http://hdl.handle.net/123456789/3351 2026-08-11T07:52:17Z http://hdl.handle.net/123456789/4206 AVALIAÇÃO MULTIDIMENSIONAL DO MÉTODO DE ACELERAÇÃO CICATRICIAL (MAC)® NO TRATAMENTO DA LEISHMANIOSE TEGUMENTAR: abordagens clínicas histipatológicas e imunológicas LEAL, Paulline Paiva Mendes de Souza RESUMO: As leishmanioses são zoonoses causadas por protozoários do gênero Leishmania, com manifestações clínicas variadas, onde o tratamento convencional enfrenta limitações como elevada toxicidade, custo alto, necessidade de administração parenteral prolongada e baixa continuidade por parte do paciente. Diante da necessidade de terapias mais seguras, acessíveis e de aplicação simplificada, o Método de Aceleração Cicatricial (MAC®) surge como uma abordagem de terapia fotodinâmica não invasiva, que combina um agente fotossensibilizador (FS) com irradiação por Luz Emitida por Diodo (LED) para promover estimulação tecidual. O objetivo da presente pesquisa foi avaliar a atividade antileishmania, a citotoxicidade e parâmetros de ativação de macrófagos do MAC® e seus efeitos terapêuticos no tratamento da Leishmaniose Tegumentar (LT) em camundongos BALB/c. A metodologia do presente trabalho compreendeu abordagens in vitro e in vivo para avaliação da atividade biológica e da segurança do tratamento proposto. In vitro, foram realizados ensaios de atividade contra formas promastigotas, testes de citotoxicidade em macrófagos peritoneais e em eritrócitos de carneiro, bem como a avaliação contra amastigotas internalizadas em macrófagos. Adicionalmente, investigou-se a ativação de macrófagos por meio da análise da atividade lisossomal, da capacidade fagocítica e da produção de óxido nítrico. Também foram conduzidos ensaios de toxicidade aguda, pigmentação e dosagem de nitrito utilizando larvas de Zophobas morio. In vivo, a metodologia incluiu a avaliação clínica das lesões, a determinação da carga parasitária, a quantificação de nitrito e citocinas, além de análises laboratoriais e histopatológicas, visando à caracterização da eficácia terapêutica e dos possíveis efeitos sistêmicos do tratamento. Os resultados in vitro demonstraram que os tratamentos inibiram formas promastigotas do parasito dependente da concentração e do tempo de exposição a luz. O MAC® apresentou alta eficácia contra amastigotas internalizadas em macrófagos, com uma concentração inibitória média (CI50) de 10,92 segundos, além de índice de seletividade contra o parasito (>25) e capacidade de ativar a fagocitose em macrófagos, sem toxicidade observada para eritrócitos de carneiro. Em relação à segurança, o MAC® reduziu a viabilidade em apenas 20% das larvas de Zophobas morio. Nos ensaios in vivo, os camundongos BALB/c tratados com MAC® apresentaram uma redução significativa das lesões ulcerativas e da carga parasitária em 83%. Já na quantificação das citocinas, observou-se elevação dos níveis de IL-10 nos grupos azul de metileno (AM), LED, MAC® e MAC® + Anfotericina B (Anf B), sugerindo modulação imunológica anti- inflamatória. Em relação a quantificação de enzimas séricas, foi observado que apenas o grupo tratado com Anfotericina B 3%, exibiu sinais de nefrotoxicidade. Conclui-se, portanto, que o MAC® atua nas diferentes formas evolutivas do parasito, além de ativar macrófagos, configurando-se como uma abordagem terapêutica promissora para a Leishmaniose Tegumentar, por sua acessibilidade econômica e praticidade de aplicação, quando comparado ao tratamento medicamentoso. Sua aplicação é restrita a profissionais habilitados sendo capaz de acelerar a cicatrização, reduzir a carga parasitária e apresentar menor toxicidade em comparação ao tratamento convencional. ABSTRACT: Leishmaniasis is a zoonotic disease caused by protozoa of the genus Leishmania, with diverse clinical manifestations. Conventional treatment faces limitations such as high toxicity, high cost, the need for prolonged parenteral administration, in addition the low patient adherence. Having regard to the need for safer, more accessible, and simpler therapies, the Scar