ATIVIDADE GASTROPROTETORA E PERFIL TOXICOLÓGICO AGUDO DE Tocoyena hispidula Standl. EM ROEDORES

Abstract

RESUMO:A úlcera gástrica é um dos principais distúrbios gastrintestinais, sendo considerada uma doença comum que afeta mais de 10% da população mundial, com incidência e prevalência crescente e altas taxas de morbidade e mortalidade. No Brasil, segundo o Ministério da Saúde, foram relatadas 11.532 internações em 2018, relacionadas a presença de úlceras gástricas e duodenais, com taxa de mortalidade de 9,86%. Tocoyena hispidula Standl., conhecida popularmente como flor-do-cerrado, angeliquinha, angelca ou jenipapinho é um subarbusto usado popularmente como terapia medicinal para dor de barriga (chá preparado por infusão) e inflamação no útero (garrafada). Já foram identificados em sua composição compostos como cumarinas, triterpenóides e iridoídes que podem ter importante ação anti-inflamatória, antiulcerogênica e antioxidante. Esse estudo objetivou investigar a atividade gastroprotetora do extrato etanólico do caule de Tocoyena hispidula Standl (Th-EtOHcc) e sua fração metanólica Th-MeOHcc (na melhor dose do extrato) em modelos de lesões gástricas em ratas ou camundongos. Possíveis mecanismos de ação bem como os sinais de toxicidade durante o acompanhamento dos animais (machos ou fêmeas) tratados por via oral com dose única ou com doses diárias do extrato foram avaliados em modelo crônico de lesão gástrica. Camundongos Swiss (30-35g) foram utilizados para avaliar a toxicidade aguda e a área ulcerada de lesões gástricas induzidas por etanol. Ratas Wistar (180-250 g), foram utilizadas para avaliar a área ulcerada de lesões gástricas induzidas por isquemia e reperfusão, bem como determinar o volume de lesão induzida por ácido acético, além da preservação da barreira de muco no modelo de ligadura de piloro (CEUA 413/17). Tanto na avaliação de toxicidade aguda (dose única de 2000 mg/kg, v.o.) quanto no tratamento diário durante 7 dias consecutivos (1, 10 e 50 mg/kg, v.o.), Th-EtOHcc não apresentou efeitos deletérios que implicasse toxicidade. Th-MeOHcc (50 mg/kg, v.o.) também não apresentou sinais de toxicidade nos animais tratados por 7 dias consecutivos. No modelo de úlceras induzidas por etanol absoluto, o Th-EtOHcc apresentou efeito gastroprotetor significativo nas doses de 1, 10 e 50 mg/kg, ao inibir a área da lesão em 72%, 86% e 84%, respectivamente. No modelo de iquemia e reperfusão, Th-EtOHcc apresentou efeito gastroprotetor nas doses de 10 e 50 mg/kg, ao inibir a área de lesão em 96% e 61%, respectivamente. Th-EtOHcc foi capaz de reduzir significativamente as citocinas pró-inflamatória TNF-α e IL-1β no modelo de lesão induzido por isquemia e reperfusão, bem como, também foi capaz de preservar os níveis de muco no modelo de ligadura do piloro. Nas lesões induzidas por ácido acético, o extrato Th-EtOHcc nas doses de 1, 10, e 50 mg/kg diminuiu significativamente o volume da lesão ulcerativa em 81%, 58% e 71%, respectivamente, em comparação ao grupo veículo, demonstrando efeito restaurador da mucosa. Nesse último protocolo foi avaliado ainda um possível efeito cicatrizante da fração Th-MeOHcc (50 mg/kg), mostrando uma significativa redução do volume da lesão em 85%. O presente trabalho evidencia a baixa toxicidade de Th-EtOHcc, bem como seu efeito gastroprotetor sobre a lesão gástrica induzida por etanol absoluto e isquemia e reperfusão por meio da inibição da migração neutrofílica e da manutenção da integridade da mucosa, bem como pela preservação da barreira de muco evidenciado no protocolo de ligadura do piloro. Além disso, Th-EtOHcc e Th-MeOHcc apresentam atividade cicatrizante, por diminuição de infiltrado neutrofiílico e aumento de fibras de colágeno, observados microscopicamente.

ABSTRACT:Gastric ulcer is one of the main gastrointestinal disorders, being considered a common disease that affects more than 10% of the world population, with increasing incidence and prevalence and high rates of morbidity and mortality. In Brazil, according to the Ministry of Health, 11,532 hospitalizations were reported in 2018, related to the presence of gastric and duodenal ulcers, with a mortality rate of 9.86%. Tocoyena hispidula Standl., popularly known as cerrado-flower, “angeliquinha, angelca or jenipapinho” is a subshrubs popularly used as medicinal therapy for tummy pain and inflammation in the uterus (bottle). Compounds such as coumarins, triterpenoids and iridoids have been identified in its composition, which may have an important anti-inflammatory, antiulcerogenic and antioxidant action. This study aimed to investigate the gastroprotective activity of Tocoyena hispidula Standl ethanolic extract (Th-EtOHcc) and its methanolic fraction Th-MeOHcc (in the best dose of the extract) in gastric lesions in rats or mice. Possible mechanisms of action as well as signs of toxicity during the monitoring of the animals (males or females) treated orally with single dose or with daily doses of the extract were evaluated in a chronic model of gastric lesion. Swiss mice (30-35 g) were used to assess the acute toxicity and the ulcerated area of gastric lesions induced by ethanol. Wistar rats (180-250 g) were used to evaluate the ulcerated area of gastric lesions induced by ischemia and reperfusion, as well as to determine the volume of injury induced by acetic acid, besides the preservation of the mucus barrier in the pylorus ligature model (CEUA 413/17). Th-EtOHcc showed no deleterious effects involving toxicity in both the acute toxicity assessment (single dose 2000 mg / kg, vo) and daily treatment during 7 consecutive days (1, 10 and 50 mg / kg, vol). Th-MeOHcc (50 mg / kg, v.o.) also showed no signs of toxicity in treated animals for 7 consecutive days. In the model of absolute ethanol-induced gastric ulcers, Th-EtOHcc showed a significant gastroprotective effect at doses of 1, 10 and 50 mg / kg, reducing the lesion area by 72%, 86% and 84%, respectively.In the model of ichemia and reperfusion, Th-EtOHcc showed a gastroprotective effect at 10 and 50 mg / kg, reducing the lesion area by 96% and 61%, respectively. Th-EtOHcc was able to significantly reduce the proinflammatory cytokines TNF-α and IL-1β in the injury model induced by ischemia and reperfusion, as well as, it was also able to preserve mucus levels in the pylorus ligature model. Concerning the acetic acid-induced lesions, the Th-EtOHcc extract at 1, 10 and 50 mg / kg significantly reduced the volume of the ulcerative lesion by 81%, 58% and 71%, respectively, compared to the vehicle group, demonstrating restorative effect of the mucosa. In this latter experimental protocol, a possible healing effect of the Th-MeOHcc fraction (50 mg / kg) showing a significantly reduce from in lesion volume by 85%.The present work shows evidence of the low toxicity of Th-EtOHcc, as well as its gastroprotective effect on the gastric injury induced by absolute ethanol and ischemia and reperfusion through the inhibition of the neutrophil migration and the maintenance of the mucosal integrity. as well as by the preservation of the mucus barrier evidenced in the pylorus ligature model. In addition, Th-EtOHcc e Th-EtOHcc presents wound healing activity by reduction of neutrophilic infiltrate and increase of collagen fibers, observed microscopically.