LEISHMANIA (LEISHMANIA) INFANTUM EM ÓRGÃOS DO SISTEMA REPRODUTIVO DE CÃES DOMICILIADOS NO MUNICÍPIO DE TIMON, MARANHÃO

Abstract

RESUMO: Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença parasitária causada pelo protozoário da espécie Leishmania (L.) infantum sendo transmitida, principalmente, por vetores flebotomíneos. Nos centros urbanos das Américas o cão é considerado o principal reservatório doméstico da doença e de acordo com a literatura, as formas de transmissão sexual e vertical têm sido consideradas cada vez mais prováveis nessa espécie animal. O objetivo desse trabalho foi avaliar a prevalência de LV e a presença de Leishmania infantum nos órgãos genitais de cães domiciliados no município de Timon, Maranhão. Esse trabalho foi autorizado pelo CEUA/UFPI sob o número de protocolo 755/2022 e realizado no período de dezembro de 2022 a agosto de 2023. Foram coletados sangue, aspirado de medula e de linfonodos poplíteos de 34 cães, sendo 15 fêmeas e 19 machos adultos que foram atendidos na Unidade de Vigilância em Zoonoses (UVZ) de Timon. Vinte e quatro eram sem raça definida (SRD). Em todos os animais foi realizado o teste sorológico de ELISA® (Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay, Kit EIE LV Canina Bio-Manguinhos), além do parasitológico de medula por meio de esfregaço e cultura em meio NNN enriquecido com meio Schneider ́s para a pesquisa do protozoário. Posteriormente, foram colhidos material da vagina e prepúcio, e realizadas orquiectomia nos cães e ovariohisterectomia nas cadelas, para a retirada do complexo testículo-epidídimo (CTE) e útero, respectivamente. Adicionalmente, foi realizada a reação em cadeia pela polimerase (PCR) convencional e quantitativa (qPCR) da medula e dos órgãos genitais supracitados. Dos 34 animais avaliados, 16 (47,0%) foram positivos para LV no ELISA, demonstrando uma alta soroprevalência da doença em cães de Timon, durante o período do estudo. Dos testes parasitológicos e moleculares realizados, 15 (44,1%) cães apresentaram o protozoário no esfregaço de medula; destes 11 (32,3%) na cultura e 10 (29,4%) no qPCR de medula, confirmando a presença de Leishmania nestes animais. Conforme o teste de McNemar ́s empregado, cães positivos para LV no exame parasitológico de esfregaço de medula tem uma razão de chance (OR) de 87,5% de também serem positivos no PCR. Com relação ao encontro do parasito nos órgãos do sistema reprodutivo, 02 cadelas (5,9%) apresentaram positividade no swab vaginal e 02 cães no prepucial. Quatorze animais (41,2%) confirmaram a presença do protozoário por meio do qPCR nos CTE e útero, sendo 09 machos e 05 fêmeas, corroborando com a literatura que revela um maior tropismo de Leishmania infantum para os órgãos genitais de machos caninos infectados. Portanto, é importante associar testes parasitológicos e moleculares para o diagnóstico da doença em cães domiciliados em áreas endêmicas, destacando, ainda, que a técnica de qPCR é uma excelente ferramenta para detectar a presença do DNA do parasito em órgãos genitais de cães e cadelas com LV, ajudando a elucidar o ciclo epidemiológico da doença, servindo de alerta e vigilância para a possibilidade de transmissão sexual e vertical nessa espécie animal. ABSTRACT: Visceral Leishmaniasis (VL) is a parasitic disease caused by the protozoan species Leishmania (L.) infantum, primarily transmitted by sandfly vectors. In urban centers in the Americas, dogs are considered the main domestic reservoir of the disease, and according to the literature, sexual and vertical transmission routes have increasingly been considered likely in this animal species. The aim of this study was to evaluate the prevalence of VL and the presence of Leishmania infantum in the genital organs of dogs living in the city of Timon, Maranhão. This study was authorized by the Ethics Committee for the Use of Animals (CEUA/UFPI) under protocol number 755/2022 and was conducted from December 2022 to August 2023. Blood, bone marrow aspirates, and popliteal lymph node samples were collected from 34 dogs, including 15 females and 19 adult males, all of which had been treated at the Zoonosis Surveillance Unit (UVZ) in Timon. Twenty-four of the dogs were mixed-breed. All animals underwent the ELISA® (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, Bio-Manguinhos Canine EIE LV Kit) serological test, as well as bone marrow parasitological tests using smears and culture in NNN medium enriched with Schneider's medium to identify the protozoan. Subsequently, vaginal and preputial samples were collected, and orchiectomies were performed on the male dogs and ovariohysterectomies on the female dogs to remove the testicular-epididymal complex (TEC) and uterus, respectively. Additionally, conventional

(PCR) and quantitative (qPCR) reactions were carried out on the bone marrow and the above- mentioned genital organs. Of the 34 animals evaluated, 16 (47.0%) were positive for VL in

the ELISA test, indicating a high seroprevalence of the disease in dogs from Timon during the study period. Of the parasitological and molecular tests performed, 15 (44.1%) dogs showed the protozoan in the bone marrow smear; of these, 11 (32.3%) were positive in culture, and 10 (29.4%) were positive in qPCR of bone marrow, confirming the presence of Leishmania in these animals. According to the McNemar test, dogs that were positive for VL in the bone marrow smear had an odds ratio (OR) of 87.5% of also being positive in the PCR test. Regarding the detection of the parasite in the reproductive organs, 2 female dogs (5.9%) were positive in the vaginal swab, and 2 male dogs were positive in the preputial swab. Fourteen animals (41.2%) confirmed the presence of the protozoan through qPCR in the TEC and uterus, with 9 males and 5 females, supporting the literature that suggests a higher tropism of Leishmania infantum for the genital organs of infected male dogs. Therefore, it is important to combine parasitological and molecular tests for diagnosing the disease in dogs living in endemic areas. Additionally, the qPCR technique proves to be an excellent tool for detecting the presence of the parasite's DNA in the genital organs of dogs and bitches with VL, helping to clarify the epidemiological cycle of the disease and raising awareness of the potential for sexual and vertical transmission in this animal species.