Acceleration Method (MAC®) emerges as a non-invasive photodynamic therapy approach that combines a photosensitizing agent (PA) with Light Emitting Diode (LED) irradiation to promote tissue stimulation. The objective of this research was to evaluate the antileishmanial activity, cytotoxicity, and macrophage activation parameters of MAC® and its therapeutic effects in the treatment of cutaneous leishmaniasis (CL) in BALB/c mice. The methodology of this work consisted of in vitro and in vivo approaches to evaluate the biological activity and safety of the proposed treatment. In vitro assays were performed to assess activity against promastigote forms, cytotoxicity tests in peritoneal macrophages and sheep erythrocytes, as well as evaluation against amastigotes internalized in macrophages. Additionally, macrophage activation was investigated through analysis of lysosomal activity, phagocytic capacity, and nitric oxide production. Acute toxicity, pigmentation, and nitrite dosage assays were also conducted using Zophobas morio larvae model. In vivo, the methodology included clinical evaluation of lesions, determination of parasite load, quantification of nitrite and cytokines, as well as laboratory and histopathological analyses, aiming at characterizing the therapeutic efficacy and possible systemic effects of the treatment. The in vitro results showed that the treatments inhibited promastigote forms of the parasite depending on the concentration and time of exposure to light. MAC® demonstrated high efficacy against amastigotes internalized in macrophages, with a mean inhibitory concentration (IC50) of 10.92 seconds, in addition to a selectivity index against the parasite (>25) and the ability to activate phagocytosis in macrophages, without observed toxicity to sheep erythrocytes. Regarding safety, MAC® reduced the viability of Zophobas morio larvae by only 20%. In in vivo assays, BALB/c mice treated with MAC® showed a significant reduction in ulcerative lesions and parasite load by 83%. In cytokine quantification, elevated IL-10 levels were observed in the methylene blue (MB), LED, MAC®, and MAC® + Amphotericin B (Amp B) groups, suggesting anti- inflammatory immune modulation. Regarding the quantification of serum enzymes, it was observed that only the group treated with Amp B 3% presented signs of nephrotoxicity. It is concluded, therefore, that MAC® acts on the different evolutionary forms of the parasite, in addition to activating macrophages, thus configuring itself as a promising therapeutic approach for cutaneous leishmaniasis, due to its economic accessibility and ease of application when compared to drug treatment. Its application is restricted to qualified professionals and is able of accelerating healing, reducing the parasitic load, and presenting lower toxicity compared to conventional treatment. Orientador: Prof. Dr. Michel Muálem de Moraes Alves Examinadora interna: Profa. Dra Luanna Soares de Melo Evangelista Examinador interno: Prof. Dr. André Luis Menezes Carvalho Examinador externo: Prof. Dr Juan Carlos Ramos Gonçalves - UFPB Examinador externo: Prof. Dr Francisco de Assis Leite Sousa - UFRPE 2026-07-22T00:00:00Z http://hdl.handle.net/123456789/4157 AVALIAÇÃO ECOCARDIOGRÁFICA DO VENTRÍCULO ESQUERDO EM CÃES DA RAÇA SHIH TZU HÍGIDOS MARQUES, Danielle Climaco RESUMO: Os Shih Tzu destacam-se como uma das raças de cães de pequeno porte mais populares mundialmente. No entanto, parâmetros ecocardiográficos específicos para essa raça ainda não estão bem estabelecidos na medicina veterinária. O objetivo deste estudo foi estabelecer parâmetros ecocardiográficos volumétricos e lineares de referência para o ventrículo esquerdo em cães hígidos da raça Shih Tzu. Foram avaliados 30 cães, sendo 17 fêmeas e 13 machos, com idades variando entre 0,33 e 7 anos, e peso entre 1,7 e 11,6 kg. Os animais foram contidos fisicamente e submetidos a ecocardiografia para a mensuração dos diâmetros do VE (em eixo longo e eixo curto), diâmetro da aorta, fração de ejeção (FE), volume diastólico