EFEITO PROTETOR DE PROTEÍNAS DO LÁTEX DE PLUMERIA PUDICA (JACQ., 1760) NA COLITE INDUZIDA POR ÁCIDO ACÉTICO

Abstract

RESUMO: Estudos recentes demonstraram que uma fração proteica obtida a partir de látex de P. pudica (PLPp) possui efeitos anti-inflamatórios, antinociceptivos e antidiarreicos. A colite ulcerativa é uma doença de origem inflamatória que afeta a mucosa e a submucosa do cólon e do reto, caracterizada por úlceras na mucosa intestinal. Assim, com base em propriedades farmacológicas detectadas em PLPp, este estudo tem por objetivo avaliar o efeito protetor desta fração proteica na colite induzida por ácido acético em camundongos. Métodos: Camundongos machos (Mus musculus, 25-30g) foram divididos em 5 grupos: grupo ácido acético (AA), grupo salina (SAL) e grupos PLPp 10, 20 e 40 mg/kg, cada um com 5-7 animais. Em seguida, foram deixados em jejum por 16h antes do experimento. Ao final das 16hs, os animais dos grupos AA, PLPp 10, 20 e 40mg/kg, receberam via transretal 200 μl de solução de ácido acético a 6%, para a indução da colite, e o grupo SAL, recebeu 200μl de solução salina 0,9%. Os animais foram tratados com PLPp (10, 20 ou 40 mg/kg i.p.) 1 hora antes e 17 horas após a injeção de ácido acético. Uma hora depois do segundo tratamento com PLPp, os animais foram eutanasiados e a porção do cólon distal foi retirada para avaliação de escores macroscópicos e microscópicos de lesão, análise de peso úmido, atividade da mieloperoxidase (MPO), níveis de glutationa (GSH), concentração de malonialdeído (MDA) e níveis de IL-1β. Resultados: O tratamento dos animais com PLPp 40mg/kg diminui de forma significativa o peso úmido do cólon dos animais quando comparado ao grupo AA, no entanto, PLPp 10 e 20mg/kg não foram capazes. Apenas PLPp 40 mg/kg foi capaz de reduzir significativamente os escores macroscópicos e de lesão quando comparados com os animais que receberam apenas AA. Na análise microscópica, PLPp 40mg/kg reduziu de forma significativa os escores totais de lesão, quando comparado com o grupo AA. Além disso, as diferentes doses de PLPp também foram capazes de reduzir significativamente a atividade MPO em comparação com o grupo AA. Entre as doses de PLPp, apenas a dose de 40mg/kg foi capaz de promover uma redução significativa nos níveis de MDA e evitar o consumo de GSH de modo significativo, quando comparado ao grupo não tratado. Também foi observado que PLPp 40mg/kg reduziu os níveis da citocina IL-1β no cólon dos animais. Conclusões: Estes resultados sugerem que PLPp apresentou efeito protetor contra danos intestinais induzidos pelo ácido acético, uma vez que houve redução da lesão macroscópica e microscópica e do peso úmido. PLPp também demonstrou potencial anti-inflamatório observados pela redução da atividade de MPO e da concentração de IL-1β, e antioxidante, pela redução dos níveis de MDA e consumo de GSH. ABSTRACT: Recent studies have shown that a protein fraction obtained from P. pudica latex (LPPp) has anti-inflammatory, antinociceptive and antidiarrheal effects. Ulcerative colitis is an inflammatory disease that affects the mucosa and submucosa of the colon and rectum, characterized by ulcers in the intestinal mucosa. Thus, based on pharmacological properties detected in LPPp, this study aims to evaluate the protective effect of this protein fraction on acetic acid-induced colitis in mice. Methods: Male mice (Mus musculus, 25-30g) were divided into 5 groups: acetic acid group (AA), saline group (SAL) and LPPp groups 10, 20 and 40 mg/kg, each with 5-7 animals. Then, they were fasted during 16 hours prior to the experiment. At the end of 16h, the animals of groups AA, LPPp 10, 20 and 40mg/kg received 200 μl of 6% acetic acid solution for the induction of colitis and the SAL group received 200μl of saline solution 0.9%. Animals were treated with LPPp (10, 20 or 40 mg/kg i.p.) 1 hour before and 17hours after acetic acid injection. One hour after second LPPp treatment, animals were euthanized and the distal portion of colon was excised for assessment of macroscopic and microscopic scores of lesion, wet weight analysis, myeloperoxidase (MPO) measurement, glutathione (GSH) levels, malonyldialdehyde (MDA) concentration and IL-1β levels. Results: The treatment of animals with LPPp 40 mg/kg significantly decreased the wet weight of the colon of the animals when compared to the AA group, however LPPp 10 and 20 mg/kg were not able. Only LPPp 40 mg/kg was able to significantly reduce macroscopic and lesion scores when compared to animals receiving only AA. In the microscopic analysis, LPPp 40mg/kg significantly reduce total lesion scories., when compared to the AA group. In addition, the different doses of LPPp were also able to significantly reduce MPO activity compared to the AA group. Among LPPp doses, only the 40mg/kg dose was able to promote a significant reduction in MDA levels and avoid GSH consumption significantly, when compared to the untreated group. It was also observed that LPPp 40mg/kg decreased levels of the cytokine IL-1β in the animals colon. Conclusions: These results suggest that LPPp presented a protective effect against intestinal damage induced by acetic acid, since macroscopic, microscopic and wet weight lesions were reduced. LPPp also demonstrated anti-inflammatory potential observed by the reduction of MPO activity and the concentration of IL-1β, and antioxidant, by the reduction of MDA levels and GSH consumption.