ATIVIDADE DO ÓLEO ESSENCIAL DE Rosmarinus officinalis L. LIVRE E COMPLEXADO EM β-CICLODEXTRINA EM RATOS HIPERTENSOS – L-NAME.

Abstract

RESUMO: Rosmarinus officinalis L. (Lamiaceae), conhecida como alecrim, é uma planta medicinal cujo óleo essencial é rico em terpenóides. Múltiplos monoterpenos podem promover hipotensão, vasorelaxamento e outros efeitos biológicos. Contudo, dados da ação do óleo essencial de R. officinalis (OE-Ro) frente à hipertensão são incipientes. Neste estudo, objetivou-se averigar as propriedades e aplicações biotecnológicas do OE-Ro; caracterizar o OE-Ro e seu complexo com β-ciclodextrina (OE-Ro/β-CD); avaliar o efeito toxicológico destas substâncias, mas sobretudo avaliar a atividade do OE-Ro e OE-Ro/β-CD em ratos hipertensos. Foram feitas pesquisas, entre 2006 a 2017, nas bases PubMed, Science Direct e Web of Science e nos bancos INPI, WIPO e EPO sobre R. officinalis e associações com: óleo essencial, sistema cardiovascular, hipertensão e ciclodextrina. Os perfis químicos do OE-Ro e OE-Ro/β-CD foram obtidos por cromatografia e caracterizados através de metodologias padrão. Para a atividade citotóxica artemicida utilizou-se a metodologia de Meyer et al. (1982). A toxicidade aguda adotada foi a metodologia de ensaios toxicológicos da diretriz 423 e antioxidantes. Por fim, avaliou-se os efeitos do OE-Ro e de OE-Ro/β-CD sobre a pressão arterial média (PAM) e frequência cardíaca (FC) em ratos normotensos e hipertensos (L-NAME, 50 mg/kg, v.o) por 7, 14 e 21 dias. Os animais foram anestesiados submetidos a implantação de cateteres na veia cava inferior e aorta femoral. Os valores de PAM e FC foram obtidos através de um transdutor de pressão acoplado a um amplificador. Os procedimentos foram aprovados pelo CEEA-UFPI (078/2015). Os resultados foram expressos como Média ± E.P.M (p<0,05). Para a bioprospecção foram selecionados 305 artigos sobre OE-Ro, 6 associando R. officinalis à hipertensão e 59 patentes. Confirmou-se o potencial de exploração comercial do OE-Ro para novas formulações e reduzidos estudos sobre atividade anti-hipertensiva. O processo de inclusão OE-Ro/β-CD apresentou um bom rendimento (61,6%). Constatou-se que a CL50 foi de 188,2 μg/mL para OE-Ro nos microcrustáceos. Em ratos, a administração aguda de OE-Ro e OE-Ro/β-CD (2.000 mg/kg, v.o) não ocasionou mortes, apenas reduzidas alterações em alguns testes. A administração intravenosa (12,5; 25 e 50 mg/kg/OE-Ro) induziu um efeito anti-hipertensivo associado a bradicardia, podendo esta ser revertida pela atropina. Por via oral, a dose de 100 mg/kg/OE-Ro apresentou melhor atividade anti hipertensiva. Esta dose em animais normotensos não apresentou este efeito (104 ± 5 mmHg). Nos hipertensos, o OE-Ro livre e OE-Ro/β-CD (100 mg/kg, v.o) promoveram atividade anti-hipertensiva conforme o tempo de pré-tratamento com L-NAME. Entre os efeitos do OE-Ro e OE-Ro/β-CD não houve diferença significativa, mas deve-se ressaltar que o teor de OE-Ro no complexo foi menor. Conclui-se que o OE-Ro, mostra atividade anti-hipertensiva em ambas as vias de administração (i.v e v.o) e, que a β-CD melhorou sua propriedade anti-hipertensiva ao reduzir a concentração de óleo administrado necessária para alcançar o mesmo efeito sobre a pressão arterial. ABSTRACT Rosmarinus officinalis L. (Lamiaceae), known as rosemary, is a medicinal plant whose essential oil is rich in terpenoids. Multiple monoterpenes may promote hypotension, vasorelaxation, and other biological effects. However, data about the action of R. officinalis (EO-Ro) essential oil against hypertension are incipient. The objective of this study was to investigate the properties and biotechnological applications of EO-Ro; characterize free EO-Ro and complexed EO-Ro with β-cyclodextrin (EO-Ro/β-CD); evaluate the toxicological effect of these substances, and above all to evaluate the activity of EO-Ro and EO-Ro/β-CD in hypertensive rats. Research was done between 2006 and 2017 using the following databases (Science Direct, PubMed and Web of Science) and patents bases (INPI, WIPO and EPO) searching for articles with publications on R. officinalis and associations with essential oil (EO-Ro), cardiovascular system, hypertension and cyclodextrin. The chemical profile of EO-Ro and EO-Ro/β-CD were obtained by chromatography and characterized through standard methods. The methodology of Meyer et al. (1982) was used for artemicide and cytotoxic activities, The acute toxicity adopted was the methodology of toxicological tests of guideline 423 and antioxidants. Finally, we evaluated the effects of EO-Ro and EO-Ro/β-CD on mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) in normotensive and hypertensive rats (L-NAME, 50 mg/kg, po) for 7, 14 and 21 days. The animals were anesthetized undergoing implantation of catheters in the inferior vena cava and femoral aorta. The MAP and HR values were obtained through a pressure transducer coupled to an amplifier. All procedures were approved by CEEA-UFPI (078/2015). The results were expressed as Mean ± SEM and considered significant for values of p<0.05. For bioprospection, 305 articles on OE-Ro were selected, 6 associating R. officinalis with hypertension and 59 patents. The commercial exploration potential of OE-Ro for new formulations and reduced studies on antihypertensive activity was confirmed.The EO-Ro/β-CD inclusion process exhibited a good result (61.6%). It was found that a LC50 was 188.2 μg/mL for EO-Ro in microcrustaceans. EO-Ro and EO-Ro/β-CD (2000 mg/kg, po) administration in rats did not cause deaths, but caused only minor changes in some tests. Administration of EO-Ro at intravenous doses of 12.5; 25 and 50 mg/kg/ displayed a hypotensive effect associated with bradycardia. Oral administration of 100 mg/kg/EO-Ro showed better antihypertensive activity. However, in normotensive animals this effect was not observed (104 ± 5 mmHg). In hypertensive rats, EO-Ro and EO-Ro/β-CD (100 mg/kg) promoted antihypertensive activity according to the pre-treatment time with L-NAME. There was no difference between EO-Ro and EO-Ro/β-CD There was no significant difference between OE-Ro and OE-Ro/β-CD, but it should be noted that OE-Ro content in the inclusion complex was lower. It is concluded that OE-Ro has antihypertensive activity in both administration routes (i.v and v.o) and, and that β-CD improved its antihypertensive property by reducing the concentration of administered essential oil required to achieve the same effect on blood pressure.