EFEITO ANTI-INFLAMATÓRIO E ANTIOXIDANTE DO POLISSACARÍDEO SULFATADO EXTRAÍDO DA ALGA MARINHA VERMELHA Hypnea musciformis DURANTE A COLITE INDUZIDA POR TNBS EM RATOS

Abstract

RESUMO: Introdução: Polissacarídeos sulfatados compreendem um grupo de biopolímeros, heterogêneos e complexos oriundos da matriz extracelular de algas marinhas. O polissacarídeo sulfatado da alga marinha vermelha Hypnea musciformis tem sido bastante estudado devido às suas propriedades e características bioquímicas específicas, por isto este polissacarídeo possui alguns efeitos farmacológicos comprovados, dentre os quais se destaca sua ação anti-inflamatória. Objetivo: O presente trabalho teve como objetivo extrair, caracterizar e avaliar a ação anti-inflamatória do polissacarídeo sulfatado da Hypnea musciformis sobre os efeitos deletérios da colite induzida pelo ácido trinitrobenzeno sulfônico em ratos. Métodos: Neste estudo, o polissacarídeo foi extraído e caracterizado usando técnicas de microanálise elementar, cromatografia líquida de alta eficiência e espectrometria de infravermelho. Para os estudos farmacológicos foram usados ratos Wistar machos pesando entre 150-200 g, sendo divididos em grupos de 5-7 animais. Em seguida os ratos foram tratados com o polissacarídeo sulfatado da H. musciformis nas doses de 10, 30 ou 60 mg/kg; logo em seguida a colite foi induzida usando o ácido trinitrobenzeno sulfônico a 50% em solução de etanol também a 50% v/v. Após três dias da indução da colite os animais foram eutanasiados e uma amostra de 5 cm do cólon foi retirada para avaliação dos escores macroscópicos e microscópicos de lesão, peso úmido e dosagens bioquímicas como: mieloperoxidase, interleucina 1 beta, fator de necrose tumoral alfa, glutationa, ácido malonildialdeído e nitrato/nitrito. Resultados: A caracterização bioquímica do polissacarídeo da H. musciformis apresentou um polímero do tipo К-carragenina com peso molecular de 1,24 X 105 g/mol. E o tratamento dos animais com este polissacarídeo na dose de 60 mg/kg demonstrou um padrão bastante satisfatório de redução da lesão intestinal, bem como uma diminuição do peso úmido. Além disto, o polissacarídeo em questão, mostrou uma redução significativa de todos os testes bioquímicos avaliados, especialmente os marcadores de migração de leucócitos como mieloperoxidase, citocinas pró-inflamatórias (IL-1β e TNF-α) e marcadores de estresse oxidativo in vivo (ácido malonildialdeído, glutationa e nitrato/nitrito). Conclusão: Os resultados apresentados neste estudo permitem concluir que a ação anti-inflamatória do polissacarídeo sulfatado da H. musciformis foi comprovada, revertendo de forma satisfatória os parâmetros deletérios da colite no modelo de doença inflamatória intestinal. Sugerindo, desta forma, uma forte relação deste polissacarídeo com a inibição do mecanismo de migração celular por mitigar o aporte de citocinas pró-inflamatórias e diminuir o estresse oxidativo nos locais da lesão. Isto permite sugerir este polissacarídeo como um potente candidato ao tratamento de pacientes com doença inflamatória intestinal. ABSTRACT: Introduction: Sulfated polysaccharides comprise a group of biopolymers heterogeneous and complex derived of the seaweed extracellular matrix. The sulfated polysaccharide of the red seaweed Hypnea musciformis have been extensively studied due to their biochemical properties and specific features, so this polysaccharide has some proven pharmacological effect, among which stands out its anti-inflammatory action. Objective: This study aimed to extract, characterize and evaluate the anti-inflammatory action of the sulfated polysaccharide of the H. musciformis against deleterious parameters of experimental colitis in rats. Methods: In this study, extraction and characterization of the polysaccharide used elemental microanalysis high-performance liquid chromatography and infrared spectrometry techniques. For pharmacological studies we used wistar males rats weighing (150-200 g) were divided into groups of 5-7 animals, then the animals were treated with the sulfated polysaccharide of H. musciformis at doses of 10, 30 or 60 mg/kg, then immediately colitis were induced using trinitrobenzenesulfonic acid 50% in ethanol solution also at 50% v/v. Three days after colitis induction, the animals was euthanized and a sample of 5 cm of colon were removed for assessment of macroscopic and microscopic scores, wet weight and biochemical measurements as myeloperoxidase, interleukin 1 beta, alpha tumor necrosis factor, glutathione, malonyldialdehyde acid and nitrate and nitrite. Results: Biochemical characterization of the polysaccharide of H. musciformis showed a type polymer К-carrageenan having a molecular weight of 1.24 x 105 g / mol. The treatment of the animals with the sulfated polysaccharide H. musciformis at a dose of 60 mg/kg had a very satisfactory standard of reduction intestinal damage, as well as a reduction in wet weight, moreover the polysaccharide in question, showed a significant reduction of all biochemical test evaluated, with emphasis on neutrophil migration markers, pro-inflammatory cytokines and oxidative stress markers. Conclusion: The results this study allow we to conclude that the anti-inflammatory action of the sulfated polysaccharide from H. musciformis has been reproduced satisfactorily, unanimously reversing deleterious parameters of colitis in inflammatory bowel disease model. Thus suggesting a strong relationship of this polysaccharide in the inhibition of cell migration mechanism and mitigating the contribution of pro-inflammatory cytokine as well as reduce the oxidative stress in the lesion sites, this allows suggest that this polysaccharide as a potent candidate for the treatment of patients with inflammatory bowel disease.