ESTUDO DE ASSOCIAÇÃO DOS POLIMORFISMOS KCNJ11 Glu23Lys E ABCC8 Ser1369Ala COM A SUSCETIBILIDADE AO DIABETES MELITUS TIPO 2 EM UMA POPULAÇÃO DO NORDESTE BRASILEIRO

Abstract

RESUMO: O diabetes mellitus (DM) é uma síndrome metabólica caracterizada pelo aumento da concentração de glicose no sangue, acompanhada de distúrbios metabólicos nas proteínas e ácido graxos. O diabetes tipo 2 (DM2) é consequência de uma interação complexa entre fatores genéticos, epigenéticos e ambientais. Embora os fatores ambientais pareçam ter um peso maior, os fatores genéticos têm ganhado notoriedade nos últimos tempos devido ao desenvolvimento de tecnologias de biologia molecular e estudos de associação. Polimorfismos dos genes KCNJ11 e ABCC8 já foram associados em diversas populações ao risco aumentado de desenvolver DM2. O objetivo deste estudo é avaliar a influência dos polimorfismos KCNJ11 Glu23Lys e ABCC8 Ser1369Ala, bem como seus haplótipos, no desenvolvimento do DM2 em uma população do nordeste brasileiro e suas relações com as variáveis clínicas e bioquímicas dos grupos caso e controle. Para compor o grupo de estudo foram coletadas amostras de sague periférico de 235 pacientes não aparentados diagnosticados com DM2. Também foram coletadas 206 amostras de controles saudáveis provenientes de laboratórios de análises clínicas, sem condições associadas à doença, confirmado por exames clínicos e laboratoriais e sem história familiar de diabetes. Dados laboratoriais como HbA1c, glicemia em jejum, colesterol HDL, colesterol total e triglicerídeos, bem como o IMC foram coletados dos dois grupos. A análise dos polimorfismos foi realizada utilizando-se a técnica de PCR-RFLP. As frequências genotípicas de KCNJ11 e ABCC8 não diferiram significativamente entre os grupos caso e controle (KCNJ11 p=0,7863 e ABCC8 p=0,2145), bem como as frequências alélicas (p=0,87 e p=0,75; respectivamente). Em nenhum dos casos foi observada uma maior predisposição de desenvolver DM2 associada a qualquer dos genótipos (p>0,05). Os polimorfismos KCNJ11 Glu23Lys e ABCC8 Ser1369Ala apresentam um forte desequilíbrio de ligação (D’=0,911 e r²=0,779). Nenhum dos haplótipos diferiu significativamente entre a população caso e controle (p>0,05). Verificou-se que os níveis colesterol total são mais baixos em controles que possuem duas cópias do alelo KCNJ11 Lys23 (p=0,0338) e que esses indivíduos ainda possuem níveis de HbA1c mais elevados que portadores do genótipo selvagem KCNJ11 Glu23 (p=0,0091). Os níveis de HbA1c foram consideravelmente mais elevados apenas em homozigotos ABCC8 Ala1369 quando comparados a homozigotos ABCC8 Ser1369. Pacientes com DM2 que possuem os genótipos KCNJ11 Lys/Lys e ABCC8 Ala/Ala e não fazem uso de insulina e sulfonilureias simultaneamente apresentam um IMC significativamente mais baixo que portadores dos genótipos KCNJ11 Glu/Glu (p=0,0003) ou Glu/Lys (p=0,0003) e ABCC8 Ser/Ser (p=0,0151) ou Ala/Ser (p=0,0082). Em suma, nosso estudo não apontou correlações significativas entre os polimorfismos KCNJ11 Glu23Lys e ABCC8 Ser1369Ala com uma suscetibilidade aumentada para o DM2. No entanto, as diferenças apresentadas por algumas das variáveis analisadas entre os diferentes genótipos sugerem que os polimorfismos abordados desempenham um papel importante no curso dessa doença. ABSTRACT: Diabetes mellitus (DM) is a metabolic syndrome characterized by the increase of the concentration of glucose in the blood, accompanied by metabolic disorders in protein and fatty acid. Type 2 diabetes (T2D) is a result of a complex interaction between genetic, epigenetic and environmental factors. Although environmental factors appear to have a greater burden, genetic factors have gained notoriety in recent times due to the development of molecular biology technologies and association studies. KCNJ11 gene and ABCC8 polymorphisms have been associated in various populations at increased risk of developing T2D. The aim of this study is to evaluate the influence of polymorphisms KCNJ11 Glu23Lys and ABCC8 Ser1369Ala, as well as their haplotypes, in the development of DM2 in a population of northeastern Brazil and its relationship with clinical and biochemical variables of case and control groups. To compose the study group were collected samples of peripheral blood of 235 patients unrelated diagnosed with T2D. Were also collected samples of 206 healthy controls from laboratories of clinical analyses, without conditions attached to the disease, confirmed by clinical and laboratory examinations and no family history of T2D. Laboratory data as a HbA1c, fasting glucose, HDL cholesterol, total cholesterol and triglycerides, as well as the BMI were collected from the two groups. The analysis of polymorphisms was performed using PCR-RFLP technique. The genotype frequencies of KCNJ11 and ABCC8 did not differ significantly between the case and control groups (KCNJ11 p = 0.7863 and ABCC8 p = 0.2145) as well as the allele frequencies (p = 0.87 and p = 0.75, respectively). In any cases was observed a predisposition increase to develop DM2 associated with any of the genotypes (p > 0.05). Polymorphisms KCNJ11 Glu23Lys and ABCC8 Ser1369Ala present a strong linkage disequilibrium (D = 0.911 and r ² = 0.779). None of the haplotypes differed significantly between the case and control populations (p > 0.05). It was found that total cholesterol levels are lower in controls that have two copies of the KCNJ11 Lys23 allele (p= 0.0338) and that these individuals still have HbA1c levels higher than carriers of the wild KCNJ11 Glu23 genotype (p= 0.0091). HbA1c levels were considerably higher in homozygotes ABCC8 only Ala1369 when compared to the homozygous ABCC8 Ser1369. Patients with T2D that have the genotypes KCNJ11 Lys/Lys and ABCC8 Ala/Ala and don't make use of insulin and sulfonilureias simultaneously present a significantly lower BMI than carriers of genotypes KCNJ11 Glu/Glu (p= 0.0003) or Glu/Lys (p= 0.0003) and ABCC8 Ser/Ser (p= 0.0151) or Ala/Ser (p= 0.0082). In sum, our study showed no significant correlation between polymorphisms KCNJ11 Glu23Lys and ABCC8 Ser1369Ala with an increased susceptibility to the T2D. However, the differences presented by some of the analyzed variables between different genotypes suggest that polymorphisms covered play an important role in the course of the disease.