CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS ASSOCIADAS À MEMBRANA CELULÓSICA BACTERIANA: ensaio pré-clínico na reparação de ruptura de tendão calcâneo em coelhos.

Abstract

RESUMO: Introdução. A engenharia tecidual está sendo redesenhada por estudos promissores que apresentam grande potencial para produzir biomateriais capazes de formar tecidos funcionais. A expansão e adesão celular depende da qualidade e de fatores determinantes da superfície do scaffold, sendo, requisito para o sucesso dos implantes biológicos. Essa pesquisa teve como objetivo, caracterizar e avaliar o comportamento in vitro das células-tronco mesenquimais de medula óssea (CTMMO) de coelhos quando associadas à membrana celulósica bacteriana (MCB), verificando a adesão, capacidade de ativação de células do sistema imune, citotoxicidade e toxicidade do biomaterial. Métodos. Amostras de medula óssea de coelhos foram coletadas. Células-tronco mesenquimais foram isoladas de aspirados de medula óssea para ensaios de unidade formadora de colônia fibroblastóide (UFC-F), indução da diferenciação osteogênica, condrogênica e adipogênica. Foi realizado estudo da adesão celular à MCB avaliado por microscopia eletrônica de varredura (MEV) nos intervalos de tempo 1, 7 e 14 dias. A citotoxicidade da MCB foi verificada por ensaios de indução de óxido nítrico (NO), a toxicidade foi avaliada pelo método de colorimetria – MTT, além da atividade fagocítica. Resultados. O ensaio de unidade formadora de colônias fibroblastóides (UFC-F) mostrou células com morfologia fibroblastóide organizadas em colônias distribuídas pela área de superfície da cultura. Na curva de crescimento no decorrer de 15 dias, foram observadas duas fases distintas lag e log. A multipotencialidade das células ficou evidente após indução de linhagens osteogênica, condrogênica e adipogênica. Após 24 horas, as CTMMO apresentaram-se ancoradas na MCB, no sétimo dia de cultivo observou-se o espalhamento do citoplasma e, com 14 dias as células apresentavam-se totalmente integradas ao biomaterial. No ensaio de atividade fagocítica, houve significativa ativação de macrófagos, e quanto às concentrações de óxido nítrico e análise com MTT, não foi verificado efeito citotóxico do biomaterial. Conclusão. A membrana celulósica bacteriana possibilitou adesão e expansão de células progenitoras da medula óssea, com perfil citotóxico estável, apresentando-se, assim, como um biomaterial com potencial para a engenharia de tecidos.