ANÁLISE DOS EFEITOS ORAIS E HEPÁTICOS DO ALFA-TERPINEOL COMPLEXADO COM BETA-CICLODEXTRINA NO MODELO DE PERIODONTITE INDUZIDA EM RATOS

Abstract

RESUMO: A periodontite é uma doença infecciosa e imunoinflamatória multifatorial que, além de comprometer progressivamente a integridade do periodonto, pode causar danos remotos, incluindo alterações hepáticas. Essa correlação reforça a necessidade de desenvolver tratamentos novos e eficazes. Assim, o alfa terpineol (α-TPN), um monoterpeno álcool derivado de óleos essenciais, em complexação com beta ciclodextrina (β-CDs), promove um efeito possivelmente benéfico na terapêutica adjuvante da periodontite por suas conhecidas propriedades biológicas, bioquímicas e tecnológicas. Neste trabalho, o objetivo foi investigar a ação anti-inflamatória e antioxidante proporcionada pelo α-TPN isolado e α-TPN complexado com β-CDs em modelo experimental de periodontite induzida em ratos mediante análise dos parâmetros orais, sanguíneos e hepáticos. Quanto aos parâmetros clínicos foi analisado o índice de sangramento gengival, mobilidade dental e profundidade de sondagem. Altura óssea alveolar e mieloperoxidase (MPO) gengival também foram observadas e analisadas. Avaliação da fosfatase alcalina (FAL) por reação de imunohistoquímica foi realizada em amostras do fígado para verificar o dano hepático causado pela periodontite. A ação do complexado foi analisada histopatologicamente e morfometricamente no fígado. Marcadores de inflamação tais como a MPO e citocinas do grupo de fatores de necrose tumoral alfa (TNF-α) e interleucina 1 beta (IL-1β) e de estresse oxidativo pelas dosagens de malondialdeído (MDA); glutationa reduzida (GSH), nitritos e nitratos foram quantificados. Parâmetros bioquímicos no sangue como a lipoproteína de alta densidade (HDL), triglicerídeos, colesterol total, gama glutamiltransferase (GGT), alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST) e glicose foram analisados. Dos parâmetros hepáticos, foi considerada a massa corporal hepática, a análise histopatológica do fígado e de ultraestrutura do hepatócito por microscopia eletrônica de transmissão (MET). Desta análise, os animais induzidos com a periodontite apresentaram as seguintes alterações: significante aumento no número de hepatócitos binucleados e FAL positivos, aumento no tamanho e número das vesículas lipídicas (VLs), aumento na distância entre as cisternas do retículo endoplasmático rugoso (RER), aumento no tamanho das mitocôndrias, foamy citoplasmático e acúmulo de glicogênio. O tratamento tanto do α-TPN isolado quanto dessa mesma molécula complexada com β-CD melhoraram significativamente vários parâmetros orais comparado com os animais não tratados. Além disso, o tratamento com o αTPN isolado e complexado com β-CD diminuiu o escore de esteatose dos ratos com periodontite. O complexado demonstrou ação promissora quanto à melhora significativa nos parâmetros clínicos orais com diminuição da inflamação e nos indicativos de estresse oxidativo. Além disso, a microesteatose causada pela periodontite foi amenizada nos ratos tratados quando o complexado, destacando que a βCD melhorou as propriedades do α-TPN. ABSTRACT: Periodontitis is a multifactorial infectious and immunoinflammatory disease that, in addition to progressively compromising the integrity of the periodontium, can cause remote damage, including liver damage. This correlation reinforces the need to develop new and effective treatments. Thus, alpha terpineol (α-TPN), a monoterpene alcohol derived from essential oils, in complexation with β-cyclodextrin (β-CDs), promotes a potentially beneficial effects on adjuvant periodontitis therapy because of its known biological, biochemical and technological properties. In this work, the objective was to investigate the anti-inflammatory and antioxidant action provided by α-TPN isolated and α-TPN complexed with β-CDs in experimental model of periodontitis induced in rats by analysis of oral, blood and liver parameters. Regarding clinical parameters, gingival bleeding index, dental mobility and depth of probing were analyzed. Alveolar bone height and gingival myeloperoxidase (MPO) were also observed and analyzed. Evaluation of alkaline phosphatase by immunohistochemical reaction was performed in liver samples to verify the liver damage caused by periodontitis. The complex was analyzed histopathologically and morphometrically in the liver. Inflammatory markers such as MPO and cytokines from the group of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and interleukin 1 beta (IL-1β) and from oxidative stress by the doses of malondialdehyde (MDA); reduced glutathione (GSH), nitrites and nitrates were quantified. Biochemical parameters in the blood such as high density lipoprotein (HDL), triglycerides, total cholesterol, gamma glutamyltransferase (GGT), alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and glucose were analyzed. Hepatic parameters, hepatic body mass, histopathological analysis of the liver and hepatocyte ultrastructure were considered by transmission electron microscopy (TEM). From this analysis, animals induced with periodontitis presented the following alterations: a significant increase in the number of binucleated and FAL positive hepatocytes, increase in the size and number of lipid vesicles (VLs), increase in the distance between the cisternae of the rough endoplasmic reticulum (RER) , increase in size of mitochondria, foamy cytoplasm and accumulation of glycogen. Treatment of both α-TPN alone and that same β-CD complexed molecule significantly improved several oral parameters compared to animals with periodontitis. In addition, treatment with αPTN isolated and complexed with β-CD decreased the steatosis score of untreated animals. The complex showed promising action regarding the significant improvement in oral clinical parameters with decreased inflammation and indicative of oxidative stress. In addition, the microsteidosis caused by periodontitis was attenuated in the treated rats when complexed, noting that βCD improved the properties of α-TPN.