EFEITO DO EXTRATO ETANÓLICO E DA SUA FRAÇÃO HIDROALCÓOLICA OBTIDOS DAS PARTES AÉREAS DE SIDA SANTAREMNENSIS H. MONTEIRO (MALVACEAE) SOBRE O SISTEMA CARDIOVASCULAR DE ROEDORES

Abstract

RESUMO: A espécie Sida santaremnensis H. Monteiro (Malvaceae) é um arbusto conhecido como “guaxuma” ou “vassourinha”. Estudo anterior demonstrou efeito vasorrelaxante do extrato etanólico (Ssan-EtOH) obtido das partes aéreas desta espécie em artéria mesentérica superior isolada de rato. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito do (Ssan-EtOH) e da fração hidroalcoólica (Ssan-HA) sobre o sistema cardiovascular de roedores. Foram utilizados ratos Wistar machos (250-300 g) e camundongos Swiss (25-30 g) todos provenientes do Biotério do NPPM. Os animais foram eutanasiados de acordo para Resolução 2012/CFMV e CEEA-UFPI 008/2012, a artéria mesentérica foi removida e limpa de tecido adiposo e seccionada em anéis (2-4 mm) que foram imersos em cubas para órgão isolado contendo solução de Tyrode (37ºC com 95% de O2 e 5% de CO2). Após estabilização por 1 hora os anéis foram pré-contraídos com fenilefrina (10μM) ou KCl 80mM e os registros de tensões isométrica foram obtidas através do software AQCAD 2.06. Na avaliação da atividade antioxidante foi utilizado homogenato de coração de camundongos. A atividade hipotensora foi verificada através de implantação de cateter de polietileno na arterial femoral e veia femoral esquerda através de procedimento cirúrgico sob anestesia. Os registros foram obtidos após 24 horas seguintes a este procedimento e foram obtidos através do sistema de aquisição (AQCAD 2.06). Os resultados demonstram que a Ssan-HA (0,1 a 750 μg/mL) promove efeito vasorrelaxante em preparações com endotélio vascular (pD2= 1,42 ± 0,04) pré-contraídas com fenilefrina. Este efeito foi atenuado após a remoção do endotélio (pD2 = 2,01 ± 0,05) e na presença de L-NAME 100 μM (pD2 = 1,84 ± 0,06* ou TEA 3 mM pD2 = 2,18 ± 0,05*). As concentrações crescentes (81, 243, 500 e 750 μg/mL) de Ssan-HA inibiram de maneira dependente de concentração as contrações induzidas por adição cumulativa de fenilefrina (10-9 – 10-5 M), (Emáx = 91,64 ± 2,27%, Emáx = 51,11 ± 6,32%, Emáx = 20,16 ± 2,15%, Emáx= 7,22 ± 0,01%, respectivamente), resposta semelhante a obtida por KCl (20 – 120 mM). Em anéis sem endotélio pré-contraídos com (KCl 80mM) Ssan-HA promoveu efeito vasorrelaxante (pD2 = 2,22 ± 0,09) de maneira dependente de concentração. Em relação a atividade antioxidante nas dosagens de GSH, MDA e H2S, observou-se que Ssan-HA não promove depleção de grupos sulfidrilas enquanto que os níveis de MDA mostram uma diminuição significativa após tratamento por via intraperitoneal em todas as doses testadas. Ocorreu ainda um aumento dos níveis de H2S nas doses de 1, 10 e 20 mg/kg. Na avaliação dos parâmetros hemodinâmicos (PAM e FC) observou-se que o extrato etanólico Ssan-EtOH nas doses (0,5; 1; 5; 10; 20 e 30 mg.kg-1 i.v.) induziu hipotensão associada a bradicardia. Esse efeito não foi alterada na presença de LNAME (20 mg/kg, i.v.), no entanto, foi alterado na presença de atropina (2 mg/kg, i.v.). Conclui-se que a fração Ssan-HA induz vasorrelaxamento envolvendo a eNOS e canais de K+ além da inibição do influxo de cálcio. Adicionalmente a Ssan-HA induz alterações nos níveis de GSH, MDA e aumento do H2S. Esses efeitos contribuem para a ação do Ssan-EtOH