AVALIAÇÃO DO EFEITO DE PROTEÍNA DO LÁTEX DE Plumeria pudica (JACQ., 1760) NA PERIODONTITE INDUZIDA POR LIGADURA EM RATOS

Abstract

RESUMO O látex de plantas é fonte de moléculas bioativas com potencial farmacológico, onde diversos estudo vem sendo realizados, dentre os quais se encontram o látex de Plumeria pudica. Proteínas encontradas no látex de P. pudica (PLPp) apresentaram atividade anti inflamatória e antinociceptiva em modelos animais quando administradas na dose de 40mg/kg via intraperitoneal (i. p.), além de ser verificado sua baixa toxicidade em nível sistêmico. A periodontite caracteriza se pelo acúmulo de biofilme nos tecidos orais, é uma doença global, tendo destaque como agravo à saúde pública. Sua relação vai além dos tecidos que afeta, dita como sistêmica, é capaz de relacionar se com outras patologias. Diante dos resultados atualmente descritos, referentes ao potencial farmacológico de PLPp e aos agravos produzido direta ou indiretamente pelos efeitos da periodontite, objetivou se, avaliar os efeitos de PLPp, na periodontite induzida por ligadura em ratos. Os animais foram divididos em três grupos: grupo controle negativo (n=9), grupo periodontite (n=10) e grupo PLPp (n=8), onde os animais sofreram indução da periodontite e foram tratados com PLPp na dose de 40mg/kg. A periodontite experimental foi induzida a partir de ligadura por fio de nylon 3.0, colocado entre a região mesial e distal do primeiro molar inferior, em ambos os lados. Os animais permaneceram 20 dias com a ligadura, foram realizados tratamentos diários dos mesmos com PLPp, via i. p. Após os 20 dias, foi realizada avaliação clínica macroscópica para Índice de Sangramento Gengival (ISG) e Índice de Profundidade de Sondagem (IPS), para parâmetros inflamatórios. Coletou se amostras de sangue através do plexo retro orbital de cada animal, parte do sangue foi coletado na presença de EDTA, destinando se a contagem total de leucócitos, e outra parte sem anticoagulante, para análise de marcadores de lesão hepática de aminotransferases (ALT e AST) e renal (creatinina e ureia) e alguns outros biomarcadores (ácido úrico, albumina, cálcio, colesterol total, HDL, fostatase alcalina e proteínas totais). Os animais foram eutanasiados, retirados fígado e rim, para avaliação sistêmica de prováveis alterações relacionadas com a periodontite em ambos os órgãos, a partir dos níveis de GSH, concentrações de MDA e atividade de MPO. As mandíbulas foram analisadas morfometricamente para avaliação da perda de Altura Óssea Alveolar (AOA). Tecido gengival e hepático foram utilizados para mensurar atividade de MPO. Como resultados, em análises macroscópicas nos animais tratados, houve redução de parâmetros inflamatórios avaliados, demonstrando redução de ISG e IPS quando comparado ao grupo indução sem tratamento. Houve redução na AOA de animais tratados com PLPp e também foi vista redução na contagem total de leucócitos no sangue de animais tratados em contrates com o grupo periodontite. Em relação ao peso dos animais não foi notada diferença significante entre grupos. Foi vista diminuição significativa da atividade de MPO apenas no tecido gengival de animais tratados. No tecido hepático, níveis de GSH e MDA foram preservados próximos a normalidade em animais tratados com PLP, o mesmo não foi visto para o tecido renal. Em análises bioquímicas de marcadores hepáticos apenas ALT apresentou se próximo a normalidade, o mesmo pode ser visto para creatinina com relação a marcador renal, quando comparados ao grupo saudável. PLPp reduziu parâmetros inflamatórios e a perda óssea alveolar, além de conservar o padrão de alguns biomarcadores, contudo, estudos mais aprofundados utilizando a fração devem ser conduzidos, para melhor entendimento de seu mecanismo.

ABSTRACT The latex of plants is a source of bioactive molecules with pharmacological potential, where several studies have been carried out, among which are Plumeria pudica latex. Proteins found in latex of P. Pudica (LPPp) showed anti inflammatory and antinociceptive activity in animal models when administered at a dose of 40 mg / kg intraperitoneally (i.p.), in addition to being verified its low toxicity at a systemic level. The periodontitis is characterized by the accumulation of biofilm in oral tissues, it is a global disease, being highlighted as an aggravation to public health. Its relation goes beyond the tissues it affects, said as systemic, it is able to relate to other pathologies. In view of the currently described results, concerning the pharmacological potential of LPPp and the damages directly or indirectly produced by the effects of periodontitis, the objective was to evaluate the effects of LPPp on the periodontitis induced by ligation in rats. The animals were divided into three groups: negative control group (n = 9), periodontitis group (n = 10) and LPPp group (n = 8), where animals were induction of periodontitis and treated with LPPp at a dose of 40mg / kg. Experimental periodontitis was induced from nylon 3.0 ligation, placed between the mesial and distal region of the first lower molar, on both sides. The animals remained 20 days with the ligation, daily treatments of the same were carried out with LPPp, via i. p. After 20 days, a macroscopic clinical evaluation was performed for Gingival Bleeding Index (GBI) and Probing Pocket Depth (PPD) for inflammatory parameters. Blood samples were collected through the retro orbital plexus of each animal, part of the blood was collected in the presence of EDTA, for total leukocyte counts, and another part without anticoagulant, for the analysis of biomarkers of hepatic aminotransferase injury (ALT and AST) and renal (creatinine and urea) and some other biomarkers (uric acid, albumin, calcium, total cholesterol, HDL, alkaline phosphatase and total proteins). The animals were euthanized, removed liver and kidney, for systemic evaluation of probable changes related to periodontitis in both organs, from GSH levels, MDA concentrations and MPO activity. Jaws were analyzed morphometrically for evaluation of Alveolar Bone Height (ABH) loss. Gingival and hepatic tissue were used to measure MPO activity. As results, in macroscopic analyzes in the treated animals, there was reduction of inflammatory parameters evaluated, demonstrating reduction of ISG and IPS when compared to the induction group without treatment. There was a reduction in the AOA of LPPp treated animals and a reduction in the total leukocyte count in the blood of treated animals contracted with the periodontitis group was also seen. Regarding the weight of the animals, no significant difference was observed between groups. Significant decrease in MPO activity was seen only in the gingival tissue of treated animals. In hepatic tissue, levels of GSH and MDA were preserved close to normal in LPPp treated animals, the same was not seen for renal tissue. In biochemical analyzes of hepatic markers only ALT was close to normal, the same can be seen for creatinine in relation to renal marker, when compared to the healthy group. LPPp reduced inflammatory parameters and alveolar bone loss, in addition to maintaining the pattern of some biomarkers, however, further studies using the fraction should be conducted for a better understanding of its mechanism.