ATIVIDADE ANTIMICROBIANA INTRÍNSECA DE Arrabidaea brachypoda E SUA AÇÃO MODULADORA DA RESISTÊNCIA A NORFLOXACINA EM Staphylococcus aureus

Abstract

RESUMO:Produtos de origem vegetal são uma das principais fontes de descoberta de novos fármacos. A enorme biodiversidade brasileira justifica o crescimento significativo dos estudos em busca de novas moléculas biotivas. O gênero Arrabidaea pertence à família Bignoniaceae, cujas espécies estão amplamente distribuída em regiões tropicais. Arrabidaea brachypoda, popularmente conhecida no Brasil como ―cipó-uma‖, ―tintureiro‖ ou ―cervejinha do campo‖, é um arbusto nativo do cerrado brasileiro, encontrado em vários estados, amplamente utilizado na medicina popular para o tratamento de doenças renais e dores articulares. Estudos comprovam atividades biológicas de suas folhas, raízes e caule. O presente estudo teve como objetivos avaliar a atividade antimicrobiana do extrato etanólico (FLAB-Et), da fração diclorometano (FLAB-DCM) e de seus compostos isolados contra cepas de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Candida albicans: as chalconas CH-1, CH-3, CH-4 e CH-5, e os flavonóides diméricos Braquidina A (BR-A) e Braquidina B (BR-B). Além disso, também pretendeu-se avaliar os efeitos destes produtos naturais e compostos isolados na atividade da Norfloxacina contra uma cepa de Staphylococcus aureus resistente às fluoroquinolonas devido à superxpressão da bomba de efluxo NorA (SA1199-B). Foram realizados ensaios de microdiluição para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) contra diferentes microrganismos. Os resultados indicaram que FLAB-Et, FLAB-DCM, CH-1, CH-4, CH-5 e BR-A não apresentaram atividade antimicrobiana intrínseca significativa (CIM ≥ 1024 μg/mL) para nenhuma das cepas testadas. Somente CH-3 e BR-B demonstraram atividade antifúngica contra Candida albicans. A adição do FLAB-ET, da FLAB-DCM, bem como dos compostos isolados CH-1, CH-3, CH-4, CH-5 e BR-B ao meio de cultura em concentrações subinibitórias provocou uma redução nas CIMs da Norfloxacina e do BrEt contra a linhagem SA1199-B, indicando que estes compostos naturais são moduladores da resistência às fluoroquinolonas. Além disso, BR-B foi capaz de inibir o efluxo de BrEt na cepa SA1199-B, confirmando que este composto é um inibidor de NorA. A BR-B isolada foi capaz de inibir um importante mecanismo de resistência prevalente em cepas de S. aureus, portanto seu uso em combinação com Norfloxacina pode ser considerado como uma alternativa para o tratamento de infecções causadas por cepas de S. aureus que superexpressam bombas de efluxo, tais como NorA.

ABSTRACT:Products of plant origin are one of the main sources of discovery of new drugs. The enormous Brazilian biodiversity justifies the significant growth of studies in search of new bioactive molecules. The genus Arrabidaea belongs to the family Bignoniaceae, whose species are widely distributed in tropical regions. Arrabidaea brachypoda, popularly known in Brazil as "cipó-uma", "dyer" or "beer of the field", is a native shrub of the Brazilian cerrado, found in several states, widely used in folk medicine for the treatment of renal diseases and pains articular. Studies prove the biological activities of its leaves, roots and stem. The aim of the present study was to evaluate the antimicrobial activity of the ethanol extract (FLAB-Et), dichloromethane fraction (FLAB-DCM) and its isolated compoundsagainst strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Candida albicans: chalcones CH-1, CH-3, CH-4 and CH-5, and the dimeric flavonoids Brachydina A (BR-A) and Brachydina B (BR-B). In addition, it was also intended to evaluate the effects of these natural products and isolated compounds on the activity of Norfloxacin against strain of Staphylococcus aureus resistant to fluoroquinolones due to the overexpression of the NorA efflux pump (SA1199-B). Microdilution assays were performed to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against different microorganisms. The results indicated that FLAB-Et, FLAB-DCM, CH-1, CH-4, CH-5 and BR-A showed no significant intrinsic antimicrobial activity (MIC ≥ 1024 μg / mL) for any of the strains tested. Only CH-3 and BR-B demonstrated antifungal activity against Candida albicans. The addition of FLAB-Et, FLAB-DCM, as well as the isolated compounds CH-1, CH-3, CH-4, CH-5 and BR-B to the culture medium in subinhibitory concentrations caused a reduction in the MICs of Norfloxacin and BrEt against strain SA1199-B, indicating that these natural compounds are modulators of resistance to fluoroquinolones. In addition, BR-B was able to inhibit efflux of EtBr in strain SA1199-B, confirming that this compound is an inhibitor of NorA. Isolated BR-B was able to inhibit an important mechanism of resistance prevalent in strains of S. aureus, so its use in combination with Norfloxacin can be considered as an alternative for the treatment of infections caused by strains of S. aureus that overexpress pumps of efflux, such as NorA.