DESENVOLVIMENTO DE NANOSSISTEMAS LIPOSSOMAIS CONTENDO DIOSGENINA E AVALIAÇÃO DO EFEITO CARDIOPROTETOR

Abstract

RESUMO: A presente dissertação apresentou como intuito desenvolver uma formulação farmacêutica lipossomal contendo Diosgenina, assim como, investigar a atividade farmacológica em modelos animais de sistema cardiovascular in vivo e verificar a atividade antioxidante in vitro. O primeiro capítulo apresentou como objetivo realizar uma revisão sistemática sobre a Diosgenina, suas aplicações farmacêuticas e as perspectivas sobre a aplicação em doenças do sistema cardiovascular. Bases periódicas como ScienceDirect, PubMed e Biblioteca Virtual em Saúde, foram utilizados, bem como as bases tecnológicas do Escritório Europeu de Patentes, Organização Mundial de Propriedade Intelectual, no Escritório Americano de Patentes e Marcas Registradas e no banco de dados Brasileiro Instituto Nacional de Propriedade Industrial. As palavras-chave utilizadas foram Diosgenina, sistema cardiovascular, hipertensão, aterosclerose e dislipidemias e suas correlações em Inglês e Português, com publicações de janeiro de 2010 a junho de 2015. A partir dos estudos analisados a Diosgenina apresenta-se como uma molécula promissora para aplicação farmacológica no sistema cardiovascular. O segundo capítulo apresentou como objetivo encapsular a Diosgenina em lipossomas convencionais e peguilados, os quais foram caracterizados quanto as suas propriedades físico-químicas e tempo de estabilidade, estes resultados mostraram-se satisfatórios para utilização destes nanossistemas em testes experimentais in vivo e in vitro. Depois de verificado as adequadas condições de estabilidade e eficiência de encapsulação os lipossomas contendo Diosgenina foram utilizados para avaliar a ação no Sistema Cardiovascular em testes experimentais in vivo. No presente estudo os lipossomas contendo Diosgenina não apresentaram resposta hipotensora esperada nas doses utilizadas de 1, 2 e 4 mg/Kg (i.v.). Contudo, traz-se a perspectiva que com o aumento do rendimento de Diosgenina incorporada em nanossistemas lipossomais, a resposta hipotensora esperada possa ser verificada. O terceiro capítulo apresentou como objetivo avaliar o potencial antioxidante in vitro da Diosgenina livre (D) e de Diosgenina incorporada em nanovesículas lipídicas, denominada de Diosgenina lipossomal (DL) por meio da eliminação do radical livre estável DPPH•, ABTS•+, potencial redutor, radical nitrito e peroxidação lipídica (TBARS), assim como, determinar a concentração efetiva inibitória capaz de remover 50% desses radicais dos testes antioxidantes envolvidos nesse estudo. A análise dos resultados mostrou baixos percentuais de inibição dos radicais DPPH•, ABTS•+ e potencial redutor da Diosgenina livre e Diosgenina lipossomal, não mostrando diferença estatística entre ambos, quando comparado ao controle trolox. No entanto, a Diosgenina tanto na sua forma livre quanto na sua forma lipossomal apresentou significativo potencial antioxidante frente à peroxidação lipídica por formas reativas associadas ao ácido tiobarbitúrico e ao radical nitrito, evidenciado pelo cálculo de suas concentrações efetivas medianas (CE50). Também é possível perceber que a forma nanocarreada exibiu um maior potencial antioxidante em relação à sua forma isolada. Desta forma, se faz necessário avaliar a capacidade antioxidante in vivo no sentido que esta formulação possa ser caracteriza ou não com atividade antioxidante e sua aplicação para uso em processos oxidativos. ABSTRACT: This thesis presented the intention to develop a pharmaceutical liposomal formulation containing Diosgenin, as well as investigate the pharmacological activity in animal models of cardiovascular system in vivo and verify the antioxidant activity in vitro. The first chapter introduced aimed at making a systematic review of the Diosgenin, their pharmaceutical applications and perspectives on the application in the cardiovascular system diseases. periodic basis as ScienceDirect, PubMed and Virtual Health Library were used as well as the European Office of the technological bases Patent Office, World Intellectual Property Organization, the Office US Patent and Trademark Office and the Brazilian database National Institute of Property Industrial. The keywords used were Diosgenin, cardiovascular system, hypertension, atherosclerosis and dyslipidemia and their correlations in English and Portuguese, with January 2010 publications June 2015. From the studies analyzed Diosgenin is presented as a promising molecule for pharmacological application in the cardiovascular system. The second chapter presented as objective encapsulate Diosgenin in conventional liposome and pegylated, which were characterized as their physicochemical properties and stability time, these results were satisfactory for use of nanosystems in experimental tests in vivo and in vitro. Once verified the proper conditions for stability and encapsulation efficiency liposomes containing Diosgenin were used to evaluate the action on the cardiovascular system in experimental tests in vivo. In the present study Diosgenin-containing liposomes showed no hypotensive response expected at dosages of 1, 2 and 4 mg/kg (i.v.). However, it brings up the prospect that with the increase of the yield Diosgenin incorporated into liposomal nanosystems, the hypotensive response expected can be verified. The third chapter introduced to evaluate the antioxidant potential in vitro free Diosgenin (D) and Diosgenin incorporated in nanovesicles lipid, called Diosgenin liposomal (DL) through the elimination of the stable free radical DPPH •, ABTS • +, potential reducer radical nitrite and lipid peroxidation (TBARS) as well as determining inhibitory effective concentration capable of removing 50% of these radicals antioxidants tests involved in this study. The results showed low percentage of inhibition of DPPH •, ABTS • + and potential reducer Diosgenin free and liposomal Diosgenin, showing no statistical difference between the two when compared to trolox control. However, diosgenin both in free form and in their liposomal form showed significant antioxidant potential across the lipid peroxidation by reactive forms associated thiobarbituric acid and the radical nitrite, evidenced by calculating their median effective concentrations (EC50). You can also see that the nanocarreada form exhibited greater antioxidant potential in relation to its isolation. Thus, it is necessary to evaluate the antioxidant capacity in vivo in the sense that this formulation can be characterized or not with antioxidant activity and its application for use in oxidation processes.