TOXICIDADE AGUDA E EFEITO CICATRIZANTE DO ÁCIDO GÁLICO, ÁCIDO ELÁGICO E ASSOCIAÇÃO EM FORMULAÇÃO DE USO TÓPICO

Abstract

RESUMO O ácido gálico (AG) e o ácido elágico (AE) têm despertado grande interesse para a pesquisa, devido às suas propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e antimicrobianas, o que os torna candidatos promissores no desenvolvimento de terapias para acelerar a cicatrização cutânea. Para avaliar essa possibilidade, foram desenvolvidas forumulações de uso tópico, em que foi usad o gel de Poloxamer 407®. Visando avaliar, além dos efeitos individuais, o efeito de associação foram preparados géis com AG, AE e AG+AE. Foram então avaliadas as propriedades dos géis, incluindo os efeitos do ciclo gelo-degelo, que revelou uma diminuição significativa (p<0,05) do pH, na maioria das amostras, incluindo o veículo (gel sem fármaco) e o gel contendo os dois fármacos, no entanto, nenhuma amostra apresentou variação fora da faixa de pH normal para a pele, com valores variando de 4,8 a 6,0. Quanto à conditividade elétrica, as formulações AG, AE e AG+AE apresentaram redução (p<0,05) após o ciclo de congelamento-descongelamento. Em relação ao teor, a quantidade de fármaco nas formulações variou após o ciclo de congelamento-descongelamento (p<0,05), nas seguintes percentagens de 95,86% a 101,35% inicialmente, passou para 91,30% a 101,51%. No teste de liberação dos fármacos, o ácido gálico (3%) – liberou 92,58% em apenas 1,5 hora; ácido elágico a 3% – liberou 51,60% após 6 horas; ácido gálico (na associação ao elágico) (1,5%) – liberou 99,91% em apenas 2 horas; ácido elágico (associado ao gálico) (1,5%) – liberou 57,06% após 6 hoapós 6 horas. O ácido gálico apresentou a maior quantidade liberada, seguido pela associação de ácido gálico e ácido elágico, e por último, o ácido elágico em 6 horas. Na avaliação da toxicidade aguda, foram utilizadas larvas de Zophobas morio na avaliação da dose letal para 50% dos an, imais (DL 50), foi observado, para o AG, uma DL50 de 2191,51 mg/Kg em 48 horas, quanto ao percentual de sobrevivência, foi observado que o grupo tratado com AG apresentou uma menor taxa de sobrevivência das larvas (40%), na formulação a 3000 mg/Kg. Na avaliação dos biomarcadores, não houve alteração nas concentrações de glutationa e catalase, porém observou-se redução significativa na melanina nos grupos tratados com as concentrações de 30 mg/Kg do AG, 3mg/Kg do AE e 3, 300,3000 mg/Kg do AG+AE dos fármacos puros, assim como nas concentrações de 300 e 3000 mg/Kg de AG+AE incorporados ao gel, além das concentrações de 3 e 30mg/Kg de AG+AE. Quanto ao efeito cicatrizante, com base na avaliação por fotogrametria digital, verificou-se uma aceleração significativa na cicatrização em grupos tratados com ácido elágico (AE 3%) e ácido gálico associado ao ácido elágico (AG 1,5%+AE1,5%). Ao longo do tratamento, houve uma regressão progressiva das feridas nos grupos tratados com AE e AG+AE, sendo que, aos 21 dias, a associação dos ácidos demonstrou ser mais eficaz na promoção da regressão das feridas. Assim, os géis tópicos contendo ácido gálico, ácido elágico e sua associação demonstam uma notável capacidade de liberação dos fármacos, efeito proteror contra o estresse celular e efeito cicatrizante significativo. Portanto, esses compostos mostram-se como importantes princípios ativos para o desenvolvimento de terapias tópicas voltadas à cicatrização de feridas.

ABSTRACT

Gallic acid (GA) and ellagic acid (EA) have attracted great interest in research, due to their antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial properties, which make them promising candidates in the development of therapies to accelerate skin healing. To evaluate this possibility, formulations for topical use were developed, in which Poloxamer 407® gel was used. To evaluate, in addition to the individual effects, the association effect, gels were prepared with AG, AE and AG+AE. The properties of the gels were then evaluated, including the effects of the freeze-thaw cycle, which revealed a significant decrease (p<0.05) in pH in most samples, including the vehicle (gel without drug) and the gel containing the two drugs, however, no sample showed variation outside the normal pH range for the skin, with values ranging from 4.8 to 6.0. Regarding electrical conductivity, the AG, AE and AG+AE formulations showed a reduction (p<0.05) after the freezing-thawing cycle. Regarding the content, the amount of drug in the formulations varied after the freeze-thaw cycle (p<0.05), in the following percentages from 95.86% to 101.35% initially, increasing to 91.30% to 101 .51%. In the drug release test, gallic acid (3%) – released 92.58% in just 1.5 hours; 3% ellagic acid – released 51.60% after 6 hours; gallic acid (in combination with ellagic) (1.5%) – released 99.91% in just 2 hours; ellagic acid (associated with gallic) (1.5%) – released 57.06% after 6 hours. Gallic acid showed the highest amount released, followed by the association of gallic acid and ellagic acid, and finally, ellagic acid in 6 hours. In the evaluation of acute toxicity, larvae of Zophobas morio were used to evaluate the lethal dose for 50% of animals (LD 50), an LD50 of 2191.51 mg/Kg in 48 hours was observed for AG, as Regarding the percentage of survival, it was observed that the group treated with AG had a lower survival rate of the larvae (40%), in the formulation at 3000 mg/Kg. In the evaluation of biomarkers, there was no change in the concentrations of glutathione and catalase, however, a significant reduction in melanin was observed in the groups treated with concentrations of 30 mg/Kg of GA, 3mg/Kg of AE and 3, 300.3000 mg/ Kg of AG+AE from pure drugs, as well as concentrations of 300 and 3000 mg/Kg of AG+AE incorporated into the gel, in addition to concentrations of 3 and 30 mg/Kg of AG+AE. Regarding the healing effect, based on evaluation by digital photogrammetry, there was a significant acceleration in healing in groups treated with ellagic acid (EA 3%) and gallic acid associated with ellagic acid (AG 1.5%+EA1.5% ). Throughout the treatment, there was a progressive regression of the wounds in the groups treated with AE and AG+AE, and, at 21 days, the combination of acids proved to be more effective in promoting the regression of the wounds. Thus, topical gels containing gallic acid, ellagic acid and their combination demonstrate a remarkable drug release capacity, protective effect against cellular stress and significant healing effect. Therefore, these compounds are important active principles for the development of topical therapies aimed at wound healing.