ESTUDO DO EFEITO TERAPÊUTICO DE FORMULAÇÃO EM GEL ORABASE CONTENDO POLISSACARÍDEO DA GOMA DE CAJUEIRO (ANACARDIUM OCCIDENTALE LINN.) EM RATOS COM PERIODONTITE INDUZIDA POR LIGADURA

Abstract

RESUMO: A periodontite é uma doença inflamatória crônica altamente prevalente no mundo. Sua causa está relacionada à reação imuno-inflamatória do hospedeiro contra biofilmes microbianos subgengivais, que resulta em destruição periodontal, eventualmente levando à perda do dente. Este estudo teve como objetivo explorar o efeito da administração tópica de formulações em gel orabase contendo goma do cajueiro (GC), um polissacarídeo complexo oriundo de Anacardium occidentale L., quanto à aspectos clínicos e moleculares relacionados à periodontite, como perda óssea alveolar e a expressão transcricional de genes relacionados às respostas imuno-inflamatórias e à homeostase tecidual. Fêmeas de ratos Wistar foram submetidas à inserção de uma ligadura de nylon ao redor dos primeiros molares inferiores para indução de periodontite. Grupos de 7 animais foram aleatoriamente escolhidos para receberem aplicações tópicas diárias dos seguintes tratamentos: salina 0,9% (grupo salina), gel veículo (grupo veículo), gel orabase contendo 5% da GC (grupo GC5%), gel orabase contendo 15% da GC (grupo GC15%) e clorexidina gel 2% (grupo CHX2%). Um grupo de animais sem periodontite induzida por ligadura foi incluído como controle (grupo saudável). Após 20 dias de tratamento, os ratos foram eutanasiados. Amostras de sangue foram coletadas para análises bioquímicas e para contagem total de glóbulos brancos. As mandíbulas foram removidas e processadas para análise da perda óssea alveolar. Os tecidos gengivais ao redor da ligadura foram avaliados quanto à infiltração de neutrófilos pelo ensaio da atividade da mieloperoxidase (MPO), e quanto à expressão de genes envolvidos na patogênese da periodontite por qRT-PCR (TaqMan Gene Expression Assays). De acordo com a análise dos níveis de MPO e da contagem total de glóbulos brancos, os grupos GC5%, GC15% e CHX2% apresentaram inflamação local e sistêmica significativamente reduzidas, comparado aos grupos salina e veículo. Porém, somente nos grupos GC15% e CHX2% a perda óssea alveolar foi prevenida de forma estatisticamente significativa (p < 0,05). A aplicação tópica da formulação contendo 15% da GC e clorexidina gel 2% foram eficazes em inibir significativamente a expressão do mRNA de genes inflamatórios (IL-1β, RANKL, COX-2, NOS-2, INF-γ, TGFβ1 e OSCAR) e de genes relacionados à degradação da matriz extracelular (MMP-2, MMP-8, MMP-9, MMP-13, MMP-14, TIMP-1 e TIMP-2). Por outro lado, não exerceram influência sobre os níveis do mRNA de RANK, OPG, IL-4, IL-10 e MYD88. Para todos os parâmetros analisados, não houve diferenças estatisticamente significativas entre os grupos salina e veículo, bem como entre os grupos GC15% e CHX2%. Em conclusão, a GC se mostrou eficaz em amenizar o quadro geral da inflamação no periodonto e suas consequências destrutivas sobre o osso alveolar, abrindo perspectivas para o uso de formulações tópicas contendo GC para prevenção ou tratamento adjuvante da periodontite. ABSTRACT: Periodontitis is a highly prevalent chronic inflammatory disease worldwide. It is mainly promoted by the immune-inflammatory responses of the host against microbial biofilms that accumulate on dental surfaces, which in turn results in the destruction of periodontal tissues, eventually leading to tooth loss. This study aimed to explore the effect of topically administering an orabase gel containing cashew gum (CG), a complex polysaccharide from Anacardium occidentale L., on clinical and molecular aspects related to periodontitis such as alveolar bone loss and the transcriptional expression of genes related to immune-inflammatory responses and tissue homeostasis. Female Wistar rats were subjected to the insertion of a nylon ligature around the lower first molar to induce periodontitis. After ligature placement, animals were randomly divided into groups of 7 to receive daily topical applications of the following treatments: saline 0.9% (saline group), vehicle gel (vehicle group), orabase gel containing CG at 5% (CG5% group), orabase gel containing CG at 15% (CG15% group), and 2% gel chorexidine (CHX2% group). A group without ligature-induced periodontitis was included as control (healthy group). Rats were euthanized after 20 days of treatment. Blood samples were collected for biochemical analysis and total white blood cell (WBC) count. The jaws were removed and processed for alveolar bone loss analysis. The gingival tissues around the ligature were evaluated for neutrophil influx by myeloperoxidase activity assay (MPO) and gene expression by real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR; TaqMan Gene Expression Assay). According to MPO levels and WBC count, GC5%, GC15%, and CHX2% groups showed significantly reduced local and systemic inflammation compared to saline and vehicle groups; however, alveolar bone loss was prevented in a statistically significant way (p <0.05) only in GC15% and CHX2% groups. Topical application of the gel formulation containing GC at 15% or chlorhexidine gel 2% significantly inhibited mRNA expression of inflammatory genes (IL-1β, RANKL, COX-2, NOS-2, INF-γ, TGFβ1 e OSCAR) and genes related to extracellular matrix degradation (MMP-2, MMP-8, MMP-9, MMP-13, MMP-14, TIMP-1 e TIMP-2). On the other hand, there was no influence on RANK, OPG, IL-4, IL-10 and MYD88 mRNA levels. In all the analyzed parameters, there were no statistically significant differences between the saline and vehicle groups, as well as between the GC15% and CHX2% groups. In conclusion, GC was effective in reducing the overall inflammation in the periodontium and its destructive consequences on the alveolar bone, opening perspectives for the use of GC-containing topical formulations for the prevention or adjuvant treatment of periodontitis.