USO DA POLPA DESIDRATADA DO FRUTO DE MAURITIA FLEXUOSA COMO SUPLEMENTO AO DILUENTE DE CONGELAÇÃO DO SÊMEN CAPRINO

Abstract

RESUMO: Objetivou-se avaliar a qualidade in vitro do sêmen caprino utilizando diluente a base da polpa do fruto de Mauritia flexuosa. Para isso o extrato bruto da polpa do fruto de Mauritia flexuosa foi diluído em solução tampão em diferentes concentrações (0,25%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9% 1%, 2%, 3%, 4%, 5% e 10%) e foram avaliados pH e osmolaridade a 37 °C e após 24 horas de estocagem a 3 °C. Foram utilizados 3 caprinos, com idade média de 6 anos, clinicamente saudáveis. Foram utilizados 30 pools de sêmen dos 3 bodes. A coleta do sêmen foi realizada com auxílio de uma vagina artificial específica para pequenos ruminantes, pré-aquecida (± 39°C) e acoplada a um tubo coletor graduado. O experimento foi realizado em duas fases. Sendo a primeira realizada o teste de toxicicidade in vitro no total de 15 pools, sendo 15 coletas por animal. Os pools foram avaliados com a adição de 0,25%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9% 1%, 2%, 3%, 4%, 5% e 10% do diluente a base do extrato bruto da polpa do fruto de Mauritia flexuosa e avaliados os parâmetros espermáticos. Na segunda fase foram utilizados mais 15 pools de sêmen, que posteriormente foram diluídos em Tris-gema-glicerol GC e tris-glicerol contendo as melhores concentrações do extrato bruto da polpa do fruto de Mauritia flexuosa. As amostras foram submetidas a rampa de criopreservação com auxílio do aparelho Tk 3000®. Posteriormente, as palhetas foram imersas em nitrogênio líquido (-196°C) e armazenadas em botijões criogênicos. Após a descongelação as amostras foram avaliadas no sistema CASA quanto os parâmetros de motilidade total (MT), velocidade curvilinear (VCL), velocidade linear (VSL), velocidade de percurso (VAP), linearidade (LIN), retilinearidade (STR), deslocamento lateral de cabeça (ALH), frequência de batimento cruzado (BCF), índice de oscilação (WOB) e morfologia espermática pelo método de panótico rápido, atividade mitocondrial e integridade de membrana. A análise estatística dos dados foi realizada pelo PROC GLM do software SAS® e quando verificada significância (p<0,05) procedeu-se o teste de Tukey. Na primeira etapa os grupos contendo baixa quantidade de extrato foram estatisticamente iguais ao grupo controle (p>0,05). Já na segunda etapa, após descongelação os grupos contendo tris-2,5%gema ou não, foi observado diferença estatística entre os grupos testados nos parâmetros de VCL, VSL, VAP, LIN, STR, ALH, BCF, WOB (p<0,05). Ademais pode se constatar que o extrato de origem vegetal atuou de forma benéfica adicionado ao diluente Tris-2,5% gema ou isento no sêmen caprino. A polpa desidratada do fruto de Mauritia flexuosa adicionado no diluente tris-2,5% gema ou não em baixas concentrações permitiu a manutenção da viabilidade espermática no processamento/criopreservação no pool do sêmen caprino, podendo ser uma alternativa viável para aplicação a campo. ABSTRACT: The objective was to evaluate the in vitro quality of goat semen using diluent based on the fruit pulp of Mauritia flexuosa. For this purpose, crude extract of Mauritia flexuosa fruit pulp was diluted in buffer solution at different concentrations (0.25%, 0.5%, 0.6%, 0.7%, 0.8%, 0.9% 1%, 2%, 3%, 4%, 5% and 10%) and pH and osmolarity were evaluated at 37 ° C and after 24 hours of storage at 3 ° C. Three goats, with a mean age of 6 years, were used clinically healthy. We used 30 pools of semen from the 3 goats. Semen collection was performed using a specific artificial vagina for small ruminants, preheated (± 39 ° C) and coupled to a graduated collection tube. The experiment was carried out in two phases. The first was the in vitro toxicity test in a total of 15 pools, 15 of which were collected per animal. The pools were evaluated with the addition of 0.25%, 0.5%, 0.6%, 0.7%, 0.8%, 0.9% 1%, 2%, 3%, 4%, 5 % and 10% of the diluent based on the crude extract of the fruit pulp of Mauritia flexuosa and evaluated the spermatic parameters. In the second phase, a further 15 semen pools were used, which were later diluted in Tris-gem-glycerol GC and tris-glycerol containing the best concentrations of the crude extract of the pulp of the Mauritia flexuosa fruit. The samples were submitted to a cryopreservation ramp using the Tk 3000® device. Subsequently, the vanes were immersed in liquid nitrogen (-196 ° C) and stored in cryogenic cylinders. After thawing the samples were evaluated in the CASA system for the parameters of total motility (MT), curvilinear velocity (VCL), linear velocity (VSL), speed of travel (VAP), linearity (LIN), rectilinearity (STR), displacement (ALH), cross-beat frequency (BCF), oscillation index (WOB), and rapid panoptic sperm morphology, mitochondrial activity and membrane integrity. Statistical analysis of the data was performed by PROC GLM of the SAS® software and when the significance was verified (p <0.05) the Tukey test was performed. In the first stage the groups containing low amount of extract were statistically equal to the control group (p> 0.05). In the second stage, after thawing the groups containing tris-2,5% yolk or not, a statistical difference was observed between the groups tested in VCL, VSL, VAP, LIN, STR, ALH, BCF, WOB (p <0), 05). In addition it can be verified that the extract of plant origin acted in a beneficial way added to the diluent Tris-2,5% yolk or exempt in goat semen. The dehydrated pulp of Mauritia flexuosa fruit pulp added in the tris-2,5% yolk diluent or not at low concentrations allowed the maintenance of the sperm viability in the cryopreservation process in the goat semen pool and could be a viable alternative for field application.