EFEITO DA SUPLEMENTAÇÃO COM ZINCO NA EXPRESSÃO GÊNICA DE METALOPROTEÍNAS E NA MODULAÇÃO DE CITOCINAS INFLAMATÓRIAS NA RETOCOLITE ULCERATIVA

Abstract

RESUMO: INTRODUÇÃO:A Retocolite Ulcerativa (RCU) é caracterizada por repostas imunológicas contra o próprio trato gastrointestinal, causando inflamação crônica, com aumento na produção de citocinas pró-inflamatórias e espécies reativas de oxigênio (EROs). Nesse sentido, destaca-se a importância do aporte adequado de zinco, mineral antioxidante, que atua na neutralização de EROs e na modulação da inflamação.MÉTODOS:Estudo de intervenção, cego, que envolveu 41 pacientes diagnosticados com RCU em remissão e atividade da doença, de ambos os sexos, e faixa etária entre 20 e 69 anos. Todos os pacientes foram avaliados no tempo inicialdo estudo (T0), e com base nas concentrações de zinco plasmático, receberam suplementação com 35 mg de gluconato de zinco/dia durante 30 dias ou com amido de milho, por igual período, e, foram reavaliados no tempo final do estudo (T1). O consumo alimentar habitual foi avaliado com Registro Alimentar de 3 dias. As análises de zinco plasmático e eritrocitário foram realizadas por espectrofotometria de absorção atômica de chama. Os níveis séricos de IL-6, IL-10 e TNF-α, foram determinados por citometria de fluxo. E a expressãodos genes codificadores da metalotioneína (MT1G) e da proteína transportadora de zinco Zip14 foi determinada pela reação em cadeia de polimerase quantitativa em tempo real. RESULTADOS:Os percentuais de adequação de nutrientes revelaram consumo inadequado de calorias e zinco, sendo este estatisticamente menor no grupo suplementado (P<0,05). O consumo de proteínas, carboidratos e lipídios tiveram distribuição adequada em relação ao aporte calórico. E o percentual de probabilidade de adequação da ingestão de zinco foi significativamente menor no grupo suplementado. As médias de zinco no plasma e no eritrócito indicaram diferença significativa no T0 entre grupo suplementado e placebo, com aumento significativo após a suplementação tanto no plasma (P<0,01) como no eritrócito (P<0,05). Apesar do aumento significativo nos parâmetros sanguíneos de zinco, nem todos os pacientes conseguiram alcançar o valor mínimo de referência para zinco plasmático e a média das concentrações eritrocitárias de zinco ainda permaneceram abaixo do valor mínimo de referência. As concentrações séricas de citocinas não variaram significativamente do T0 para o T1. Observou-se que, no T0, a IL-10 foi significativamente maior no grupo placebo e correlacionou-se positivamente com TNF-αno T1. As médias da expressão gênica da MT1G e da ZIP 14 reduziram significativamente após a suplementação (P<0,05). Relacionaram-se positivamente as expressões da MT1G e da Zip 14 e as concentrações séricas de TNF-αcom a expressão da MT1G no T0. Houve correlação negativa entre zinco plasmático e expressão da MT1G e entre adequação da ingestão alimentar de zinco e expressão da ZIP 14 CONCLUSÃO: A suplementação com zinco modula a expressão gênica de proteínas carreadoras deste mineral, refletindo na sua melhor distribuição nos compartimentos celulares e em importantes alterações na resposta imunológica de pacientes com RCU. ABSTRACT: INTRODUCTION:Ulcerative Colitis (UC) is characterized by immune responses against own gastrointestinal tract, causing chronic inflammation, with increase proinflammatory cytokines production and reactive oxygen species (ROS). In this sense, it highlights the importance of adequate intake of zinc, an antioxidant mineral that acts to neutralize ROS andmodulate inflammation. METHODS:Intervention study, blind, which involved 41 ulcerative colitis patients in remission and disease activity, of bothsex and aged 20 and 69 years. All patients were evaluated at baseline (T0), and according to plasma zinc concentrations were supplemented with 35 mg zinc gluconate/day for 30 days or corn starch for the same period and were reassessed after intervention (T1). The usual dietary intake was assessed with 3 days Food Registration. Analyses of plasma and erythrocyte zinc were carried out by atomic absorption spectrophotometry flame. Serum IL-6, IL-10 and TNF-αwere determined by flow cytometry. And the expression of genes encoding metallothionein (MT1G) and carrier protein Zip14 zinc was determined by quantitative polymerase chain in real time reaction.RESULTS:Nutrient adequacy percentages have revealed inadequate intake of calories and zinc, which were statistically lower in the supplemented group (P <0.05). The consumption of protein, carbohydrates and lipids shown adequate distribution in relation to calorie intake. And adequacy of probability percentage of zinc intake was significantly lower in supplemented group. Plasma zinc and erythrocyte mean indicated significant difference between the 2 groups studied at T0 with a significant increase after supplementation in both, plasma (P <0.01) and erythrocyte (P <0.05). Despite the significant increase in blood zinc parameters, not all patients have achieved the minimum reference value for plasma zinc and mean of zinc erythrocyte concentrations remained below the minimum referencevalue. Serum concentrations of cytokines did not change significantly from T0 to T1. It was observed that, at T0, IL-10 was significantly higher in placebo group and is positively correlated with TNF-αat T1. The mean of MT1G and ZIP 14 gene expression reduced significantly after supplementation (P <0.05). There was positive relation between MT1G and Zip 14 expression and serum concentrations of TNF-αand MT1G expression at T0. There was a negative correlation between plasma zinc and MT1G expressionand between adequate dietary intake of zinc and ZIP 14 expression CONCLUSION:Zinc supplementation modulates gene expression of zinc carrier proteins reflecting on their best distribution in cell compartments andon important changes in the immune response of patients with ulcerative colitis.