MECANISMOS DA AÇÃO ANTINEOPLÁSICA E ANTINOCICEPTIVA DE UMA FRAÇÃO ACETATO DE ETILA OBTIDA DA PLANTA Casearia sylvetris EM MODELOS EXPERIMENTAIS DE TUMORES MURINOS E HUMANOS E DE DOR ONCOLÓGICA

Abstract

RESUMO: A espécie Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) é uma planta, bastante utilizada na América do Sul, com diversas atividades farmacológicas atribuídas principalmente a metabólitos da classe dos terpenos. Esse trabalho teve como objetivo avaliar a ação antitumoral e antinociceptiva de uma fração acetato de etila rica em diterpenos clerodânicos (FC) e do composto Casearina X (Cas X) extraídos de C. sylvestris Sw.. Camundongos Swiss portadores do tumor S-180 foram tratados com FC e Cas X por 7 dias, via i.p. e oral por gavagem. Após o tratamento revelaram taxas de inibição tumoral significativa (p<0,05), seguidas de alterações histopatológicas como degeneração vacuolar no fígado e autólise em tecidos renais. Estudos ex vivo sugerem a necroptose como o principal modo pelo qual é desencadeada a morte celular. Análises antiproliferativas em linhagens tumorais humanas (HCT-116 e SF-295) foram realizadas em camundongos imunodeficiêntes (CB-17 SCID e BALB/c Nude). No ensaio com fibra oca (Hollow Fiber Assay) a FC reduziu a proliferação de células neoplásicas em todas as doses testadas por ambas a vias (2,5 e 5 mg/kg/dia i.p. e 25 e 50 mg/kg/dia v.o.). No ensaio em modelo xenográfico houve redução significativa dos tumores de HCT-116 em animiais tratados com FC via i.p e v.o., com ausência de alterações em órgãos e parâmetros hematológicos. Fotomicrografias de tuomores revelaram áreas necróticas e lesões morfológicas reversíveis no fígado e rins de animais tratados com FC. Ensaios de contorções abdominais induzidas por ácido acético e o teste de formalina foram utilizados para avaliar a ação antinociceptiva, já o teste com filamento de Von Frey foi utilizado para determinar a alodinia mecânica. No teste de contorções a FC apresentou efeito antinociceptivo significativo em camundongos sadios e acometidos pelo tumor S-180. Na fase neurogênica do teste de formalina a FC rediziu o tempo de lambedura de pata em todas as doses e vias testadas e na fase inflamatória apenas os animais tratados com doses de 25 e 50 mg/kg v.o. esse efeito foi observado de forma significativa. Na avaliação do envolvimento de vias especificas a ação antinociceptiva periférica da FC parece ter participação, dos sistemas opioidérgico e nitrérgico, já na fase inflamatória, sugerem a participação das duas vias anteriores acrescidas das vias GABAérgica e colinérgica. A FC também demonstrou inibição da alodinia mecânica em camundongos portadores do tumor S-180 em até 4 horas com ausência de alterações em parâmetros comportamentais e motores. Esses achados corroboram com o uso popular de C. sylvestris Sw. para fins terapêuticos como proposto pelo Sistema Único de Saúde (SUS), sugerindo o desenvolvimento de um fitomedicamento com ação anticâncer e analgésica, tendo como base moléculas de diterpenos do tipo clerodânicos. ABSTRACT: The species Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) is a plant, widely used in South America, with diverse pharmacological activities attributed mainly to metabolites of the terpene class. This study aimed to evaluate the antitumor and antinociceptive action of a ethyl acetate fraction rich in clerodic diterpenes (FC) and Casearine X (Cas X) extracted from C. sylvestris Sw.. S-180 tumor bearing Swiss mice were treated with FC and Cas X for 7 days, i.p. and oral by gavage. After treatment they showed significant tumor inhibition rates (p<0.05), followed by histopathological changes such as vacuolar degeneration in the liver and autolysis in renal tissues. Ex vivo studies suggest necroptosis as the main mode by which cell death is triggered. Antiproliferative analyzes in human tumor lines (HCT-116 and SF-295) were performed in immunodeficient mice (CB-17 SCID and BALB/c Nude). In the Hollow Fiber Assay assay, FC reduced the proliferation of neoplastic cells at all doses tested by both pathways (2.5 and 5 mg/kg/day i.p. and 25 and 50 mg/kg/day o.v.). In the xenographic model, there was a significant reduction of HCT-116 tumors in animals treated with FC via i.p. and o.v., with no alterations in organs and haematological parameters. Photomicrographs of thyroids revealed necrotic areas and reversible morphological lesions in the liver and kidneys of FC treated animals. Abdominal writhing tests induced by acetic acid and the formalin test were used to evaluate antinociceptive action, whereas the Von Frey filament test was used to determine mechanical allodynia. In the contortion test the FC presented significant antinociceptive effect in healthy mice and affected by the S-180 tumor. In the neurogenic phase of the formalin test the FC reduced the paw licking time at all doses and routes tested and in the inflammatory phase only animals treated at doses of 25 and 50 mg/kg o.v. this effect was observed in a significant way. In the evaluation of the involvement of specific pathways the peripheral antinociceptive action of the FC seems to have participation, from the opioidergic and nitrergic systems, already in the inflammatory phase, suggest the participation of the two anterior pathways plus the GABAergic and cholinergic pathways. The FC also demonstrated inhibition of mechanical allodynia in S-180 tumor bearing mice within 4 hours without changes in behavioral and motor parameters. These findings corroborate the popular use of C. sylvestris Sw. For therapeutic purposes as proposed by the Unified Health System (SUS), suggesting the development of a phytomedication with anticancer and analgesic action, based on diterpene molecules of the clerodan type.