PRODUTOS NATURAIS COM POTENCIAL USO NA CARCINICULTURA E SEUS EFEITOS NA IMUNOESTIMULAÇÃO DE LITOPENAEUS VANNAMEI (BOONE, 1931)

Abstract

RESUMO:Diante do atual quadro sanitário vivenciado na cadeia produtiva do camarão Litopenaeus vannamei a estimulação da imunidade e melhoria da resistência a doenças tornou-se primordial para o crescimento sustentável da indústria carcinícola. Portanto, objetivou-se com o presente estudo indicar um imunoestimulante natural derivado de plantas com capacidade de melhorar a resistência de L. vannamei contra infecção do vírus da síndrome da mancha branca (WSSV). Foram realizados estudos de caracterização química, atividade antibacteriana, atividade antioxidante, e toxicidade aguda em náuplios de Artemia salina, com os óleos essenciais (OEs) de Achyrocline satureioides, Alpinia zerumbet, Cymbopogon citratus, C. winterianus, Lippia alba, L. origanoides, Mesosphaerum suaveolens, Ocimum gratissimum, O. basilicum, Pilocarpus microphyllus, Psidium guajava, Varronia curassavica, Allium sativum, Citrus limon, Salvia officinalis e Thymus vulgaris. Também foram utilizados os extratos etanólicos (EEs) das plantas Spondias mombin, Myracrodruon urundeuva e Punica granatum. Com base nos resultados preliminares, avaliou-se o efeito da suplementação dietética dos extratos etanólicos de Myracrodruon urundeuva e Punica granatum (EEMP) na modulação de genes imunorelacionados e na sobrevivência de L. vannamei contra infecção causada por WSSV. Todos os OEs e EEs apresentaram importante atividade antibacteriana contra Vibrio parahaemolyticus. Na mistura dos EEs de Punica granatum e Myracrodruon urundeuva (1:3) foi observado o melhor resultado de concentração bactericida mínima (0,078 mg.mL-1 ). Os EEs apresentaram os maiores valores de atividade antioxidante, destacando-se a aroeira (IC50 = 18,22 ± 0,39 µg.mL-1). Os EEs não apresentaram atividade tóxica (CL50 > 1000 µg.mL-1 ) em náuplios de A. salina, enquanto os OEs foram considerados tóxicos. A suplementação dietética de EEMP na dose de 1g.kg-1 promoveu aumento da atividade antibacteriana da hemolinfa dos camarões e da contagem total de hemócitos, além de modular importantes genes relacionados ao sistema imune de L. vannamei (Litvan ALF-A, Litvan ALF-C, LvIMD, LvDcr1, LvAgo1, LvproPO2, LvPPAE2, Lvα2M-2 e LvCAT). O aumento da concentração de EEMP não ocasionou efeito dose-resposta. A sobrevivência dos animais alimentados com EEMP 1g.kg-1 foi significativamente maior que a dos animais do grupo controle após cinco dias de infecção. Em conclusão, sugere-se que o EEMP promove estimulação da imunidade inata e melhoria da resistência contra infecção causada por WSSV em L. vannamei. Apesar dos melhores resultados serem verificados com EE, os OEs também possuem potencial de utilização na carcinicultura, tendo em vista as atividades biológicas verificadas.ABSTRACT: In view of the current health situation in the shrimp Litopenaeus vannamei production chain, increased immunity and disease resistance has become paramount for the sustainable growth of the carcass industry. Therefore, the aim of this study is to indicate a plant-derived natural immunostimulator capable of improving the resistance of L. vannamei against infection with white spot syndrome virus (WSSV). Studies were performed of chemical characterization, antibacterial activity, antioxidant activity, and acute toxicity in Artemia salina nauplii with essential oils (OEs) of the species Achyrocline satureioides, Alpinia zerumbet, Cymbopogon citratus, C. winterianus, Lippia alba, L. origanoides, Mesosphaerum suaveolens, Ocimum gratissimum, O. basilicum, Pilocarpus microphyllus, Psidium guajava, Varronia curassavica, Allium sativum, Citrus limon, Salvia officinalis and Thymus vulgaris. Also the ethanolic extracts (EEs) of the plants Spondias mombin, Myracrodruon urundeuva and Punica granatum were used. Based on the preliminary results, the effect of dietary supplementation of the ethanolic extracts of Myracrodruon urundeuva and Punica granatum (EEMP) on the modulation of immunorelated genes and survival of L. vannamei against WSSV infection was evaluated. All OEs and EEs showed important antibacterial activity against Vibrio parahaemolyticus. In the mixture of Punica granatum and Myracrodruon urundeuva (1: 3), the best result of minimum bactericidal concentration (0.078 mg.mL-1 ) was observed. The EEs presented the highest values of antioxidant activity, especially aroeira (IC50 = 18.22 ± 0.39 µg.mL-1 ). The EEs showed no toxic activity (LC50> 1000 µg.mL-1 ) in A. salina nauplii, while the EOs were considered toxic. Dietary supplementation of EEMP at a dose of 1g.kg-1 promoted increased antibacterial activity of shrimp hemolymph and total hemocyte count, and modulated important genes related to the L. vannamei immune system (Litvan ALF-A, Litvan ALF-C, LvIMD, LvDcr1, LvAgo1, LvproPO2, LvPPAE2, Lvα2M-2 and LvCAT). Increasing concentration of EEMP caused no dose response effect. The survival of animals fed with 1g.kg-1 EEMP was significantly higher than that of control animals after five days of infection. In conclusion, it is suggested that EEMP promotes innate immunity stimulation and improved resistance against WSSV infection in L. vannamei. Although the best results are verified with EE, SOs also have potential for use in shrimp farming, considering as verified biological activities.