Abstract:
RESUMO: A mastite é definida como uma inflamação da glândula mamária, considerada uma patologia complexa, de caráter multifuncional e bastante difundida nos rebanhos
leiteiros, sendo o principal patógeno responsável o Staphylococcus aureus. Como
alternativa para tratamento de infecções oriundas por microrganismos, surge a
inativação fotodinâmica de microrganismos (IFMO), que visa na combinação de luz,
fotossensbilizador (FS) e oxigênio molecular, os quais juntos produzam espécies
reativas de oxigênio (EROs), que causam a morte celular do alvo. Sendo assim,
objetivou-se avaliar o uso de filmes poliméricos associado ou não ao
fotossensbilizador safranina na IFMO em cepas de Staphylococcus aureus. Foram
preparadas quatro formulações de filmes poliméricos associados ou não com a
safranina, sendo poli(álcool vinílico) (PVA), poliacrilato de sódio e safranina
(formulação 1), PVA e poliacrilato de sódio (formulação 2), PVA e safranina
(formulação 3) e PVA (formulação 4), sob irradiação (1 e 5 minutos) ou não da luz LED
verde 5mm (λ = 520nm) acoplada a um frasco aplicador dipping, com potência ótica
de 64mW, levando a uma dose de energia de 19,2J/cm2. A atividade antimicrobiana
foi realizada seguindo o protocolo da farmacopeia brasileira, utilizando cepa de
Staphylococcus aureus (ATCC 25923), sendo preparadas diluições seriadas(10-2 e 10-
3) em duplicata e adicionado 100 microlitros de cada diluição na superfície de placas
contendo ágar nutriente. O período de incubação foi de 35 ± 2º C por 24 horas e
realizada a contagem do número de unidades formadoras de colônias (UFC).Os dados
obtidos in vitro foram analisados sob delineamento inteiramente casualizado em
esquema fatorial (2x3x2) por meio da técnica de modelos generalizados lineares e
para comparação de médias teste de Tukey 5%, usando o software R versão 4.3.1.A
formulação 1 apresentou inibição total no crescimento microbiano sem ou com a
presença da luz, sendo diferente no tempo de 1 minuto nas diluições 1 (10-2
) e 2 (10-3). Para a formulação 2, em todos os níveis de exposição à luz (0, 1 e 5 minutos) e naausência de luz, houve crescimento microbiano, porém no menor tempo foi observadoredução da carga bacteriana na diluição 2. Na formulação 3, não foi observado
crescimento microbiano tanto na ausência quanto na presença de luz e independente
da diluição. E, em contrapartida na formulação 4 houve crescimento bacteriano sem
exposição à luz e com níveis de exposição de 1 e 5 minutos, apresentando redução
da contagem de microrganismos no tempo de 1 minuto. As formulações contendo
xsafranina e sem presença de luz reduziram a carga de Staphylococcus aureus, sendo
uma alternativa para a prevenção da mastite e filmes sem safranina e com exposição
à luz no tempo de 1 minuto, diminuiu a contagem de microrganismos.
Palavras-chave: Formulação. Microrganismos. Polímeros. Terapia Fotodinâmica.
ABSTRACT :Mastitis is defined as an inflammation of the mammary gland, considered a complexpathology, multifunctional in nature and quite widespread in dairy herds, with the mainpathogen responsible being Staphylococcus aureus. As an alternative for treating
infections caused by microorganisms, photodynamic inactivation of microorganisms
(IFMO) appears, which aims to combine light, photosensitizer (PS) and molecular
oxygen, which together produce reactive oxygen species (ROS), which cause target
cell death. Therefore, the objective was to evaluate the use of polymeric films
associated or not with the photosensitizer safranin in IFMO in strains of
Staphylococcus aureus. Four formulations of polymeric films associated or not with
safranin were prepared, being polyvinyl alcohol (PVA), sodium polyacrylate and
safranin (formulation 1), PVA and sodium polyacrylate (formulation 2), PVA and
safranin (formulation 3) and PVA (formulation 4), under irradiation (1 and 5 minutes) or
not with 5mm green LED light (λ = 520nm) coupled to a dipping applicator bottle, with
an optical power of 64mW, leading to an energy dose of 19, 2J/cm2. The antimicrobial activity was carried out following the Brazilian pharmacopoeia protocol, using a strain
of Staphylococcus aureus (ATCC 25923), serial dilutions (10-2 and 10-3)were prepared
in duplicate and 100 microliters of each dilution were added to the surface of plates
containing agar. nutrient. The incubation period was 35 ± 2º C for 24hours and the
number of colonies forming units (CFU) was counted. The data obtainedin vitro were
analyzed under a completely randomized design in a factorial scheme (2x3x2) using
the generalized linear model technique and for comparison of means the5% Tukey test,
using the software R version 4.3.1. Formulation 1 showed total inhibition of microbial
growth without or with the presence of light, being different in a time of 1 minute in
dilutions 1 (10-2) and 2 (10-3). For formulation 2, at all levels of exposure to light (0, 1
and 5 minutes) and in the absence of light, there was microbialgrowth, but in the
shortest time a reduction in bacterial load was observed in dilution
2. In formulation 3, there was no microbial growth was observed both in the absence
and presence of light and regardless of dilution. And, on the other hand, in formulation
4 there was bacterial growth without exposure to light and with exposure levels of 1
and 5 minutes, showing a reduction in the count of microorganisms within 1 minute.
Formulations containing Safranin and without the presence of light reduced the load of
Staphylococcus aureus, being an alternative for the prevention of mastitis and films
xiiwithout Safranin and with exposure to light for 1 minute reduced the count of
microrganisms.
Keywords: Formulation. Microrganisms. Polymers. Photodynamic Therapy.