ATIVIDADES FARMACOLÓGICAS DA GUATTERIOPSISCINA, COMPOSTO ISOLADO DA ESPÉCIE GUATTERIA FRIESIANA (ANNONACEAE), NA TERAPIA DA DOENÇA DE ALZHEIMER

Abstract

RESUMO: A guatteriopsiscina é um alcaloide que pode ser isolado das folhas ou do caule da espécie Guatteria friesiana (W.A. Rodrigues) Erkens & Maas (Annonaceae), uma planta nativa do Brasil, conhecida popularmente como “envireira” e encontrada particularmente na região Amazônica. Em um screening fitoquímico realizado com alcaloides, a guatteriopsiscina apresentou significativa atividade inibidora da acetilcolinesterase (AChE), enzima que hidrolisa o neurotransmissor acetilcolina nas sinapses nervosas; que sugere a possível aplicação desse alcaloide em doenças que apresentam, em seu processo fisiopatológico, uma redução dos níveis de acetilcolina, como é o caso da doença de Alzheimer (DA). A DA é neurodegenerativa, irreversível e progressiva e um dos tipos de demência que mais atinge a população mundial, principalmente os idosos e, apesar de não ter cura, o uso de fármacos inibidores da AChE é um tratamento que tem sido bastante eficaz em diminuir os sintomas dessa doença. Nesse contexto, este estudo objetivou avaliar os efeitos da guatteriopsiscina sobre o sistema nervoso central de camundongos, com ênfase na atividade anticolinesterásica, além de propor a complexação deste alcaloide com β-ciclodextrina, a fim de melhorar a solubilidade da guatteriopsiscina em água. Assim, esta pesquisa se iniciou com uma prospecção científica e tecnológica sobre a espécie G. friesiana. Em seguida, realizaram-se ensaios in vitro para verificação das atividades anticolinesterásica e antioxidantes. A guatteriopsiscina apresentou CI50=0,3 μg/mℓ para inibição da AChE in vitro e mostrou resultados significativos para atividade antioxidante in vitro no sequestro de óxido nítrico e na eliminação de 2,2-difenil-1-picrilhidrazil nas concentrações 100; 50; 25; 12,5 e 6,25 μg/mL. A atividade anticolinesterásica ex vivo foi avaliada nas seguintes áreas cerebrais de camundongos Swiss: córtex frontal, hipocampo e cerebelo, e a guatteriopsiscina reduziu a atividade da enzima AChE, principalmente, no córtex frontal e no hipocampo, na dose de 5,0 mg.Kg-1. Outros efeitos verificados sobre o sistema nervoso central foram: efeito sobre a atividade locomotora, ansiolítico, antidepressivo e sobre a memória; através de testes comportamentais em camundongos tratados com guatteriopsiscina nas doses de 0,1; 1,0 e 5,0 mg.Kg-1. Os resultados mostraram que a administração aguda do alcaloide não afetou a atividade locomotora, não possui efeitos ansiolítico/ansiogênico e antidepressivo, mas mostrou atividade sobre a memória de curto prazo nas três doses testadas. Para a complexação da guatteriopsiscina com β-ciclodextrina utilizou-se a técnica de malaxagem e a caracterização química foi feita por espectroscopia na região do infravermelho, difração de raios X, análise termogravimétrica, microscopia eletrônica de varredura e ressonância magnética nuclear. As interações supramoleculares envolvidas no processo de complexação foram estudadas através das medidas de tempo de relaxação longitudinal (T1). Também foram feitos estudos de dissolução. A análise dessas técnicas mostrou que houve a formação do complexo de inclusão entre a guatteriopsiscina e a β-ciclodextrina e esse complexo melhorou a solubilidade do alcaloide. Portanto, os resultados obtidos foram promissores para elaboração da formulação farmacêutica com o complexo e sua possível aplicação na terapia da doença de Alzheimer. ABSTRACT: Guatteriopsiscine is an alkaloid that can be isolated from the leaves or stems of the species Guatteria friesiana (W. A. Rodrigues) Erkens & Maas (Annonaceae), a Brazil's native plant, popularly known as "envireira" and found particularly in the Amazon region. In a phytochemical screening done with alkaloids, the guatteriopsiscine showed significant inhibitory activity of acetylcholinesterase (AChE), the enzyme that degrades the neurotransmitter acetylcholine at synapses; suggesting the possible application of this alkaloid in diseases presenting in its pathophysiological process, a reduction of acetylcholine levels, such as Alzheimer's disease (AD). AD is a neurodegenerative, progressive and irreversible and types of dementia that affects more the world population, especially the elderly, although no cure, the use of AChE inhibitors drugs is a treatment method has been effective in reducing the symptoms of this disease. In this context, this study aimed to evaluate the effects of guatteriopsiscine on the central nervous system of mice with an emphasis on acetylcholinesterase activity, in addition to proposing the complexation of this alkaloid with β-cyclodextrin in order to improve the solubility of guatteriopsiscina in water. Thus, this research began with a scientific and technological foresight on the species G. friesiana. Then conducted in vitro tests to verify the anticholinesterase and antioxidant activities. The guatteriopsiscine showed IC50 = 0.3 μg/mℓ to inhibition of AChE in vitro and showed significant results for in vitro antioxidant activity of nitric oxide sequestering and disposal of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl concentrations 100; 50; 25; 12.5 e 6.25 μg/mL. The anticholinesterasic ex vivo activity was evaluated in the following areas of the brain of Swiss mice: frontal cortex, hippocampus and cerebellum, and guatteriopsiscina reduced the activity of AChE enzyme mainly in the frontal cortex and hippocampus at a dose of 5.0 mg.Kg-1. Other observed effects on the central nervous system were: effect on locomotor activity, anxiolytic, antidepressant and the memory; by behavioral tests in mice treated with guatteriopsiscine at doses of 0.1; 1.0 and 5.0 mg.Kg-1. The results showed that the acute administration of alkaloid did not affect locomotor activity, has no anxiolytic/anxiogenic and antidepressant effects, but showed activity on short-term memory at the three doses tested. Also the effects of guatteriopsiscine in hematological parameters and effects on the liver of mice by histopathological studies, and the results showed that alkaloid did not significantly alter these parameters were checked. For the complexation of guatteriopsiscina with β-cyclodextrin was used to kneading technique and chemical characterization carried out through the following analysis: spectroscopy in the infrared, X-ray diffraction, thermal analysis, scanning electron microscopy and magnetic resonance nuclear. The supramolecular interactions involved in the complexation process were studied by the longitudinal relaxation time measurements (T1). Also dissolution studies were made. The analysis showed that these techniques have the formation of the inclusion complex between guatteriopsiscina and β-cyclodextrin and the complex improved the solubility of alkaloid. Therefore, the results were promising for the preparation of pharmaceutical formulation with the complex and its possible application in the treatment of Alzheimer's disease.