PREVALÊNCIA E INFLUÊNCIA DOS POLIMORFISMOS -336 A/G (RS4804803) NO GENE DC-SIGN E -174 G/C (RS1800795) NO GENE IL-6, NA INFECÇÃO POR DENGUE VIRUS EM UMA POPULAÇÃO DO ESTADO DO PIAUÍ

Abstract

RESUMO: A dengue é considerada a arbovirose mais frequente dentre as que acometem o ser humano, sendo endêmica em países tropicais e subtropicais. A doença é causada pelo Dengue virus (DENV), membro da família Flaviviridae apresentando a fêmea do mosquito Aedes aegypti como principal vetor de transmissão. A variedade de fatores relacionados ao vírus, ao ambiente e ao hospedeiro reflete na diversidade das manifestações clínicas da dengue. Vários estudos apontam que polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) em genes de moléculas relacionadas à imunidade da dengue podem estar envolvidas com a susceptibilidade e/ou proteção à doença. O objetivo do presente estudo foi investigar a prevalência e a influência dos polimorfismos -336 A/G (rs4804803) no gene DC-SIGN e -174 G/C (rs1800795) no gene IL-6 em pacientes sintomáticos e assintomáticos infectados pelo DENV, e em indivíduos controles. Trata-se de um estudo do tipo caso-controle, de caráter qualitativo e com abordagem exploratória. Os dados foram obtidos através de coletas feitas em pacientes atendidos em órgãos públicos de saúde, em Parnaíba-PI no período de Agosto de 2016 a Dezembro de 2017. A confirmação laboratorial dos casos suspeitos de dengue foi feita por meio de testes imunocromatográficos e metodologias moleculares (RT-PCR). O DNA genômico celular foi extraído e realizada a genotipagem para os SNPs, através de PCR em Tempo Real. Os dados foram analisados através do programa BioEstat 5.0, com um nível de significância de p<0,05. As análises das frequências alélicas e genotípicas para o SNP -336 A/G no gene DC-SIGN não mostraram resultados com diferenças estatisticamente significativas. Com relação a prevalência das manifestações clínicas, o sintoma Diarreia se apresentou mais frequente nos portadores do alelo G com diferença estatisticamente significativa. As análises das frequências alélicas e genotípicas para o SNP -174 G/C no gene IL-6 entre os grupos mostraram que a frequência do genótipo G/C foi estatisticamente maior no grupo controle (41,2%) que no grupo dengue (DEN), com 26,5%. Foi significativamente mais frequente no grupo controle (41,2%) em relação ao grupo Dengue sem sinais de alarme (DSSA), com 24,7%. A associação dos genótipos G/C + C/C teve maior frequência no grupo controle (46,5%) quando comparado ao grupo DEN com 30,8%. E ainda apresentaram maior frequência no grupo controle, com 46,5%, em relação ao grupo DSSA (28,8%). As análises das frequências alélicas revelaram que o alelo C teve frequência significativamente maior no grupo controle (26%), quando comparado ao grupo DEN com 17,5% e ao grupo DSSA, com 16,4%. O alelo C também apresentou frequência maior no grupo assintomático (25,9%) em relação ao grupo DEN, com 17,5%, e em relação ao grupo DSSA com significância. Nas análises da prevalência das manifestações clínicas, a manifestação clínica Náuseas foi mais frequente em não portadores C, com diferença estatisticamente significativa. A frequência do alelo G para o SNP -336 A/G do gene DC-SIGN na população piauiense foi de 18,8%. O alelo C do SNP -174 G/C no gene IL-6 teve frequência de 26% nesta população. Nossos dados sugerem que o genótipo G/C e o alelo C do SNP -174 G/C no gene IL-6 estão relacionados com proteção para os casos de dengue na população estudada. Estes dados contribuem para um melhor entendimento da patogênese do Dengue virus e de fatores genéticos relacionados ao hospedeiro com a doença. Podendo assim, trazer benefícios para o paciente, no que diz respeito ao manejo clínico da doença. ABSTRACT: Dengue is considered the most frequent arboviral desease which affects humans, it is endemic in tropical and subtropical countries. The disease is caused by Dengue virus (DENV), a member of the Flaviviridae family, which presents the female Aedes aegypti as the main vector of transmission. The variety of factors related to the virus, the environment and the host reflects on the diversity of clinical manifestations of dengue. Several studies have pointed out that single nucleotide polymorphisms (SNPs) in genes of molecules related to dengue immunity may be involved in the susceptibility and / or protection of the disease. The aim of the present study was to investigate the prevalence and the influence of the -336 A/ G polymorphisms (rs4804803) on the DC-SIGN gene and -174 G / C (rs1800795) on the IL-6 gene in symptomatic and asymptomatic patients infected by DENV, and in control subjects. This is a case-control study of a qualitative nature with an exploratory approach. Data were obtained through collections made in patients attended at public health agencies in Parnaíba-PI from August 2016 to December 2017. The laboratory confirmation of suspected dengue cases was done through immunochromatographic tests and molecular methodologies (RT-PCR). Cell genomic DNA was extracted and genotyped for SNPs through Real-Time PCR. The data were analyzed through the BioEstat 5.0 program, with a significance level of p <0.05. The analysis of the allelic and genotype frequencies for the 336 A/G SNP in the DC-SIGN gene did not show results with statistically significant differences. Regarding the prevalence of clinical manifestations, the Diarrhea symptom was more frequent in patients with the G allele with a statistically significant difference. The analysis of allele and genotype frequencies for SNP-174 G/C in the IL-6 gene between the groups showed that the G/C genotype frequency was statistically higher in the control group (41.2%) than in the dengue group (DEN), with 26.5%. TheThe G/C genotype was also significantly more frequent in the control group (41.2%) than in the Dengue group with no warning signs (24.7%). The association of G/C + C/C genotypes had a higher frequency in the control group (46.5%) when compared to the DEN group with 30.8%. They also presented higher frequency in the control group, with 46.5%, compared to the DSSA group (28.8%). Allele frequencies analysis revealed that the C allele had a significantly higher frequency in the control group (26%), when compared to the DEN group with 17.5% and the DSSA group, with 16.4%. The C allele also had a higher frequency in the asymptomatic group (25.9%) in relation to the DEN group, with 17.5%, and in relation to the DSSA group, with a significant frequency. In the analysis of the prevalence of clinical manifestations, the clinical manifestation Nausea was more frequent in non-C carriers, with a statistically significant difference. The frequency of the G-allele for the SNP-336 A / G of the DC-SIGN gene in the Piauí population was 18.8%. The C allele of the SNP-174 G / C in the IL-6 gene had a frequency of 26% in this population. Our data suggest that the G/C genotype and the C-allele of the SNP -174 G / C in the IL-6 gene are related to protection for dengue cases in the study population. These data contribute to a better understanding of Dengue virus pathogenesis and genetic factors related to the host disease. Thus, it can bring benefits to the patient, regarding the clinical management of the disease.