ATIVIDADES ANTI-INFLAMATÓRIA E ANTIOXIDANTE DO p-CUMARATO DE ETILA EM MODELOS DE INFLAMAÇÃO AGUDA.

Abstract

RESUMO: O sistema imune é o conjunto de barreiras anatômicas, constituintes celulares e humorais, que tem como função primária a proteção contra antígenos e recuperação de danos celulares. O processo inflamatório é resultado desta defesa e, quando não controlado, pode dar origem a diversas doenças, tais como artrite reumatoide, reações alérgicas, dentre outros. A investigação do efeito anti-inflamatório e antioxidante de produtos de plantas medicinais como adjuvantes ao tratamento destas doenças tem relevância devido os fármacos anti-inflamatórios não esteroides e glicocorticoides possuírem vários efeitos adversos, como úlceras gástricas e alterações metabólicas. O p-cumarato de etila (p-CE) é um fenilpropanoide presente em plantas do gênero Ipomoea usadas popularmente para tratamento de processos inflamatórios. Apesar de já ter sido descrita sua atividade antimicrobiana após isolamento a partir da Tabebuia aurea (Manso) S. Moore, sua ação anti-inflamatória nunca foi avaliada. Sendo assim, este trabalho teve por objetivo investigar o efeito do p-CE sobre os parâmetros inflamatórios e do estresse oxidativo e os seus possíveis mecanismos de ação. Inicialmente, foi realizado o teste de toxicidade oral aguda (2000 m/kg) em camundongos Swiss (25-35 g), machos e fêmeas, durante 14 dias. Em seguida, fez-se a avaliação do efeito anti-inflamatório do p-CE nas doses de 50, 100, 150 e 200 mg/kg, v.o., através do modelo de edema de pata induzido por carragenina (1%, 50 μL), bem como análise histológica. Em continuidade à avaliação anti-inflamatória, foi realizada a indução de edema por composto 48/80 (12 μg/pata), histamina (100 μg/pata), serotonina (100 μg/pata) e prostaglandina E2 (3 nmol/pata). Além disso, induziu-se peritonite nos camundongos através da administração de carragenina (500 μg/cavidade) para a contagem de monócitos, neutrófilos, linfócitos e leucócitos totais, mieloperoxidase (MPO), interleucina 6 (IL-6) e 8 (IL-8), nitrito (NO2-), glutationa reduzida(GSH) e malondialdeído (MDA). As alterações no tecido gástrico foram analisadas após a administração de sobredose de p-CE (450 mg/kg, v.o.) em comparação à indometacina (20 mg/kg, v.o.), fármaco padrão utilizado ao longo de todos os experimentos. Como resultado, observou-se que o p-cumarato de etila não apresentou efeito tóxico sobre os camundongos. Além disso, ocorreu inibição significativa do edema de pata induzido por carragenina em todas às 4 horas de avaliação, nas doses de 150 e 200 mg/kg. O p-CE (150 mg/kg, v.o.) também reduziu significativamente os edemas induzidos pelos agentes edematogênicos, contagem total (p<0,001) e diferencial de leucócitos do exsudato peritoneal, MPO (p<0,01) , IL-6 (p<0,05) e IL-8 (p<0,5), MDA (p<0,5) e NO2- (p<0,001), com restauração dos níveis de GSH (p<0,5). Além disso, não foram observadas formações de lesões gástricas significativas (p<0,0001), diferente da indometacina (20 mg/kg). Em conjunto, estes resultados sugerem que o p-cumarato de etila apresenta atividade anti-inflamatória e, distintamente do AINE empregado como padrão, não causa lesões no tecido gástrico demonstrando ser um importante candidato para o tratamento adjuvante de processos inflamatórios. Desta forma, ressalta-se que o mesmo possa atuar através da inibição dos mediadores inflamatórios, migração de leucócitos e formação de citocinas pró-inflamatórias.................ABSTRACT The immune system is the set of anatomical barriers, cellular constituents and humoral, whose primary function is the protection against antigens and the recovery of cellular damages. The inflammatory process is the result of this defense and, when uncontrolled, can give rise to several diseases, such as rheumatoid arthritis, allergic reactions, among others. Research into the anti-inflammatory and antioxidant effects of herbal products as adjuncts to the treatment of these diseases is relevant because the anti-inflammatory non-steroids drugs and glucocorticoids have several adverse effects, such as gastric ulcers and metabolic disorders. Ethyl p-coumarate (p-CE) is a phenylpropanoid present in plants of the genus Ipomoea, popularly used for the treatment of inflammatory processes. Although its antimicrobial activity has been described after isolation from Tabebuia aurea (Manso) S. Moore, its anti-inflammatory action has never been evaluated. Therefore, this work aimed to investigate the effect of p-CE on inflammatory and oxidative stress parameters and its possible mechanisms of action. Initially, the acute oral toxicity test (2000 mg/kg) was performed in Swiss mice (25-35 g), male and female, for 14 days. After, the anti-inflammatory effect of p-CE was evaluated at doses of 50, 100, 150 and 200 mg/kg, po, in carrageenan-induced paw edema model (1%, 50 μL), as well as histological analysis. Continuing the anti-inflammatory evaluation, edema was induced by various agents involved in the development of the inflammatory process - compound 48/80 (12 μg/paw), histamine (100 μg/paw), serotonin (100 μg/paw) and prostaglandin E2 (3 nmol/paw). In addition, peritonitis was induced in mice with carrageenan (500 μg/cavity) for counting of monocyte, neutrophil, lymphocyte and total leukocytes, myeloperoxidase (MPO), interleukin 6 (IL-6) and 8 (IL-8), nitrite (NO2-), reduced glutathione (GSH) and malondialdehyde (MDA). Changes in gastric tissue were analyzed after administration of ethyl p-coumarate (450 mg/kg, po) compared to indomethacin (20 mg/kg, p.o.), the standard drug used throughout all experiments. As a result, it was observed that ethyl p-coumarate had no toxic effect on the mice. In addition, significant inhibition of carrageenan-induced paw edema occurred at all at 4 hours of evaluation at doses of 150 and 200 mg/kg. The p-CE (150 mg/kg, p.o.) also significantly reduced edema induced by edematogenic agents, total count (p<0.001) and leukocyte differential of peritoneal exudate, MPO (p<0.01), IL-6 (p<0.05) and IL-8 (p<0.5), MDA (p<0.5), GSH (p<0.5) and NO2- (p<0.001). Furthermore, formation of significant gastric lesions weren't observed (p <0.0001), different from indomethacin (20 mg/kg). Taken together, these results suggest that ethyl p-coumarate exhibits anti-inflammatory activity and, distinct from NSAID used as standard, does not cause lesions in the gastric tissue proving to be an important candidate for the adjuvant treatment of inflammatory processes. In this way, it is emphasized that it can act through inhibition of inflammatory mediators, leukocyte migration and formation of pro-inflammatory cytokines.