PREVALÊNCIA E INFLUÊNCIA DOS POLIMORFISMOS - 819 C/T (RS1800871) E -1082 A/G (RS1800896) DO GENE IL-10 NA DENGUE SINTOMÁTICA EM UMA POPULAÇÃO DO NORDESTE DO BRASIL

Abstract

RESUMO: A dengue é a infecção transmitida por vetor artrópode mais prevalente no mundo. A patologia é atualmente classificada em dengue sem sinais de alarme (DSSA), dengue com sinais de alarme (DCSA) e dengue severa (DS). A variedade de manifestações clínicas resulta da sua complexa patogênese, que apresenta influência de fatores virais, ambientais e do hospedeiro. A interleucina 10 (IL-10) é uma citocina anti-inflamatória envolvida com a resposta imune do hospedeiro durante o curso da dengue. Polimorfismos de Nucleotídeo Único (SNPs) descritos para o seu gene codificante, tais como -819 C/T (rs1800871) e -1082 A/G (rs1800896), têm exibido diferentes perfis de associação com a doença na literatura. Considerando a heterogeneidade desses achados, o presente estudo objetivou investigar a prevalência e a influência dos polimorfismos em indivíduos sintomáticos, assintomáticos e controles para dengue na população de Parnaíba-PI, relacionando-os com o desenvolvimento das formas clínicas da doença. Os polimorfismos foram investigados por Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR). As frequências genotípicas foram testadas quanto ao equilíbrio de Hardy-Weinberg. A associação com a dengue foi estimada pelo Teste do Qui-quadrado (x²) ou Teste Exato de Fisher e Odds Ratio. A análise dos dados foi realizada no BioEstat 5.0, sendo adotado um nível de significância de p<0,05. As análises haplotípicas e do desequilíbrio de ligação foram executadas no Haploview 4.2. As frequências genotípicas e alélicas do SNP -819 C/T não mostraram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos estudados. Ao analisar o SNP -1082 A/G observou-se significância estatística apenas em relação ao grupo assintomático. O genótipo A/G foi associado com susceptibilidade à dengue (p= 0,01, OR= 2,17), à DSSA (p= 0,02, OR= 2,13) e à DCSA (p= 0,03, OR= 2,34). O genótipo G/G foi associado com susceptibilidade à dengue (p= 0,01, OR= 3,98) e à DCSA (p= 0,02, OR= 4,90). A combinação de genótipos A/G + G/G foi associada com susceptibilidade à dengue (p= 0,002, OR= 2,37), à DSSA (p= 0,01, OR= 2,23) e à DCSA (p= 0,01, OR= 2,63). Todas as frequências genotípicas se encontraram em equilíbrio de Hardy-Weinberg. O alelo G foi associado com susceptibilidade à dengue (p= 0,002, OR= 1,96), à DSSA (p= 0,01, OR= 1,81) e à DCSA (p= 0,006, OR= 2,14). Nas análises haplotípicas do gene IL-10, o haplótipo C-G foi associado com a dengue (p= 0,0031), a DSSA (p= 0,0195) e a DCSA (p= 0,0045) também em relação ao grupo assintomático, enquanto que o haplótipo C-A foi associado com a dengue assintomática (p= 0,0265) em relação ao grupo DCSA. A análise do desequilíbrio de ligação evidenciou forte desequilíbrio entre os SNPs do gene IL-10. Com relação a modulação das manifestações clínicas da dengue, apenas os portadores T do SNP -819 C/T apresentaram associação significativa de susceptibilidade à cefaleia (p*= 0,0264) e de proteção contra edemas (p*= 0,0323) e calafrios (p*= 0,0478). A frequência dos alelos T e G dos respectivos SNPs -819 C/T e -1082 A/G deste estudo diferiu significativamente da encontrada em algumas populações do mundo. Em síntese, os dados desta pesquisa sugerem uma possível influência do SNP rs1800896 sobre o fenótipo da dengue sintomática em uma amostra populacional da Região Nordeste do Brasil, sendo encontrado panorama semelhante quando este foi combinado com o SNP rs1800871, corroborando as evidências da literatura acerca do efeito aditivo de polimorfismos. ABSTRACT: Dengue is the most prevalent arthropod vector-borne infection in the world. The pathology is currently classified as dengue without warning signs (DSSA), dengue with warning signs (DCSA) and severe dengue (DS). The variety of clinical manifestations results from its complex pathogenesis, which is influenced by viral, environmental and host factors. Interleukin 10 (IL-10) is an anti-inflammatory cytokine involved with the immune response of the host during the course of dengue. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) described for their coding gene, such as -819 C/T (rs1800871) and -1082 A/G (rs1800896), have exhibited different profiles of association with the disease in the literature. Considering the heterogeneity of these findings, the present study aimed to investigate the prevalence and influence of polymorphisms in symptomatic, asymptomatic and dengue control individuals of Parnaíba-PI population, relating them to the development of clinical forms of the disease. SNPs were investigated by Real-Time Polymerase Chain Reaction (qPCR). Genotypic frequencies were tested for Hardy-Weinberg equilibrium. The association with dengue was estimated by the Chi-square Test (x²) or Fisher's Exact Test and Odds Ratio. Data analysis was performed in BioEstat 5.0, and a significance level of p<0.05 was adopted. The haplotype and linkage disequilibrium analyzes were performed in Haploview 4.2. The genotypic and allelic frequencies of the -819 C/T SNP did not show statistically significant differences between the studied groups. When analyzing -1082 A/G SNP, statistical significance was only observed in relation to the asymptomatic group. The A/G genotype was associated with susceptibility to dengue (p= 0,01, OR= 2,17), DSSA (p= 0,02, OR= 2,13) and DCSA (p= 0,03, OR= 2,34). The G/G genotype was associated with susceptibility to dengue (p= 0,01, OR= 3,98) and DCSA (p= 0,01, OR= 2,63). The combination of A/G + G/G genotypes was associated with susceptibility to dengue (p= 0,002, OR= 2,37), DSSA (p= 0,01, OR= 2,23), and DCSA (p= 0.01, OR= 2.63). All genotypic frequencies were found in Hardy-Weinberg equilibrium. The G allele was associated with susceptibility to dengue (p= 0,002, OR= 1,96), DSSA (p= 0,01, OR= 1,81) and DCSA (p= 0,006, OR= 2,14). In the haplotypic analyzes of the IL-10 gene, C-G haplotype was associated with dengue (p= 0.0031), DSSA (p= 0.0195) and DCSA (p= 0.0045) also in relation to the asymptomatic group, whereas C-A haplotype was associated with asymptomatic dengue (p= 0.0265) in relation to the DCSA group. The analysis of the binding disequilibrium demostrated a strong imbalance between the SNPs of the IL-10 gene. Regarding to modulation of the clinical manifestations of dengue, only the T-carriers of the -819 C/T SNP had significant association of susceptibility to headache (p*= 0.0264) and protection against edema (p*= 0.0323) and chills (p*= 0.0478). The frequency of the T and G alleles of the respective SNPs -819 C/T and -1082 A/G of this study differed significantly from that found in some populations of the world. In summary, data from this research suggest a possible influence of the SNP rs1800896 on phenotype of symptomatic dengue in a population sample from the Northeast Region of Brazil. A similar scenario was found when this was combined with the SNP rs1800871, corroborating the literature evidence about the additive effect of polymorphisms.