REAÇÃO EM CADEIA DE POLIMERASE QUANTITATIVA PARA ESTIMATIVA DA QUANTIDADE DE LEISHMANIA INFANTUM E INFECTIVIDADE DA SALIVA DE PACIENTES COM CALAZAR E INFEÇÃO PELO HIV.

Abstract

RESUMO: A leishmaniose visceral (LV) é uma das doenças tropicais mais negligenciadas, mais de 12 milhões de pessoas estão infectadas em todo mundo O surgimento da pandemia de HIV/AIDS no último quarto de século modificou substancialmente o espectro clínico e epidemiológico da LV. Métodos para o diagnóstico não invasivo podem acelerar o diagnóstico e reduzir a letalidade. O objetivo deste estudo foi investigar a importância da reação em cadeia de polimerase quantitativa para estimativa da quantidade de Leishmania infantum e infectividade da saliva de pacientes com calazar e infeção pelo HIV e a correlação da transmissão do parasita com sua presença na saliva. Para tanto, realizou-se estudo transversal que avaliou 64 pacientes distribuídos entre (a) pacientes do Instituto de Doenças Tropicais Natan Portela, com LV e com e sem infecção por HIV e (b) pessoas assintomáticas que fizeram o teste anti-HIV e que tiveram o teste anti-L.infantum reagente; e 154 pessoas que residiam com pacientes com infecção por L. infantum. Foram comparadas as proporções de pessoas com infecção por L. infantum entre os grupos domésticos de pessoas com L. infantum/HIV e sem HIV, utilizando para esta análise a Real time PCR na quantificação do parasita, PCR qualitativa na detecção da Leishmania e reação de Montenegro para identificar a transmissão do parasita dos pacientes para seus coabitantes. Os resultados demonstraram associação estatística significativa entre ter pelo menos um coabitante infectado e as variáveis sexo, CD4, carga viral, idade, qPCR saliva e qPCR sangue. Observou-se que a chance de um paciente com carga viral maior que 50 cópias virais∕mm³ é 0,9734 vezes maior em relação aos pacientes com carga viral menor que 50 cópias virais∕mm³, assim como de ter uma maior carga parasitária na saliva. Verificou-se a prevalência do sexo masculino entre os coinfectados e de pacientes com idades entre 21-45. Encontrou-se um coeficiente de Spearman de 0,64, com valor de p < 0,001 na correlação entre a qPCR da saliva com a qPCR do sangue. Os pacientes coinfectados com LV∕HIV possuem mediana de 2793,6 parasitas∕ml na saliva e mediana de 2302,4 parasitas∕ml no sangue, enquanto os pacientes sem HIV e com LV sintomática apresentaram um valor mediano de 1821,2 parasitas∕ml na saliva, com média de 10234,4 parasitas∕ml e mediana e média de 320,4 parasitas∕ml e 2649,6 parasitas∕ml respectivamente no sangue, já os pacientes sem HIV e assintomáticos apresentaram valor mediano de 829,2 parasitas∕ml na saliva e 43,2 parasitas∕ml no sangue. Os pacientes com LV∕HIV apresentaram elevada carga parasitária em relação àqueles que possuíam a LV sem HIV, evidenciando a importância da influência do HIV na dinâmica da coinfecção. Os resultados mostraram maior quantidade do parasita na saliva do que no sangue, bem como a utilidade da saliva como método de diagnóstico não invasivo e possível fonte de transmissão do parasita...................ABSTRACT: Visceral leishmaniasis (VL) is one of the most neglected tropical diseases, more than 12 million people are infected worldwide The emergence of the HIV / AIDS in the last quarter century substantially changed the clinical and epidemiological characteristics of LV. Methods for noninvasive diagnosis can accelerate diagnosis and reduce mortality. Investigate the use of polymerase chain reaction quantitatively estimate the amount of Leishmania infantum and infectivity of patient saliva with calazar and HIV infection. Therefore, there was crosssectional study that evaluated 64 patients distributed (1) IDTNP patients with LV and with and without HIV infection and also (2) asymptomatic people who made the HIV testing and have anti-U test. infantum reagent; and were also investigated 154 people living with patients infected by L. infantum. Proportions were compared to people with L. infantum infection among domestic groups of people with L. infantum / HIV and HIV without using for this analysis Real time PCR quantification of the parasite, qualitative PCR in the detection of Leishmania and reaction Montenegro to identify the transmission of the parasite to her patient cohabiting. The results show statistically significant association between having at least one infected cohabiting and gender, CD4, viral load, age, qPCR and qPCR saliva blood. It was observed that the chance of a patient with a viral load that 50 viral copies / mm³ is 0.9734 times higher compared to patients with lower viral load than 50 viral copies / mm³, as well as having a higher parasite load in saliva . There was a prevalence of males among coinfected patients and aged 21-45. Found a Spearman correlation coefficient of 0.64, with p <0.001 for correlation between qPCR saliva with qPCR blood. Patients coinfected with LV / HIV have median 2793.6 parasites / ml saliva and median 2302.4 parasites / ml in the blood, while patients without HIV and symptomatic LV had a median value of 1821.2 parasites / ml in saliva, averaging 10234.4 parasites / ml and median and average of 320.4 parasites / ml and 2649.6 parasites / ml respectively in the blood, as patients without HIV and asymptomatic presented median value of 829.2 parasites / and 43.2 ml saliva parasites / ml in the blood. Patients with LV / HIV showed high parasite load in comparison to those with the LV without HIV, highlighting the importance of the influence of the dynamics of HIV coinfection. The results showed a higher amount of the saliva of the parasite in the blood, and saliva useful as a noninvasive diagnostic method and a possible source of transmission of the parasite.