DESENVOLVIMENTO DE BIOSSENSOR ELETROQUÍMICO, DE BAIXO CUSTO, PARA A DETERMINAÇÃO DE REATIVIDADE ANTI-HLA, NO CONTEXTO DO TRANSPLANTE DE ÓRGÃOS SÓLIDOS

Abstract

RESUMO: O transplante de rins é considerado atualmente a forma de tratamento mais efetiva para a Insuficiência Renal Crônica na fase terminal, possibilitando a melhoria na qualidade de vida e sobrevida do paciente em longo prazo. Por este fator, a rejeição do alo-enxerto tem sido considerada um fator que tem gerado grande preocupação na terapia de receptores de transplantes renais na busca por medidas de prevenção deste evento. Neste trabalho utilizou-se um eletrodo de ouro, “homemade” que apresentou voltamograma característico de ouro policristalino. Foram imobilizados os linfócitos e testados com soros humanos positivos e negativos e complementos sobre o eletrodo de ouro. Os experimentos foram realizados em uma célula de três eletrodos: trabalho o eletrodo de ouro; referencia Ag/AgCl em solução de KCl saturado; contra eletrodo placa de platina. A técnica utiliza foi a técnica eletroquímica, voltametria cíclica. Os voltamogramas cíclicos dos linfócitos imobilizados sobre a superfície do ouro apresentou corrente anódica 1,78 µA em aproximadamente 0,50 V vs. Ag/AgCl. As respostas eletroquímicas dos soros (positivo e negativo) e do complemento não apresentam sinais oxidação ou redução no intervalo de potencial medido. Os eletrodos com células e soro positivo apresentou o sinal de corrente amplificado, no potencial de oxidação das células O eletrodo foi qualitativamente eficiente quando comparado aos métodos de análise citométrica de fluxo e citotoxicidade dependente de complemento, podendo ser utilizado com vantagens operacionais e econômicas. ABSTRACT: Kidney transplantation is currently considered the most effective form of treatment for chronic renal failure in the terminal phase, making it possible to improve quality of life and long-term survival of the patient. Due to this factor, allograft rejection has been considered a factor that has generated great concern in the therapy of renal transplant recipients in the search for measures to prevent this event. This work reports the development of an electrochemical biosensor for use in genetic compatibility testing among individuals. A "homemade" gold electrode was used, which showed characteristic voltammograms of polycrystalline gold. Lymphocytes were immobilized and tested with positive and negative human serum and complements on the gold electrode. The experiments were carried out in a cell of three electrodes: work electrode - electrode gold; reference electrode - Ag / AgCl in saturated KCl solution; counter electrode - plate platinum. The technique used was cyclic voltammetry. The cyclic voltammograms of immobilized lymphocytes on the gold surface presented 1.78 μA anode current at approximately 0.50 V vs. Ag / AgCl. The electrochemical responses of serums (positive and negative) and complement do not show oxidation or reduction signals in the measured potential range. The electrodes with cells and positive serum showed the amplified current signal in the oxidation potential of the cells. The electrode developed to verify genetic compatibility between individuals, in a qualitative analysis, was effective when compared with the methods of flow cytometric analysis and complement dependent cytotoxicity. The results suggest that the electrochemical biosensor can be used for such an application.