EXTRAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE FLAVONOIDES DAS FOLHAS DE Pilocarpus microphyllus STAPF EX. WARDEWORTH E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE E PERFIL NEUROPROTETOR.

Abstract

RESUMO: Os flavonoides compreendem um grupo de metabólitos secundários de grande diversidade estrutural, cujas propriedades terapêuticas têm ganhado grande interesse nas últimas décadas. O jaborandi (Pilocarpus microphyllus Stapf ex. Wardeworth), de utilização medicinal comprovada, apresenta importância no mercado farmacêutico, uma vez que das suas folhas são extraídas a pilocarpina utilizada no tratamento do glaucoma. Embora, alguns flavonoides tenham sido descritos no gênero Pilocarpus, não existem estudos de prospecção e identificação de flavonoides das folhas de P. microphyllus. Nesse contexto, o presente trabalho visou extrair e identificar flavonoides das folhas do jaborandi e investigar o potencial farmacológico. A fração acetato de etila (FAcOEt) obtida a partir do extrato metanolico foi avaliada quanto a sua atividade antioxidante por meio do ensaio de captura do radical DPPH e ABTS, além da caracterização do perfil eletroquímico para observação dos processos redox. No ensaio de DPPH, a FAcOEt revelou CE50 de 0,5 mg/mL. A fração apresentou valor de TEAC de 819 μmol de trolox/g de FAcOEt. A amostra exibiu processos redox em baixos potenciais, indicando promissora atividade antioxidante. O ensaio de indução de dor neuropática periférica por compressão do nervo ciático em ratas wistar para determinação do Limiar Nociceptivo Mecânico (LNM) no teste de Von Frey, evidenciou o provável efeito desta fração contra as formas reativas do oxigênio (EROs), envolvidas no processo fisiopatológico da dor neuropática, revelando atividade significativa na dose de 100 mg/kg. Os ensaios de caracterização dos constituíntes da FAcOEt por espectrofotometria UV-Vis, espectrofotometria infravermelho, CLAE, espectrometria de massas e voltametria cíclica, levantaram a hipótese sobre o composto majoritário desta fração ser a flavona crisina, cujas propriedades de solubilidade na CLAE são muito próximas à da flavona quercetina, e revelaram a presença característica deste grupo.----------------ABSTRACT: Flavonoids comprise a group of secondary metabolites of great structural diversity, whose therapeutic properties have gained great interest in the last decades. Jaborandi (Pilocarpus microphyllus Stapf ex Wardeworth), of proven medical use, is of great importance in the pharmaceutical market, since its leaves are extracted pilocarpina used in the treatment of glaucoma. Although some flavonoids have been described in the genus Pilocarpus, there are no studies of prospecting and identification of flavonoids of P. microphyllus leaves. In this context, the present work aims to extract and identify the flavonoids from jaborandi leaves and investigate the pharmacological potential. The ethyl acetate fraction (FAcOEt) obtained from the methanol extract (EM) was evaluated for its antioxidant activity by means of the DPPH and ABTS radical capture assay, in addition to the characterization of the electrochemical profile of the fraction to observe the redox processes Sample. In the DPPH assay, the fraction revealed EC 50 of 0.4 mg/mL. The fraction presented TEAC value of 819 μmol trolox/g FAcOEt. The sample exhibited redox processes at low potentials, indicating promising antioxidant activity. The trial of induction of peripheral neuropathic pain by sciatic nerve compression in wistar rats to determine the Mechanical Nociceptive Threshold (LNM) in the von Frey test, evidenced the probable effect of this fraction against the reactive oxygen forms (ROS) involved in the process Pathophysiology of neuropathic pain, revealing significant activity at the dose of 100 mg / kg. The characterization of FAcOEt constituents by UV-Vis spectrophotometry, infrared spectrophotometry, HPLC, mass spectrometry and cyclic voltammetry, raised the hypothesis that the major component of this fraction is flavone chrysin, whose solubility properties in HPLC are very close to of flavone quercetin, and revealed the characteristic presence of this group.