INFLUÊNCIA DA IDADE DA PLANTA NA COMPOSIÇÃO QUÍMICA E ATIVIDADES BIOLÓGICAS DO ÓLEO ESSENCIAL DE ERVA-BALEEIRA (VARRONIA CURASSAVICA JACQ.)

Abstract

RESUMO: A escolha da fitoterapia como opção de tratamento é crescente nos últimos anos e deriva principalmente dos efeitos adversos causados por fármacos sintéticos e pela preferência dos consumidores por tratamentos mais "alternativos". O primeiro fitomedicamento produzido no Brasil, o Acheflan®, tem como base o óleo essencial da espécie Varronia curassavica Jacq. e possui propriedade anti-inflamatória. A composição química de óleos essenciais de plantas aromáticas pode ser influenciada por fatores que podem agrupar-se em bióticos e abióticos, e dentre eles, a idade da planta tem se destacado como um dos aspectos que interferem na variação dos constituintes químicos e seus rendimentos. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi averiguar a influência que a idade da planta pode exercer nos constituintes químicos do óleo essencial de V. curassavica extraído em escala industrial e nas respostas das atividades antimicrobiana e citotóxica. No capítulo 1 dessa dissertação foi apresentada uma revisão de literatura explanando a importância das plantas medicinais para a manutenção da saúde do homem, dos óleos essenciais e seus respectivos métodos de extração, dos metabólitos secundários e a classe dos terpenos, além das principais características botânicas e farmacológicas da espécie estudada. No capítulo 2, foram apresentados os resultados experimentais, desde a coleta do material vegetal para a extração dos óleos essenciais até a sua caracterização e atividades biológicas. Além disso, como complemento ao trabalho, foi realizado um perfil anatômico da espécie cultivada no acesso do estudo. A composição química dos óleos foi obtida por Cromatografia Gasosa acoplada a espectrômetro de Massas (GC-MS). Como complemento a esta análise foi realizada uma análise estatística multivariada de componentes principais (ACP) e componentes hierárquicos (ACH). Os ensaios antimicrobianos foram realizados pelo método de determinação da concentração inibitória mínima (CIM). O ensaio de citotoxicidade foi determinado pelo método colorimétrico MTT (Brometo de (3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio)]. A análise macroscópica da espécie permitiu identificar que se trata de um arbusto, de 1,5 metros de altura, ramos cilíndricos, com presença de lenticelas e glândulas nos ramos jovens. Na análise microscópica foi possível verificar que a superfície adaxial da folha possui células epidérmicas irregulares, e variedade na quantidade de tipos de tricomas. Os principais constituintes do óleo essencial do estudo são o α-pineno, trans-cariofileno e alloaromadendreno. Os resultados obtidos da quantificação dos constituintes do óleo mostraram diferença significativa na sua composição quando extraído da planta em diferentes idades. A atividade antibacteriana apresentou uma concentração inibitória mínima (CIM) maior que 1000 μg/mL, enquanto a atividade antifúngica apresentou uma CIM de 1000 μg/mL. Ambas as atividades não sofreram alteração com a variável em questão. A resposta citotóxica foi diferente para os óleos essenciais extraídos em diferentes idades da planta, sendo o óleo extraído da planta mais jovem aquele que apresentou menor valor de concentração citotóxica média (CC50 igual a 47,99 μg/mL), sugerindo maior citotoxicidade. A ACP e ACH permitiram a diferenciação das amostras de acordo com suas respectivas substâncias de maior importância. A diferença na resposta citotóxica pode ter sido influenciada pela diferença de composição. ABSTRACT: Using herbal medicine as a treatment option is increasing in recent years and is mainly due to the adverse effects of synthetic drugs and the preference of consumers for more "alternative" treatments. The first phytomedication produced in Brazil, Acheflan®, is based on the essential oil of the species Varronia curassavica Jacq and has anti-inflammatory properties. The chemical composition of essential oils of aromatic plants can be influenced by factors that can be grouped in biotic and abiotic, and among them, the age of the plant has been highlighted as one of the aspects that interfere in the variation of chemical constituents and their yields. Thus, the objective of this study was to investigate the possible influence of the plant age on the chemical composition of the essential oil of V. curassavica extracted in industrial scale responses and the antimicrobial and cytotoxic activities. In chapter 1 of this dissertation a literature review was presented explaining the importance of medicinal plants for the maintenance of human health, essential oils and their respective extraction methods, secondary metabolites and the terpene class, as well as the main botanical and pharmacological characteristics of species studied. In Chapter 2, the experimental results were presented, from the collection of the vegetal material to the extraction of the essential oils until their characterization and biological activities. In addition, as an adjunct to the study, an anatomical profile of the species cultivated in the study access was performed. The chemical composition of the oils was obtained by Gas Chromatography coupled to Mass spectrometer (GC-MS). As a complement to this analysis, a multivariate statistical analysis of principal components (PCA) and hierarchical components (HCA) was performed. Microbiological assays were performed by the minimum inhibitory concentration (MIC) determination method. The cytotoxicity assay was determined by the colorimetric method MTT [3 (- (4,5-dimethyl-2-thiazole) -2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide)]. The macroscopic analysis of the species allowed us to identify that the species is a shrub, ca1,5 m high, with cylindrical branches, with lenticels, of glands in young branches. In the microscopic analysis it was possible to verify that the adaxial surface of the leaf has irregular epidermal cells, and variety in the number of types of trichomes. The main constituents of the study essential oil are α-pinene, trans-caryophyllene and alloaromadendrene. The results obtained from the quantification of the constituents of the oil showed a significant difference in their composition when extracted from the plant at different ages. The antibacterial activity had a minimum inhibitory concentration (MIC) greater than 1000 μg / mL, while antifungal activity had a MIC of 1000 μg / mL. Both activities did not change with the variable in question. The cytotoxic response was different for the essential oils extracted at different plant ages, the oil extracted from the younger plant being the one with the lowest mean cytotoxic concentration (CC50 equal to 47.99 μg/mL), suggesting a higher cytotoxicity. The PCA and HCA analysis allowed the differentiation of the samples according to their respective substances of major importance. The difference in cytotoxic response may have been influenced by the difference in composition.