final do ventrículo esquerdo (LVEDV), volume sistólico final do ventrículo esquerdo (LVESV) e suas indexações ao peso (LVEDV.I.P e LVESV.I.P) e área de superfície corporal (LVEDV.I.B e LVESV.I.B) em cães hígidos da raça Shih Tzu. Os dados volumétricos foram obtidos pelo método de Simpson biplanar, utilizando imagens apicais de duas e quatro câmaras. O valor médio para FE foi 63,19 ± 6,41%. O LVEDV médio foi 10,35 ± 3,25 mL, enquanto o LVEDV.I.B foi 29,23 ± 12,03 mL/m², e o LVEDV.I.P foi 1,85 ± 0,41 mL/kg. O valor médio para LVESV foi 4,1 ± 1,31 mL, enquanto o LVESV.I.B foi 11,01 ± 1,34 mL/m², e LVESV.I.P foi 0,67 ± 0,15 mL/kg. Não foram observadas diferenças significativas entre machos e fêmeas nos valores encontrados. O peso foi identificado como a principal covariável associada aos volumes do ventrículo esquerdo. Os valores obtidos são inéditos para a raça Shih Tzu. A média do diâmetro interno do ventrículo esquerdo no eixo curto foi de 2,26 ± 0,31 cm, enquanto no eixo longo foi de 2,08 ± 0,28 cm. A média da razão VE/Ao no eixo longo foi de 2,27 ± 0,29, e no eixo curto, 2,47 ± 0,34. Apesar de ser encontrado diferença estatística significativa, as análises Bland-Altman demonstram que o viés é de baixa magnitude e que as diferenças entre os métodos de mensuração do diâmetro do VE e suas indexações à aorta dentro de limites clinicamente aceitáveis em cães da raça Shih Tzu saudáveis. Além disso, os valores de VE/Ao observados em cães Shih Tzu hígidos foram superiores aos previamente descritos na literatura para populações caninas gerais e outras raças, sugerindo possíveis particularidades morfofuncionais intrínsecas que podem refletir diferenças anatômicas e funcionais específicas. Esses achados fornecem parâmetros ecocardiográficos de referência específicos para a raça Shih Tzu, contribuindo para uma avaliação cardíaca mais precisa na rotina clínica. ABSTRACT: Shih Tzus are among the most popular small dog breeds worldwide. However, breed-specific echocardiographic parameters for this breed remain poorly established in veterinary medicine. This study aimed to establish reference volumetric and linear echocardiographic parameters for the left ventricle in healthy Shih Tzu dogs. A total of 30 dogs were evaluated, including 17 females and 13 males, aged between 0.33 and 7 years, and weighing between 1.7 and 11.6 kg. The animals were manually restrained and underwent echocardiographic examination for measurement of left ventricular diameters (in long- and short-axis views), aortic diameter, ejection fraction (EF), left ventricular end-diastolic volume (LVEDV), left ventricular end-systolic volume (LVESV), and their indexations to body weight (LVEDV.I.P and LVESV.I.P) and body surface area (LVEDV.I.B and LVESV.I.B). Volumetric data were obtained using the biplane Simpson’s method from apical two- and four-chamber views. The mean EF was 63.19 ± 6.41%. The mean LVEDV was 10.35 ± 3.25 mL, while LVEDV.I.B was 29.23 ± 12.03 mL/m² and LVEDV.I.P was 1.85 ± 0.41 mL/kg. The mean LVESV was 4.10 ± 1.31 mL, while LVESV.I.B was 11.01 ± 1.34 mL/m² and LVESV.I.P was 0.67 ± 0.15 mL/kg. No significant differences were observed between males and females. Body weight was identified as the main covariate associated with left ventricular volumes. The values obtained are novel for the Shih Tzu breed. The mean internal diameter of the left ventricle in the short-axis view was 2.26 ± 0.31 cm, and in the long-axis view, 2.08 ± 0.28 cm. The mean LV/Ao ratio in the long-axis view was 2.27 ± 0.29, and in the short-axis view, 2.47 ± 0.34. Although a statistically significant difference was found, Bland–Altman analysis demonstrated a low-magnitude bias, and the differences between measurement methods and their aortic indexations remained within clinically acceptable limits in healthy Shih Tzus. Moreover, the LV/Ao ratios observed in healthy Shih Tzus were higher than those previously reported for general canine populations and other breeds, suggesting potential intrinsic morphofunctional characteristics that may