sobre a PAM uma vez que a fração Ssan-HA foi obtida a partir do extrato supracitado. ABSTRACT: The species Sida santaremnensis H. Monteiro (Malvaceae) is a shrub known as "guaxuma" or "bassourinha". A previous study demonstrated a vasorelaxant effect of the ethanolic extract (Ssan-EtOH) obtained from the aerial parts of this species in the superior mesenteric artery isolated from the rat. The objective of this study was to investigate the effect of (Ssan- EtOH) and hydroalcoholic fraction (Ssan-HA) on the cardiovascular system of rodents. Male Wistar rats (250-300 g) and Swiss mice (25-30 g) were all obtained from the NPPM vivarium. The animals were euthanized according to Resolution 2012 / CFMV and CEEA-UFPI 008/2012, the mesenteric artery was removed and cleaned of adipose tissue and sectioned into rings (2-4 mm) that were immersed in vats for an isolated organ containing solution of Tyrode (37 ºC with 95% with O2 and 5% in CO2). After stabilization for 1 hour the rings were pre-contracted with phenylephrine (10μM) or 80mM KCl and the isometric stresses were obtained through AQCAD software 2.06. In the evaluation of the antioxidant activity, mouse heart homogenate was used. The hypotensive activity was verified through implantation of a polyethylene catheter in the femoral artery and left femoral vein through a surgical procedure under anesthesia. The records were obtained after 24 hours following this procedure and were obtained through the acquisition system (AQCAD 2.06). The results demonstrate that Ssan-HA (0.1 to 750 μg / mL) promotes vasorelaxant effect in preparations with vascular endothelium (pD2 = 1.42 ± 0.04) pre-contracted with phenylephrine. This effect was attenuated after removal of the endothelium (pD2 = 2.01 ± 0.05) and in the presence of 100 μM L-NAME (pD2 = 1.84 ± 0.06 * or TEA 3 mM pD2 = 2,18 ± 0,05*). Increasing concentrations (81, 243, 500 and 750 μg / mL) of Ssan-HA inhibited concentrationdependent contractions induced by the cumulative addition of phenylephrine (10-9-10-5 M), (Emma = 91.64 ± 2.27%, Emma = 51.11 ± 6.32%, Emma = 20.16 ± 2.15%, Emma = 7.22 ± 0.01%, respectively), a response similar to that obtained by KCl (20 - 120 mM). In nonendothelial rings pre-contracted with (KCl 80 mM) Ssan-HA promoted vasorelaxant effect (pD2 = 2.22 ± 0.09) in a concentration-dependent manner. In relation to the antioxidant activity in the dosages of GSH, MDA and H2S, it was observed that Ssan-HA does not promote depletion of sulfhydryl groups whereas MDA levels show a significant decrease after intraperitoneal treatment at all doses tested. There was also an increase in H2S levels at doses of 1, 10 and 20 mg / kg. In the evaluation of hemodynamic parameters (MAP and HR), it was observed that the ethanolic extract Ssan-EtOH at doses (0.5, 1, 5, 10, 20 and 30 mg.kg-1 i.v.) induced hypotension associated with bradycardia. This effect was not altered in the presence of L-NAME (20 mg / kg, i.v.), however, it was altered in the presence of atropine (2 mg / kg, i.v.). We conclude that the Ssan-HA fraction induces vasorelaxation involving eNOS and K + channels in addition to inhibition of calcium influx. In addition to Ssan-HA induces changes in GSH, MDA and H2S increase levels. These effects contribute to the action of Ssan-EtOH on MAP since the Ssan-HA fraction was obtained from the aforementioned extract.