AVALIAÇÃO FITOQUÍMICA, ANTIMICROBIANA, ANTIOXIDANTE E CITOTÓXICA DE EXTRATOS DAS ALGAS HYPNEA PSEUDOMUSCIFORMIS, PADINA GYMNOSPORA E JANIA ADHAERENS

Abstract

RESUMO: O ambiente marinho se destaca pela diversidade de compostos valiosos, obtidos principalmente do metabolismo secundário das algas marinhas. Esses metabolitos secundários são oriundos principalmente de mecanismos de defesa e adaptações à condições ambientais. As leishmanioses e as doenças causadas por bactérias e fungos são uma preocupação mundial devido os constantes casos documentados de resistência aos agentes antimicrobianos empregados no seu combate, sendo assim o objetivo desse trabalho foi o de realizar uma investigação fitoquímica e avaliar a atividade das frações hidroalcoólica e hexânica das algas Hypnea pseudomusciformis, Padina gymnospora e Jania adhaerens quanto a seu potencial antileishmania, antibacteriano, antifúngico, antioxidante e citotoxico. O estudo fitoquimico foi realizado através de ensaios quimicos qualitativos e por cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE). A atividade antibacteriana foi determinada pelo método de difusão em ágar. O método colorimétrido da resazurina (7-hidroxi-3H-fenoxazina-3-ona-10-óxido) foi o adotado para atividade antileishmania. Para atividade antifúngica foi adotado o método de microdiluição em caldo. A atividade antioxidante foi determinada pelo método DPPH (1,1-diphenil-2-picrilhidrazil). Metodologia utilizando o reagente Folin-ciocalteau foi a empregada para a quantificação de fenóis e o ensaio de citotoxicidade foi determinado pelo método colorimétrico MTT [3(-(4,5-dimetil-2-tiazol) -2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazolium)]. Dentre as algas testadas a fração hidroalcoólica da alga vermelha Hypnea pseudomusciformis apresentou a menor concentração inibitória mínima para Candida krusei (CIM: 9,76 μg/mL), porém nenhuma atividade para Candida tropicalis, Aspergillus fumigatus e Trycophyton interdigitale foi observada. A fração hidroalcoólica de Jania adhaerens testada contra Candida krusei apresentou valor de CIM:39,06 μg/mL. Para o teste de difusão em ágar nenhuma fração das algas utilizadas no teste apresentou qualquer atividade na concentração testada (10 mg/mL) para Staphylococcus epidermidis e Escherichia coli. No ensaio antileishmania foi obtido (CI50: 396,8 μg/mL) para a fração hexânica de Hypnea pseudomusciformis. O ensaio antioxidante revelou que a fração hidroalcoólica de Hypnea pseudomusciformis apresentou o maior potencial antioxidante (CE50: 256,31 μg/mL) entre as algas testadas. A quantificação de fenóis revelou 18,48 e 12,13 mg de ac. gálico/g de amostra para a fração hidroalcoólica de Padina gymnospora e para a fração hexanica de Hypnea pseudomusciformis respectivamente. O teste de citotoxicidade revelou que nenhuma fração demonstrou ser citotóxica contra as linhagens de células cancerosas testadas. Neste estudo foi demonstrado que algas vermelhas Hypnea pseudomusciformis e Jania adhaerens demonstraram um bom desempenho no ensaio antifúngico e moderada atividade antioxidante e antileishmania, o que pode encorajar estudos mais profundos dessas espécies de algas para a busca de componentes terapêuticos para infecções causadas por Candida krusei e Leishmania amazonenses. ABSTRACT: The marine environment is distinguished by the diversity of valuable compounds, obtained mainly from the secondary metabolism of marine algae. These secondary metabolites come mainly from defense mechanisms and adaptations to environmental conditions. Leishmaniasis and diseases caused by bacteria and fungi are a worldwide concern due to the constant documented cases of resistance to antimicrobial agents used in their fight. Therefore, the objective of this work was to carry out a phytochemical investigation and to evaluate the antileishmanial, antibacterial, antifungic, antioxidant and citotoxic activity of the hydroalcoholic and hexanic fractions of the following algae: Hypnea pseudomusciformis, Padina gymnospora and Jania adhaerens. The phytochemical study was carried out through qualitative tests and by high performance liquid chromatography (HPLC). The antibacterial activity was determined by the agar diffusion method. The colorimetric method of resazurin (7-hydroxy-3H-phenoxazin-3-one-10-oxide) was adopted for antileishmania activity. For antifungal activity, the broth microdilution method was adopted. The antioxidant activity was determined by the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method. Methodology using Folin-ciocalteau reagent was used for the quantification of phenols and the cytotoxicity assay was determined by the colorimetric method MTT [3 (- (4,5-dimethyl-2-thiazole) -2,5-diphenyl-2- H-tetrazolium bromide)]. Among tested algae, the hydroalcoholic fraction of the red alga Hypnea pseudomusciformis showed the lowest inhibitory concentration for Candida krusei (MIC: 9.76 μg / mL), but no activity for Candida tropicalis, Aspergillus fumigatus and Trycophyton interdigitale was observed. The hydroalcoholic fraction of Jania adhaerens tested against Candida krusei showed a MIC value: 39.06 μg / mL. For the agar diffusion test no fraction of tested algae showed any activity at the concentration tested (10mg/mL) for Staphylococcus epidermidis and Escherichia coli. In the antileishmanial assay was obtained (IC50: 396.8 μg/mL) for the hexane fraction of Hypnea pseudomusciformis. The antioxidant assay revealed that the hydroalcoholic fraction of Hypnea pseudomusciformis presented the highest antioxidant potential (CE50: 256.31 μg/mL) among the tested algae. The quantification of phenols revealed 18.48 and 12.13 of mg GAE/g, for the hydroalcoholic fraction of Padina gymnospora and for the hexanic fraction of Hypnea pseudomusciformis respectively. The cytotoxicity test revealed that no fraction was cytotoxic against the tested cancer cell lines. In this study it was shown that red algae Hypnea pseudomusciformis and Jania adhaerens demonstrated a good performance in the antifungal assay and moderate antioxidant and antileishmanial activity which may encourage deeper studies of these algae species to search for therapeutic components for Candida krusei and L. amazonensis.