ENSAIOS PRÉ-CLÍNICOS COM UM DERIVADO SEMISSINTÉTICO DO CARVACROL: insumos para o desenvolvimento de novos fitofármacos

Abstract

RESUMO: O acetato de carvacrila (AC) é um derivado acetilado do carvacrol, quimicamente definido como 5-isopropil-2-metilfenil acetato e que possui atividade anti-helmíntica, ansiolítica, anti-inflamatória e antinociceptive. Entretanto, ainda não há pesquisas sobre a toxicidade aguda, propriedades genotóxicas e antioxidantes desse composto. Assim, o presente estudo teve por objetivo a investigação da sua toxicidade, genotoxicidade e seu potencial antioxidante. Para tanto, foi realizada uma avaliação da toxidade aguda após a administração do AC em camundongos Swiss (25-30 g), 2 meses de idade, de ambos os sexos tratados com veículo, 1000 e 2000 mg kg-1 por via oral (v.o) e intraperitoneal (i.p) sobre os parâmetros fisiológicos, bioquímicos e hematológicos, bem como verificado seus efeitos sobre a atividade locomotora e coordenação motora em camundongos. Além disso, foi determinada dose letal 50% (DL50) desse monoterpeno. Em adição, nos camundongos que receberam o tratamento agudo com acetato de carvacrila, a genotoxicidade foi avaliada por meio do ensaio cometa, em diferentes momentos (24 e 72 h), tanto em células do sangue periférico quanto no hipocampo destes camundongos. Para complementar, foi avaliada a capacidade antioxidante in vitro do AC por meio da eliminação dos radicais 1,1difenil-2-picrilhidrazil (DPPH•) e ácido 2,2'-azinobis-3 etilbenzotiazolina-6-sulfônico (ABTS•+) e pelo potencial redutor. Os resultados evidenciaram que a administração aguda com as doses selecionadas do AC, não induziu modificações significativas nos dados fisiológicos, bioquímicos e hematológicos. O AC não interferiu na atividade locomotora dos animais, entretanto, a dose de 2000 mg kg-1 produziu uma redução da coordenação motora dos animais quando comparado com o grupo controle. O estudo de toxicidade aguda indicou que o tratamento com AC por via oral, nas doses selecionadas, foi bem tolerado em todos os animais tratados, sugerindo sua segurança para posteriores investigações. A DL50 para via i.p foi de 1542,21 mg kg-1 em camundongos. O AC nas doses de 1000 e 2000 mg kg-1 pode induzir danos ao DNA em células do sangue periférico e hipocampo de camundongos machos e fêmeas pelo aumento significativo no índice de dano (ID) e frequência de dano (FD), em relação ao grupo veículo. Entretanto, houve redução significativa do ID e FD de machos (2000 mg kg-1) e fêmeas (1000 e 2000 mg kg-1), após 72h do tratamento, sugerindo uma capacidade de células do sangue periférico de camundongos tratados de forma aguda com ACem reparar danos genéticos. Os resultados antioxidantes demonstraram que o AC nas concentrações de 0,9, 1,8, 3,6, 5,4 e 7,2 µg mL-1 tem a capacidade de atuar na remoção dos radicais DPPH• (CE50 = 6,27 µg mL-1) e ABTS•+ (CE50 = 5,46 µg mL-1), e potencial redutor (CE50 = 3,2 µg mL-1). ABSTRACT: Carvacryl acetate (CA) is an acetylated derived of carvacrol, chemically defined as 5-isopropyl-2-methylphenyl acetate and that has anthelmintic, anxiolytic, anti-inflammatory and antinociceptive proven pharmacological activity. However, there is no research on acute toxicity, genotoxic and antioxidant properties of this compound. Thus, the present study aimed to investigate the toxicity, genotoxicity and its antioxidant potential. To this end, an evaluation of acute toxicity following administration of AC in Swiss mice (25-30 g), 2 months old, of both sexes treated with vehicle, 1000 and 2000 mg kg-1 by oral (p.o) and intraperitoneally (i.p) route on the physiological, biochemical and hematological parameters and checked their effects on locomotor activity and motor coordination in mice. Furthermore, it was determined lethal dose 50% (LD50) of this monoterpene. In addition, in mice that received acute treatment with carvacryl acetate, the genotoxicity was evaluated by the comet assay at differents times (24h and 72h) in both the peripheral blood cells and in the hippocampus of these mice. To complement, was evaluated the in vitro antioxidant capacity of CA by the elimination of the radicals 1,1 diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH•) and acid 2,2'-azinobis-3 ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS•+) and by potential reducer. The results showed that acute administration of CA with selected doses did not induce significant changes in physiological, biochemical and haematological data. The CA did not affect the locomotor activity of the animals, however, the dose of 2000 mg kg-1 produced a reduction of motor coordination of the animals when compared with the control group. The acute toxicity study indicated that the treatment with CA orally in the selected doses, was well tolerated in all treated animals, suggesting its security for further investigations. The LD50 for i.p route was 1542.21 mg kg-1 in mice. The CA at doses of 1000 and 2000 mg kg-1 can induce DNA damage in peripheral blood cells and hippocampus from male and female mice by a significant increase in damage index (DI) and damage frequency (DF) in relation to vehicle group. However, a significant reduction of ID and FD of males (2000 mg kg-1) and females (1000 and 2000 mg kg-1) after 72h of the treatment, suggesting a capacity of peripheral blood cells of mice treated acutely with CA in repairing genetic damage. The results antioxidants showed that the CA at concentrations of 0.9, 1.8, 3.6, 5.4 and 7.2 µg mL-1 has the capacity to act on removal of DPPH• radical (EC50 = 6.27 µg mL-1) and ABTS•+ (EC50 = 5.46 µg mL-1), and potential reducer (EC50 = 3.2 µg mL-1).