ATIVIDADE ANTI-INFLAMATÓRIA DO DERIVADO BENZOILTRIPTAMINICO N-SALICILOILTRIPTAMINA (NST) EM MODELOS ANIMAIS

Abstract

RESUMO: A inflamação é um fenômeno que envolve a participação de diversos mediadores, como histamina, serotonina, bradicinina, TNF-α, IL-1β, e as prostaglandinas. Estes mediadores induzem intensa migração de neutrófilos para os tecidos inflamados. Dentre os fármacos utilizados para o tratamento da inflamação incluem os anti-inflamatórios não-esteroidais (coxibes) e os corticoides, entretanto possuem vários efeitos colaterais, especialmente quando utilizados cronicamente. Substâncias que possuem núcleo indólico têm sido utilizadas no tratamento de afecções inflamatórias apresentando boa efetividade e baixa toxicidade. O NST constituído por núcleo indólico apresentou atividades anti-inflamatória e antioxidante em diferentes modelos experimentais. O objetivo deste trabalho foi investigar a atividade anti-inflamatória do derivado benzoiltriptaminico N-saliciloiltriptamina (NST) e os possíveis mecanismos de ação. Foram utilizados camundongos Swiss (25-30 g) e ratos Wistar (150-210g), machos e fêmeas. Para avaliação da atividade antiedematogênica do NST foi utilizado o modelo de edema de pata induzido por carragenina em ratos. Em camundongos, a atividade antiedematogênica do NST foi avaliada diante dos seguintes agentes flogisticos: dextrana, composto 48/80, histamina, serotonina, capsaicina e prostaglandina. Em seguida, investigou-se o efeito do NST sobre a degranulação de mastócitos mesenteriais induzida pelo composto 48/80 (experimento ex vivo) em ratos. Utilizou-se também o modelo de peritonite induzida por carragenina para elucidação dos possíveis mecanismos de ação. Inicialmente foi realizada a contagem total e diferencial de leucócitos, análise da concentração de proteínas totais, atividade de mieloperoxidase (MPO), catalase, concentração de nitrito (NO2-) e espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Avaliou-se também a incapacitação articular induzida por carragenina através do tempo de elevação da pata (TEP) em incapacitômetro. Por fim, avaliou-se a variação do edema, tempo de elevação da pata (TEP) e a migração de leucócitos no modelo de artrite gotosa induzida por cristais de ácido úrico em ratos tratados com NST. Todos os protocolos foram aprovados pelo Comitê de Ética Animal/UFPI, Nº. 82/2014. O NST 100 e 200 mg/kg (i.p.) reduziu o edema de pata induzido por carragenina da 1ª à 5ª hora (*p< 0,05). De forma semelhante, o NST na dose de 100 mg/kg reduziu o edema induzido por dextrana, composto 48/80, histamina, serotonina, capsaicina e prostaglandina, durante o tempo de observação (*p< 0,05). Os grupos tratados com NST nas doses de 50, 100 e 200 mg/kg inibiram a degranulação de mastócitos (*p<0.05) quando comparado ao grupo veículo. O NST nas doses de 100 e 200 mg/kg (i.p.) inibiu a migração de leucócitos no exsudato peritoneal, a atividade da mieloperoxidase e catalase; (*p< 0,05) e as concentrações de NO2- e TBARS. NST também reduziu significativamente (*p< 0,05) o (TEP) já na primeira hora após a indução da lesão articular. Por ultimo, o NST nas doses de 100 e 200 mg/kg inibiu tanto a variação do edema o TEP (***p<0.001) e migração de leucócitos no modelo de artrite gotosa, durante o tempo de observação. Conclui-se por tanto, que a substância em estudo exerce atividade anti-inflamatória através da inibição do edema de pata induzido por diferentes agentes flogisticos, por inibir a degranulação de mastócitos, diminuir a migração de leucócitos nos modelos testados e reduzir o estresse oxidativo. ABSTRACT Inflammation is a phenomenon which involves the participation of various mediators, such as histamine, serotonin, bradykinin, TNF-α, IL-1β, and prostaglandins. These mediators are able to induce marked neutrophils migration towards inflammed tissues. Among drugs commonly used to treat inflammatory diseases, non-steroidal anti-inflammatory drugs and corticoids are included as the most important drugs. However, both classes are able to induce several side effects, especially when used chronically. Interestingly, compounds which possess an indole nucleus have been used in the treatment of inflammatory diseases, and have demonstrated good efficacy and low toxicity. The N-salicyloyltryptamine (NST) consists of an indole-derivative compound with anti-inflammatory and antioxidant activities in different experimental models. The aim of this study was investigate the anti-inflammatory activity of the NST, and its possible mechanisms of action. Male and female Swiss mice (25-30g) and Wistar rats (150 – 210g) were used. The NST-induced antiedematogenic activity was evaluated on the carrageenan-induced paw edema in rats, as well as the paw edema induced by some phlogistic agents in mice, as follows: dextran, compound 48/80, histamine, serotonin, prostaglandin E2 and capsaicin. Then, the effect of NST was investigated on compound 48/80-induced ex vivo mast cell degranulation in mice mesenteric bed. The carrageenan-induced peritonitis model in rats was also used in order to elucidate the possible mechanisms of action. In this model, total and differential leukocyte count, total protein concentration, myeloperoxidase activity (MPO), catalase, nitrite concentration (NO2-) and thiobarbituric acid reactive species (TBARS) was determined. The carrageenan-induced rat knee joint incapacitation test was assessed by the determination of paw elevation time (PET). Finally, the variation of edema, paw elevation time (PET), and leukocyte migration were evaluated in gouty arthritis model induced by uric acid crystals in rats treated with NST. All protocols were approved by the Animal Experimentation Ethics Committee, UFPI, no. 82/2014. The NST (100 and 200 mg/kg. i.p.) was able to reduce the paw edema induced by carrageenan from the first to fifth hour (p<0.05). Similarly, the NST (100 mg/kg) reduced the edema induced by dextran, compound 48/80, histamine, serotonin, prostaglandin E2 or capsaicin during the whole observation time (p<0.05). The experimental groups pretreated with NST (50, 100 and 200 mg/kg) inhibited mast cells degranulation when compared with vehicle group (p<0.05). Furthermore, the NST (100 and 200 mg/kg, i.p.) inhibited leukocytes migration, myeloperoxidase and catalase activity in the peritoneal exudate, as well as NO2- and TBARS levels (p<0.05). Besides, NST also reduced significantly the paw elevation time within the first hour after joint injury induction (p<0.05). Finally, NST (100 and 200 mg/kg) inhibited both variation of edema and leukocyte migration in the gouty arthritis model, during the whole observation time (p<0.001). Therefore, the NST exerts anti-inflammatory activity demonstrated by the paw edema inhibition induced by different phlogistic agents, probably involving the inhibition of mast cells degranulation, decrease of leukocytes migration, and reduction of oxidative stress-related mediators.