ATIVIDADE ANTIDIARREICA DO MONOTERPENO α-TERPINEOL EM ROEDORES

Abstract

RESUMO:A diarreia é uma desordem gastrintestinal que se caracteriza pela mudança na consistência das fezes com aumento no teor de água, tornando-as líquidas ou pastosas. De acordo com a UNICEF, a diarreia é uma das principais causas de morte infantil, representando em 2016, aproximadamente 8% de todas as mortes em crianças menores de 5 anos. A terapêutica de doenças diarreicas geralmente é centralizada na reposição de fluidos e eletrólitos, mas as taxas de mortalidade ainda são significativas, então a população faz uso de plantas medicinais como alternativa, tornando-as fonte de pesquisa para descoberta de novos tratamentos. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar o efeito do monoterpeno α-Terpineol (α-TPN) na atividade antidiarreica e possíveis mecanismos envolvidos na atividade evidenciada. Inicialmente, a atividade antidiarreica do α-TPN foi avaliada no modelo de diarreia aguda e enteropooling induzido por óleo de rícino em camundongos Swiss, que foram pré-tratados com α-TPN (6,25; 12,5; 25; 50 mg/kg, v.o.), e depois de 1 h receberam óleo de rícino (10 mL/kg, v.o.). Os animais foram então colocados em gaiolas forradas e observados durante 4 h, ao final do tempo, foi avaliada a severidade da diarreia, peso total de fezes e a medição do volume do conteúdo intestinal (enteropooling). Para avaliar o trânsito gastrintestinal, os camundongos receberam óleo de rícino e 1 h depois foram tratados com α-TPN (12,5 mg/kg, v.o.). Após 1 h, os animais receberam 0,20 mL de carvão ativado por via oral, e 20 min depois foram eutanasiados e a distância percorrida pelo carvão no intestino foi mensurada. A participação opióide e/ou antimuscarínica no trânsito gastrintestinal foi também investigada usando naloxona (2 mg/kg, s.c.; antagonista opióide) e betanecol (3 mg/kg, i.p.; agonista muscarínico), respectivamente. Na diarreia inflamatória, os animais foram pré-tratados com α-TPN (12,5 mg/kg, v.o.) e a diarreia foi induzida por PGE2 (100 μg/kg, v.o.). Após 30 minutos os animais foram eutanasiados e o volume do conteúdo intestinal foi mensurado. O efeito do α-TPN (12,5 mg/kg, v.o.) na diarreia secretora foi investigado utilizando o modelo de secreção de fluido em alças intestinais isoladas de camundongos vivos tratados com toxina da cólera. O α-TPN foi avaliado quanto à sua capacidade na absorção de fluidos em alças intestinais isoladas e interação com receptores GM1. As doses testadas apresentaram efeito antidiarreico significativo (p<0,05), reduzindo a quantidade total de fezes (55%; 48%; 44%; 24%, respectivamente) e fezes diarreicas, exceto a dose de 50 mg (47%; 66%; 56%; 10%). Todas as doses foram significativas no protocolo de enteropooling (46%; 78%; 66%; 41%, respectivamente), sendo que a dose de 12,5 mg/kg do α-TPN exibiu os melhores resultados, sendo adotada como dose padrão para os testes seguintes. O α-TPN reduziu o trânsito gastrintestinal, a partir de mecanismos anticolinérgicos, além de exercer ação significativa no modelo de diarreia induzida por PGE2 (Inibição de 39%). Foi capaz de reduzir a geração de fluidos e perdas de íons Cl-, ao interagir diretamente com os receptores GM1 e a toxina da cólera no modelo de diarreia secretora, além de aumentar a absorção de fluidos no modelo de absorção intestinal em alças isoladas de camundongos. Diante dos resultados apresentados, comprova-se a atividade antidiarreica do α-TPN por meio de redução da motilidade gastrintestinal na diarreia aguda através da ação anticolinérgica, na diarreia induzida por PGE2 e na diarreia induzida pela toxina da cólera, a partir da interação entre α-TPN-Toxina-GM1, reduzindo assim a perda de fluidos e íons para o lúmen intestinal, tornando-o um forte candidato à fármaco para tratamento de doenças diarreicas.ABSTRACT:Diarrhea is a gastrointestinal disorder that stands out in a number of new ideas on the subject, making them liquid or pasty. According to UNICEF, diarrhea is one of the leading causes of child deaths, accounting for approximately 8% of all deaths in children under 5 years of age in 2016. The treatment of diarrheal diseases is usually centralized in the replacement of fluids and electrolytes, but mortality rates are still significant, so the population uses medicinal plants as an alternative, making them the source of research for the discovery of new treatments. Thus, the aim of this study was to investigate the effect of monoterpene α-Terpineol (α-TPN) on antidiarrheal activity and possible mechanisms involved in the evidenced activity. The antidiarrheal activity of α-TPN was evaluated in the model of acute diarrhea and enteropooling induced by castor oil in Swiss mice, which were pretreated with α-TPN (6.25, 12.5, 25, 50 mg/kg, p.o.), and after 1 h they received castor oil (10 mL/kg, p.o.). The animals were then placed in lined cages and observed for 4 h, at the end of the time, the severity of the diarrhea, total weight of feces and the measurement of intestinal contents (enteropooling) were evaluated. To evaluate the gastrointestinal transit, the mice received castor oil and 1 h later were treated with α-TPN (12.5 mg/kg, p.o.). After 1 h, the animals received 0.20 ml of activated charcoal orally, and 20 min later they were euthanized and the distance covered by the coal in the intestine was measured. Opioid and/or antimuscarinic participation in gastrointestinal transit was also investigated using naloxone (2 mg/kg, s.c., opioid antagonist) and bethanechol (3 mg/kg, i.p., muscarinic agonist), respectively. In inflammatory diarrhea, animals were pretreated with α-TPN (12.5 mg/kg, p.o.) and diarrhea was induced by PGE2 (100 μg/kg, p.o.). After 30 minutes the animals were euthanized and the volume of the intestinal contents was measured. In addition, the effect of α-TPN (12.5 mg/kg, p.o.) on secretory diarrhea was investigated using the fluid secretion model in intestinal loops isolated from live mice treated with cholera toxin. α- TPN was evaluated for its ability to absorb fluids in isolated intestinal loops and interaction with GM1 receptors. As measured doses, the significant antidiarrheal effect (p <0.05) decreased the total amount of feces (55%, 48%, 44%, 24%, respectively) and diarrheal stools, except for dose of 50 mg (47%, 66%, 56%, 10%). All doses were significant in the enteropooling protocol (46%, 78%, 66%, 41%, respectively), and the 12.5 mg/kg dose of α-TPN exhibited the best results, being adopted as the standard dose for the following tests. α-TPN reduced gastrointestinal transit from anticholinergic mechanisms, in addition to exerting a significant action on the diarrheal model induced by PGE2 (39% inhibition). It was able to reduce the generation of fluids and losses of Cl- ions by interacting directly with GM1 receptors and cholera toxin in the secretory diarrhea model, in addition to increasing the fluid absorption in the intestinal absorption model in isolated mouse handles. In view of the results presented, the antidiarrheal activity of α- TPN is demonstrated by reduction of gastrointestinal motility in acute diarrhea through anticholinergic action, in PGE2-induced diarrhea and in cholera toxin-induced diarrhea, from the interaction between α-TPN-Toxin-GM1, thereby reducing the loss of fluids and ions to the intestinal lumen, making it a strong candidate for the drug for the treatment of diarrheal diseases.