EPIISOPILOTURINA ATENUA OS EFEITOS PRÓ INFLAMATÓRIOS DA COLITE EXPERIMENTAL ATRAVÉS DO RECEPTOR M1

Abstract

RESUMO Introdução: A colite ulcerativa é uma doença crônica que acomete o cólon e o reto, caracterizada por ulcerações da mucosa e submucosa do cólon sem afetar as camadas mais profundas da parede intestinal. Atualmente, as terapias convencionais utilizadas no tratamento da colite ulcerativa apresentam como objetivo o controle da inflamação, o alívio da dor abdominal e a manutenção da remissão da doença. No entanto, estas terapias estão associadas com uma variedade de efeitos colaterais que dificultam o seu uso. Uma alternativa é a utilização de compostos naturais com propriedades promissoras para o tratamento dessa patologia. Um dos principais alcaloides extraídos do jaborandi é a epiisopiloturina, que possui estrutura química similar a pilocarpina, e tem demostrado ser um alcalóide promissor quanto aos seus efeitos anti-inflamatórios demostrados em estudos anteriores, sendo importante estudar por qual via esse efeito acontece. Objetivo: O presente trabalho tem como objetivo avaliar a participação do receptor muscarínico M1 na resposta antiinflamatória da epiisopiloturina 17 horas após a indução da colite induzida por ácido acético. Métodos: Foi realizado inicialmente um estudo de docagem molecular da epiisopiloturina com o receptor muscarínico M1. A atividade anti-inflamatória da Epiisopiloturina no curso da colite induzida por ácido acético foi avaliado administrando-se a substância nas doses de 0,01; 0,1 e 1,0 mg/kg via intraperitoneal. Para analisar a participação do sistema colinérgico, mas especificamente do receptor muscarínico M1 no mecanismo de ação anti-inflamatória da epiisopiloturina na colite por ácido acético sua ação foi bloqueada usando pirenzepina (antagonista do receptor M1). Foram avaliados os escores macroscópicos e microscópicos, os parâmetros bioquímicos da lesão (dosagem de MPO, MDA, GSH, NO2/NO3), bem como a mensuração de citocinas e a imunoexpressão por western blot. Resultados e discussão: No estudo inicial de docagem molecular a epiisopiloturina demonstrou afinidade de ligação com o receptor muscarínico M1. A epiisopiloturina na dose de 0,1mg/kg demostrou um melhor efeito anti-inflamatório ao diminuir parâmetros inflamatórios, no curso da colite induzida por ácido acético. Já os grupos de animais tratados simultaneamente com a epiisopiloturina na dose de 0,1 mg/kg e cotratados com o antagonista colinérgico pirenzepina, apresentaram uma redução dos efeitos anti-inflamatórios da epiisopiloturina, demostrando assim o bloqueio da ação da mesma pela pirenzepina. Conclusão: Através dos resultados obtidos, o presente trabalho infere que a epiisopiloturina tem sua ação anti-inflamatória através do receptor muscarínico M1, visto que o bloqueio do receptor com o antagonista farmacológico reduziu os efeitos anti-inflamatórios da droga no curso da colite experimental, apontando que a molécula é uma alternativa promissora para o tratamento da colite ulcerativa. ABSTRACT: Introduction: Ulcerative colitis is a chronic disease that affects the colon and rectum, characterized by ulcerations of the mucosa and submucosa of the colon without affecting the deeper layers of the intestinal wall. Currently, the conventional therapies used to treat ulcerative colitis aim to control inflammation, relieve abdominal pain and maintain remission of the disease. However, these therapies are associated with a variety of side effects that hinder their use. An alternative is the use of natural compounds with promising properties for the treatment of this pathology. One of the main alkaloids extracted from jaborandi is epiisopiloturine, which has a chemical structure similar to pilocarpine, and has been shown to be a promising alkaloid in terms of its anti-inflammatory effects demonstrated in previous studies, it is important to study which way this effect happens. Objective: This study aims to evaluate the participation of the muscarinic M1 receptor in the anti-inflammatory response of epiisopiloturine 17 hours after induction of acetic acid-induced colitis. Methods: A molecular docking study of epiisopiloturine with the M1 muscarinic receptor was initially carried out. The anti-inflammatory activity of Epiisopiloturine in the course of colitis induced by acetic acid was evaluated by administering the substance in doses of 0.01; 0.1 and 1.0 mg / kg intraperitoneally. To analyze the participation of the cholinergic system, but specifically of the muscarinic M1 receptor in the mechanism of anti-inflammatory action of epiisopiloturine in acetic acid colitis, its action was blocked using pirenzepine (M1 receptor antagonist). The macroscopic and microscopic scores, the biochemical parameters of the lesion (MPO, MDA, GSH, NO2/NO3) were evaluated, as well as the measurement of cytokines and immunoexpression by western blot. Results and discussion: In the initial study of molecular docking, epiisopiloturine demonstrated a link affinity with the muscarinic receptor M1. Epiisopiloturine at a dose of 0.1 mg / kg showed a better anti-inflammatory effect by decreasing inflammatory parameters, in the course of colitis induced by acetic acid. The groups of animals treated simultaneously with epiisopiloturine at a dose of 0.1 mg / kg and co-treated with the cholinergic antagonist pirenzepine, showed a reduction in the anti-inflammatory effects of epiisopiloturine, thus demonstrating the blocking of its action by pirenzepine. Conclusion: Based on the results obtained, the present study infers that epiisopiloturine has its anti-inflammatory action through the M1 muscarinic receptor, since blocking the receptor with the pharmacological antagonist reduced the antiinflammatory effects of the drug in the course of experimental colitis, pointing out that the molecule is a promising alternative for the treatment of ulcerative colitis.