EFEITOS DA CROCINA E DA ANTOCIANINA NA MATURAÇÃO DE OÓCITOS BOVINOS IN VITRO

Abstract

RESUMO: A maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos representa uma etapa crítica para a eficiência da produção in vitro de embriões (PIVE), sendo altamente suscetível ao estresse oxidativo induzido pelas condições de cultivo. Nesse cenário, antioxidantes naturais têm sido propostos como aditivos promissores para mitigar danos celulares e preservar a competência oocitária. Este estudo avaliou os efeitos da suplementação com crocina (derivada de Crocus sativus) e antocianina (extrato seco de Vaccinium macrocarpon) sobre a MIV de oócitos bovinos. Oócitos grau I e II foram alocados em sete grupos experimentais: controle (sem antioxidantes), três grupos tratados com crocina (0,5, 1,0 e 10 μg/mL) e três com antocianina (0,2 1,0 e 10 μg/mL). Os cultivos foram realizados em meio MIV por 20 horas, com 25 oócitos por gota de 100 μL, em três repetições. Avaliaram-se a expansão do complexo cúmulo-oócito (CCO) e a extrusão do corpúsculo polar . Todos os grupos, inclusive os tratados com antioxidantes, apresentaram expansão satisfatória do CCO. Entretanto, a taxa de extrusão do CP foi significativamente reduzida nos grupos tratados com 10 μg/mL de crocina e antocianina, indicando comprometimento da maturação meiótica, possivelmente por interferência no equilíbrio redox intracelular. Os dados sugerem que, embora a crocina e a antocianina não afetem a morfologia do CCO, podem prejudicar a progressão meiótica em concentrações elevadas. Estes achados reforçam a necessidade de ajustes na dosagem de antioxidantes naturais utilizados na MIV, visando otimizar a qualidade oocitária sem comprometer o desenvolvimento nuclear. ABSTRACT: In vitro maturation (IVM) of bovine oocytes is a critical step for the efficiency of in vitro embryo production (IVEP), being highly susceptible to oxidative stress induced by culture conditions. In this context, natural antioxidants have been proposed as promising additives to mitigate cellular damage and preserve oocyte competence. This study evaluated the effects of crocin (derived from Crocus sativus) and anthocyanin (dry extract of Vaccinium macrocarpon) supplementation on bovine oocyte IVM. Grade I and II oocytes were allocated into seven experimental groups: control (no antioxidants), three treated with crocin (0.5, 1.0, and 10 μg/mL), and three with anthocyanin (0.2, 1.0, and 10 μg/mL). Oocytes were cultured in IVM medium for 20 hours, with 25 oocytes per 100 μL drop, in three replicates. The expansion of the cumulus-oocyte complex (COC) and extrusion of the first polar body (PB) were evaluated. All groups, including those treated with antioxidants, showed satisfactory COC expansion. However, PB extrusion rates were significantly reduced in groups treated with 10 μg/mL of crocin and anthocyanin, indicating impaired meiotic progression, possibly due to disruption of intracellular redox balance. The findings suggest that, although crocin and anthocyanin do not compromise COC morphology, they may impair nuclear maturation at higher concentrations. These results highlight the need to fine-tune antioxidant dosages in IVM protocols to optimize oocyte quality without compromising nuclear development.