reflect specific anatomical and functional distinctions. These findings provide breed-specific echocardiographic reference values for Shih Tzus and contribute to more accurate cardiac assessments in clinical practice.. Orientador: Prof. Dr. Flávio Ribeiro Alves Examinador interno: Prof. Dr. Michel Mualém de Moraes Alves Examinador externo: Prof. Dr. Felipe de Jesus Moraes Júnior - UEMA Examinador externo: Prof. Dr. Porfirio Candanedo Guerra Examinador externo: Prof. Dr. Renan Paraguassu de Sá Rodrigues - UFCA 2025-12-17T00:00:00Z http://hdl.handle.net/123456789/4076 ESTUDO DE TOXICIDADE AGUDA E EFEITO CICATRIZANTE DO BIOPOLÍMERO AMILÁCEO COM EXTRATO DE BARBATIMÃO (STRYPHNODENDRON CORIACEUM BENTH.) LIMA, Thamires Pereira dos Santos Resumo: O Barbatimão do Piauí (Stryphnodendron coriaceum Benth.) é uma planta endêmica da região nordeste do Brasil, sobretudo nos estados do Maranhão, Piauí, Ceará, Tocantins e oeste da Bahia. Este vegetal é associado à intoxicação alimentar de animais de rebanho, sobretudo bovinos e caprinos. No entanto, segundo a cultura popular esta planta também é utilizada no tratamento de diversas moléstias, como é o caso úlceras, gastrites, colites entre outras. Neste contexto, o trabalho propõe o desenvolvimento de um produto cicatrizante elaborado com o extrato de Stryphnodendron coriaceum Benth. agregado a um compósito amiláceo de melamina- formaldeído, que funcionará como meio para a liberação controlada do princípio ativo, ao mesmo tempo em que age como proteção contra agentes externos. O produto desenvolvido foi caracterizado por Espectroscopia na região do Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), teste de viscosidade, análise termogravimétrica (TGA), estabilidade da dispersão. O composto foi preparado a partir da mistura de extrato de barbatimão em um compósito de amido e hexametilol-melamina na proporção de 40% em massa da resina. As formulações nas concentrações 0,15 mg/mL, 1,5 mg/mL, 15 mg/mL e 150 mg/mL de extrato de barbatimão passaram pelo teste de toxicidade em Zophobas morio e teste de cicatrização em ratos por um período de 21 dias para determinar a melhor formulação para o produto. O biopolímero amiláceo com extrato de barbatimão (Stryphnodendron coriaceum benth) possui estabilidade térmica (TGA), durabilidade e baixa toxicidade, compatíveis com um curativo de longa duração, porém teve o efeito cicatrizante prejudicado pela presença de componente amiláceo que causou reação tipo corpo estranho. Por ser uma formulação promissora, deve ser corrigido em sua formulação e testado novamente no protocolo de cicatrização. Abstract: Barbatimão do Piauí (Stryphnodendron coriaceum Benth.) is a plant endemic to the northeast region of Brazil, especially in the states of Maranhão, Piauí, Ceará, Tocantins and western Bahia. This vegetable is associated with food poisoning in livestock animals, especially cattle and goats. However, according to popular culture, this plant is also used to treat various illnesses, such as ulcers, gastritis, colitis, among others. In this context, the work proposes the development of a healing product made with Stryphnodendron coriaceum Benth extract. added to a starchy melamine- formaldehyde composite that will function as a means for the controlled release of the active ingredient, while also acting as protection against external agents. The developed product was characterized by Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), viscosity test, Thermogravimetric Analysis (TGA), dispersion stability. The compound was prepared from a mixture of barbatimão extract in a composite of starch and hexamethylol-melamine in a proportion of 40% by mass of the resin. The formulations at concentrations of 0.15 mg/mL, 1.5 mg/mL, 15 mg/mL and 150 mg/mL of barbatimão extract underwent toxicity testing on Zophobas morio and healing tests on rats for a period of 21 days to determine the best formulation for the product. The starchy biopolymer with barbatimão extract (Stryphnodendron coriaceum benth) has thermal stability (TGA), durability and low toxicity, compatible with a long-term dressing, but its healing effect was impaired by the presence of a starchy component that caused a foreign body reaction. As it is a promising formulation, its formulation should be corrected and tested again in the healing protocol. Orientador: Prof. Dr. Amilton Paulo Raposo Costa Examinador externo: Prof. Dr. Antônio de Sousa Júnior - CTT Examinador externo: Prof. Dr. Antônio Luis Martins Maia Filho - UESPI Examinador interno: Prof. Dr. Michel Mualém de Moraes Alves Examinador interno: Prof. Dr. Flávio Ribeiro Alves 2025-10-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/123456789/3987 LEISHMANIOSE EM GATOS (FELIS CATUS DOMESTICUS) NA REGIÃO MEIO NORTE DO BRASIL: aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos BATISTA, Ianete Lima RESUMO: A leishmaniose felina (LFe), causada por Leishmania spp., é uma zoonose emergente com impacto crescente na saúde pública, especialmente em regiões endêmicas como o Nordeste brasileiro. Este estudo investigou a epidemiologia, manifestações clínicas e alterações histopatológicas da pele na Leishmaniose felina (Felis catus domesticus) de Teresina (PI) e Timon (MA). Realizou-se um estudo transversal com 327 felinos (164 em Teresina; 163 em Timon), por randomização de bairros. Amostras de sangue, foram coletadas para sorologia (ELISA adaptado e para retrovírus), medula óssea e linfonodos para o cultivo e a histopatologia dos animais doentes. Fatores associados à infecção foram determinados por análise de questionários epidemiológicos, complementados por avaliação de fichas clínicas para caracterização dos sinais sugestivos da doença. Dos oito animais doentes, apenas dois (Teresina - PI) foram avaliados complementarmente com hemograma, bioquímica sérica (ureia, creatinina, ALT, AST, albumina/proteína total) e histopatologia da pele. Realizou-se xenodiagnóstico com Lutzomyia longipalpis em um felino com lesões cutâneas para avaliação da capacidade infectiva. Os resultados deste estudo revelaram importantes achados sobre a leishmaniose felina na região Meio-Norte do Brasil. A análise sorológica demonstrou prevalência de 14,63% em Teresina (24/164 animais) e 9,81% em Timon (16/163). A confirmação parasitológica foi obtida em oito animais (3,65% em Teresina e 1,22% em Timon), diagnosticados através de cultura de linfonodos poplíteos, com detecção adicional de amastigotas em esfregaços cutâneos em um animal. Todos os felinos doentes apresentaram manifestações clínicas evidentes. A linfadenomegalia de linfonodos poplíteos foi observada em 100% dos casos (8/8), enquanto somente um felino manifestou lesões cutâneas variadas, incluindo nódulos característicos nas orelhas, dorso e focinho. A alopecia esteve presente em 62,5% dos casos (5/8) e 50% dos animais (4/8) apresentaram perda de peso acentuada. Nos exames complementares realizados em dois animais, os achados hematológicos revelaram leucocitose, anemia e trombocitopenia leve. O perfil bioquímico mostrou hipoalbuminemia, elevação de ureia e aumento de AST. O xenodiagnóstico realizado em um felino sintomático forneceu dados relevantes sobre a transmissão: 40% dos flebotomíneos (24/60) se alimentaram no animal, sendo que 41% (10/24) apresentaram infecção por promastigotas no trato digestivo, com intensidade parasitária classificada como alta carga parasitária. As análises histopatológicas demonstraram alterações epidérmicas significativas, incluindo acantose, espongiose e paraqueratose. Na derme, observou-se infiltrado inflamatório polimorfonuclear com formação de granulomas característicos. Notavelmente, formas amastigotas foram identificadas em todas as amostras de pele analisadas (8/8), confirmando a disseminação tecidual do parasito. A análise epidemiológica identificou dois fatores de risco significativos: o acesso à rua e a convivência com cães. Todos os animais testados foram negativos para FIV e FeLV, excluindo a possibilidade de coinfecções que pudessem agravar o quadro. Os achados de necropsia complementares revelaram