CARACTERIZAÇÃO DE UM MODELO EXPERIMENTAL PARA PESQUISA DERMATOLÓGICA VETERINÁRIA: um estudo morfoquantitativo e ultraestruntural da pele de cutias (dasyprocta prymnolopha).

Abstract

RESUMO: Os murinos constituem-se no principal modelo adotado para estudos em dermatologia humana e veterinária. Contudo, persistem relevantes limitações quanto a sua empregabilidade decorrente do reduzido tamanho de camundongos e ratos e a elevada taxa metabólica das espécies. Alternativamente a este modelo, a cutia (Dasyprocta prymnolopha) é um roedor silvestre de porte médio encontrado em todo continente Americano, de elevada rusticidade, docilidade e prolificidade, cujo tamanho e características de manejo a candidatam a potencial modelo animal (Dasyproctidae) substituto ao tradicional murino. Contudo, ao contrário de outros roedores, na espécie cutia, pouco se conhece sobre os estratos epidérmicos e anexos cutâneos, perdurando significativas incertezas sobre a caracterização da pele nesses animais. O objetivo deste estudo é descrever e quantificar os estratos epidérmicos e anexos cutâneos de cutias machos e fêmeas, criadas em cativeiro, para fim de futura validaçã o da espécie como modelo para estudos dermatológicos. Materiais e métodos. Foi adotado um delineamento casualizado, composto de seis cutias saudáveis, alocadas em dois grupos, nomeados conforme o sexo do animal, machos (GM) e fêmeas (GF). Foram obtidas amostras cutâneas para avaliação estereológica e ultraestrutural por microscopia de força atômica (AFM). Para as análises estereológicas, foram avaliadas quatro amostras de pele saudável, de cada animal, obtidas de quatro regiões anatômicas: dorsal tóraco-lombar, plantar do coxim do membro pélvico, ventral mesogástrica e lateral da articulação do joelho. Para análises de AFM, obtiveram-se duas amostras de pele, divididas em pele fina (dorso) e pele espessa (coxim). As amostras cutâneas foram processadas de modo convencional e cortadas a quatro micrometros e coradas pela hematoxilina e eosina (HE) para análise estereológica e cortadas a dois micrometros em lamínulas de 13mm, sem coloração, para análise por AFM. Realizou-se análise variância (ANOVA), seguido do t este de Tukey a 5% de probabilidade. Resultados e discussão. Identificou-se que não há diferenças estatísticas da volumetria epidérmica e dérmica entre machos e fêmeas, o que sugere que os hormônios sexuais aparentemente não influenciam o volume dos estratos e camadas da pele. Diametralmente, identificou-se diferenças significativa (p<0,05) entre as camadas da pele, possuindo a derme maior volume total que a epiderme. Analogamente, as amostras de pele fina apresentaram diferenças significativas das amostras de pele espessa, havendo diferenças entre todos os estratos epidérmicos, quando comparados entre si. Mas, os estratos não apresentaram diferenças significativas entre as diferentes regiões anatômicas de pele fina avaliadas. Os resultados denotam que os estratos epidérmicos são bem delimitados e a volumetria correlaciona -se provavelmente ao tamanho e densidade celular dos ceratinócitos. A AFM permitiu identificar que a pele de cutias não apresenta topografia pavimentosa linear e uniforme, mas sim amplitude topográfica que eleva-se a partir da membrana basal, com organização não homogênea a partir do estrato granuloso, denotando sobreposição celular. Identificou-se corneodesmossomos e tonofilamentos em todos os estratos epidérmicos, inclusive estrato córneo, sugerindo provável manutenção da atividade das proteínas de ancoragem, mesmo após cornificação destas células. Conclusão. A pele de cutias não apresenta diferenças quanto ao sexo. Ademais, apresenta estratos e camadas bem delimitados, cujos volumes são similares entre as amostras de pele fina em diferentes regiões anatômicas. Os resultados sugerem que a cutia é um modelo potencial para estudos dermatológicos por apresentar homogeneidade do tecido cutâneo entre as regiões corpóreas e cuja estratificação epit elial apresenta volume e morfologia distintos entre si, o que poderá favorecer a aplicação futura de métodos sistemáticos de investigação. ABSTRACT: Murines are the main model adopted for studies in human and veterinary dermatology. However, there remain relevant limitations as to their employability due to the small size of mice and rats and the high metabolic rate of the species. Alternatively to this model, the cutia (Dasyprocta prymnolopha) is a medium-sized wild rodent found throughout the Americas, with a high rusticity, docility and prolificacy, whose size and management characteristics are a potential substitute for the traditional animal model (Dasyproctidae) murine. However, unlike other rodents, in the Cutia species, little is known about the epidermal strata and cutaneous appendages, and significant uncertainties remain regarding the characterization of the skin in these animals. The objective of this study is to describe and quantify the epidermal layers and cutaneous attachments of male and female agouti, kept in captivity, for future validation of the species as a model for dermatological studies . Materials and methods. It was adopted a randomized design, composed of six healthy fruits, allocated in two groups, named according to the sex of the animal, males (GM) and females (GF). Cutaneous samples were obtained for stereological and ultrastructural evaluation by atomic force microscopy (AFM). For the stereological analyzes, four healthy skin samples from each animal were obtained from four anatomical regions: thoracolumbar dorsal, pelvic limb cushion, mesogastric ventral and lateral knee joint. For AFM analysis, two skin samples were obtained, divided into thin skin (back) and thick skin (cushion). Cutaneous samples were conventionally processed and cut to four microns and stained with hematoxylin and eosin (HE) for stereological analysis and cut to two micrometres in 13mm coverslips without staining for AFM analysis. An analysis was performed (ANOVA), followed by the Tukey test at 5% probability. Results and discussion. It has been identified that there are no statistical differences in epidermal and dermal volume between males and females, suggesting that sex hormones apparently do not influence the volume of strata and skin layers. Diametrically, significant differences (p <0.05) were identified between the skin layers, with the dermis having a larger total volume than the epidermis. Similarly, thin skin samples showed significant differences in thick skin samples, with differences among all epidermal layers when compared to each other. However, the strata did not present significant differences between the different anatomical regions of thin skin evaluated. The results indicate that the epidermal layers are well delimited and the volumetry probably correlates with the size and cellular density of keratinocytes. The AFM allowed to identify that the skin of agoutis does not present a linear and uniform topographic pavement , but rather topographic amplitude that rises from the basal membrane, with non-homogeneous organization from the granular stratum, denoting cellular overlap. Corneodesmosomes and tonofilaments were identified in all the epidermal strata, including stratum corneum, suggesting probable maintenance of the anchorage proteins activity, even after cornification of these cells. .Conclusion. The skin of agoutis does not present differences as to the sex. In addition, it presents well-delimited strata and layers, whose volumes are similar between fine-skin samples in different anatomical regions. The results suggest that cutia is a potential model for dermatological studies because it presents homogeneity of the cutaneous tissue between the corporeal regions and the epithelial layering presents distinct volume and morphology among them, which may favor the future application of systematic methods of investigation.