DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE FORMULAÇÕES TRANSDÉRMICAS CONTENDO γ-TERPINENO COM ATIVIDADE ANTINOCICEPTIVA EM MODELO ANIMAL DE DOR NEUROPÁTICA

Abstract

RESUMO: A dor é um dos mecanismos adaptativos e protetores mais importantes do corpo, englobando os estágios de transdução, transmissão, percepção e modulação. Especificamente para a dor neuropática, são utilizados fármacos comumente associados a efeitos adversos e tolerância. Diante disso, os produtos naturais como óleos essenciais e seus constituintes, representam alternativas promissoras para o tratamento dessa patologia. Da mesma forma, sistemas microemulsionados para liberação sistêmica de substâncias lipofílicas vêm ganhado destaque no campo da biotecnologia farmacêutica, principalmente quando administrados por via transdérmica. Assim, o presente estudo tem como objetivo desenvolver sistemas micromeulsionados contendo γ-terpineno e investigar seu potencial toxicológico e antinociceptivo, por via transdérmica, em modelo animal de dor neuropática. Para a preparação das formulações microemulsionadas foi utilizado um diagrama de fases pseudo-ternário (DFPT) contendo labrasol©, plurol©, miristato de isopopila, γ-terpineno e água. O DFPT mostrou a formação de 15 microemulsões (MEs), das quais foram selecionadas quatro para caracterização e testes de estabilidade termodinâmica. As formulações apresentaram uma taxa de liberação cumulativa acima de 37%, em 24h, revelando um perfil de liberação controlada. As MEs selecionadas para análise foram classificadas como sistemas isotrópicos de óleo em água (condutividade = 9,56 ± 0,01 μS/cm), com gotículas na faixa nanométrica (124,4 ± 243,7 nm), índice de polidispersão entre 0,235 e 0,315 e potencial zeta variando entre -28,1 e -55,1. Foi evidenciado que maiores quantidades de fase oleosa produziram formulações com maior estabilidade termodinâmica. Assim, a partir desse estudo foram desenvolvidos sistemas microemulsionados promissores para a liberação controlada de γ-terpineno dos quais dois (F1 e F2) foram submetidos a avaliações de toxicidade e potencial antinociceptivo em camundongos. As formulações transdérmicas na dose de 2000 mg/kg não demonstraram nenhum sinal de toxicidade clínica-comportamental durante 14 dias de avaliação. Foi observado aumento significativo no limiar de retirada da pata na dose de 200 mg/kg das formulações F1 e F2, aos 60 e 120 min após a administração, evidenciando a ação antinociceptiva das formulações. Na avaliação de sensibilidade térmica F2 também mostrou ação antinociceptiva aos 60 min. Em animais submetidos ao tratamento sub-agudo, em protocolo de co-tratamento, ambas as formulações resultaram em aumento do limiar de retirada da pata a partir do 6º dia de tratamento, com exceção do 8º dia, nas doses de 200 mg/kg (F1 e F2) e 400 mg/kg (F2). Já no pós-tratamento, os animais tratados com F1 (100 e 200 mg/kg) a partir do 5º dia de tratamento, F1 (400 mg/kg) e F2 (100 mg/kg) a partir do 7º dia de tratamento e F2 (200 mg/kg) no último dia de tratamento, apresentaram redução do limiar nociceptivo mecânico. Além disso, houve aumento do escore de sensibilidade ao frio em animais tratados com F2 (200 mg/kg) a partir do 7º dia de tratamento e F2 (400 mg/kg) no último dia de tratamento. Assim, pode-se concluir que as formulações microemulsionadas contendo γ-terpineno, apresentaram atividade antinociceptiva, com efeito terapêutico em administrações agudas e crônicas. ABSTRACT: Pain is one of the body's most important adaptive and protective mechanisms, encompassing the stages of transduction, transmission, perception and modulation. Specifically for neuropathic pain, drugs commonly associated with adverse effects and tolerance are used. Therefore, natural products such as essential oils and their constituents represent promising alternatives for the treatment of this pathology. In the same way, microemulsion systems for systemic release of lipophilic substances have been highlighted in the field of pharmaceutical biotechnology, especially when administered transdermally. Thus, the present study aims to develop micromeulsed systems containing γ-terpinene and to investigate its toxicological and antinociceptive potential, transdermally, in an animal model of neuropathic pain. For the preparation of the microemulsion formulations a pseudo-ternary phase diagram (DFPT) containing labrasol ®, plurol ©, isopopyl myristate, γ-terpinene and water was used. DFPT showed the formation of 15 microemulsions (MEs), of which four were selected for characterization and tests of thermodynamic stability. The formulations had a cumulative release rate above 37% in 24 hours, revealing a controlled release profile. The MSs selected for analysis were classified as isotropic oil-in-water systems (conductivity = 9.56 ± 0.01 μS / cm), with droplets in the nanometric range (124.4 ± 243.7 nm), polydispersity index between 0.235 and 0.315 and zeta potential ranging from -28.1 to -55.1. It was evidenced that higher amounts of oil phase produced formulations with greater thermodynamic stability. Thus, promising microemulsion systems for the controlled release of γ-terpinene were developed from which two (F1 and F2) were submitted to toxicity and antinociceptive potential evaluations in mice. Transdermal formulations at the dose of 2000 mg / kg showed no sign of clinical behavioral toxicity during 14 days of evaluation. A significant increase in the paw withdrawal threshold was observed at the dose of 200 mg / kg formulations F1 and F2 at 60 and 120 min after administration, evidencing the antinociceptive action of the formulations. In the evaluation of thermal sensitivity F2 also showed antinociceptive action at 60 min. In animals submitted to sub-acute treatment in a co-treatment protocol, both formulations resulted in an increase in the paw withdrawal threshold from the 6th day of treatment, except for the 8th day, at doses of 200 mg / kg ( F1 and F2) and 400 mg / kg (F2). In the posttreatment, F1-treated animals (100 and 200 mg / kg) from the 5th day of treatment, F1 (400 mg / kg) and F2 (100 mg / kg) from the 7th day of treatment F2 (200 mg / kg) on the last day of treatment, presented mechanical nociceptive threshold reduction. In addition, there was an increase in the cold sensitivity score in animals treated with F2 (200 mg / kg) from the 7th day of treatment and F2 (400 mg / kg) on the last day of treatment. Thus, it can be concluded that the microemulsion formulations containing γ-terpinene, presented antinociceptive activity, with therapeutic effect in acute and chronic administrations.