rins aumentados e alterações hepáticas degenerativas. Felinos da região Meio-Norte do Brasil apresentam infecção ativa por Leishmania spp., com manifestações clínicas e histopatológicas sugestivas para a doença. Os resultados reforçam o potencial desses animais no ciclo zoonótico, destacando a necessidade de inclusão da LFe em programas de vigilância ABSTRACT: Feline leishmaniasis (FeL), caused by Leishmania spp., is an emerging zoonosis with increasing public health impact, particularly in endemic regions such as Northeast Brazil. This study investigated the epidemiology, clinical manifestations, and histopathological skin changes in feline leishmaniasis (Felis catus domesticus) in Teresina (Piauí) and Timon (Maranhão). A cross-sectional study was conducted with 327 cats (164 in Teresina; 163 in Timon), randomized by neighborhood. Blood samples were collected for serology (adapted ELISA and retrovirus testing), while bone marrow and lymph nodes were sampled for culture and histopathology in diseased animals. Factors associated with infection were determined through epidemiological questionnaire analysis, supplemented by clinical record evaluation to characterize disease-related signs. Of the eight diseased animals, only two (from Teresina - PI) underwent additional assessment, including complete blood count, serum biochemistry (urea, creatinine, ALT, AST, albumin/total protein), and skin histopathology. Xenodiagnosis using Lutzomyia longipalpis was performed on one feline with skin lesions to assess infectivity potential. The results revealed significant findings on feline leishmaniasis in Brazil's Mid-North region. Serological analysis showed a prevalence of 14.63% in Teresina (24/164 animals) and 9.81% in Timon (16/163). Parasitological confirmation was obtained in eight animals (3.65% in Teresina and 1.22% in Timon), diagnosed via popliteal lymph node culture, with additional amastigote detection in skin smears in one animal. All infected cats exhibited evident clinical manifestations. Popliteal lymphadenomegaly was observed in 100% of cases (8/8), while only one feline presented varied skin lesions, including characteristic nodules on the ears, back, and snout. Alopecia was present in 62.5% of cases (5/8), and 50% of animals (4/8) showed marked weight loss. In the two animals that underwent additional testing, hematological findings revealed leukocytosis, anemia, and mild thrombocytopenia. Biochemical profiles indicated hypoalbuminemia, elevated urea, and increased AST. Xenodiagnosis in one symptomatic feline provided relevant transmission data: 40% of sandflies (24/60) fed on the animal, with 16.6% (10/60) showing digestive tract infection by promastigotes, classified as high parasitic load. Histopathological analysis demonstrated significant epidermal changes, including acanthosis, spongiosis, and parakeratosis. The dermis exhibited polymorphonuclear inflammatory infiltrate with characteristic granuloma formation. Notably, amastigote forms were identified in all skin samples analyzed (8/8), confirming tissue dissemination of the parasite. Epidemiological analysis identified two significant risk factors: outdoor access and cohabitation with dogs. All tested animals were negative for FIV and FeLV, ruling out potential coinfections that could worsen the condition. Additional necropsy findings revealed enlarged kidneys and degenerative liver changes. Cats in Brazil's Mid-North region exhibit active Leishmania spp. infection, with clinical and histopathological manifestations suggestive of the disease. These findings reinforce the potential role of felines in the zoonotic cycle, highlighting the need to include FeL in surveillance programs. Orientadora: Prof. Dra. Ivete Lopes de Mendonça Examinadora externa: Prof. Dra. Maria Regiane Araújo Soares - CSHNB/UFPI Examinador externo: Prof. Dr. Francisco de Assis Leite Souza - UFRPE Examinador externo: Prof. Dr. Regis Bernardo Brandim Gomes - FIOCRUZ Examinador interno: Prof. Dr. Michel Muálem de Moraes Alves 2025-07-28T00:00:00Z