, demonstrating that the compounds of FA II were able to interact with the active sites of the serotonergic targets. In the behavioral tests, the Elevated Plus Maze Test (ELMT), Light-Dark Box Test (LDCT), Open Field Test (OFT), Tail Suspension Test (TSC) and RotaRod were performed, with doses of 3, 6 and 9 mg/kg of FA II. The results were presented as mean ± standard error of the mean (S.E.M.) and analyzed by ANOVA, followed by Dunnett's post hoc test, using GraphPad software (version 8.0). Statistical significance was considered for values of p < 0.05. In the TCLE, FA II at a dose of 9 mg/kg increased the number of entries into the open arms, and the doses of 3, 6 and 9 mg/kg increased the time the mice remained in the open arms. In the TCCE, FA II reduced the latency time, indicating an anxiolytic effect. In the ACT, the best response was observed in the three doses tested, which reduced grooming. In the TSC, FA II reduced the immobility time of the animals in all doses. In the RotaRod, the dose of 3 mg/kg increased the number of falls of the animals, and the other doses did not significantly alter the time spent in the device. The in silico tests showed promising results in the parameters studied. Behavioral tests have demonstrated that FA II has an anxiolytic and antidepressant effect.